背景:機體骨量的平衡由骨吸收和骨形成所維持,破骨細胞是體內唯一具有骨吸收功能的細胞,其數(shù)量和活性增加將導致骨質疏松癥發(fā)生。數(shù)據(jù)統(tǒng)計顯示骨質疏松使得老年人發(fā)生髓部骨折的機會增加50%,這給社會和家庭都帶來了沉重的負擔。目前對于骨質疏松主要以雌激素替代及藥物治療為主,但是副作用明顯,甚至增加腫瘤發(fā)生的風險,因此尋求新的治療方式對臨床意義重大。破骨細胞分化受多條信號通路調控,經(jīng)典的RANK/RANKL（Receptor Activator for Nuclear Factor-κB Ligand）信號通路是對破骨細胞分化最為重要。低頻脈沖電磁場（pulsed electromagnetic felds,PEMF）作為新的治療手段已經(jīng)應用于骨質疏松癥的局部治療,取得了令人滿意的臨床效果。許多基礎也研究證實PEMF能夠影響破骨細胞分化,但是具體的機制未完全闡明。細胞內活性氧（ROS）是細胞線粒體電子鏈傳遞過程中相關酶促反應的副產(chǎn)物。近年來的研究顯示,細胞內ROS的變化與破骨細胞分化成熟密切相關。有一些文獻報道PEMF可降低其他細胞內ROS水平,因此我們猜想PEMF可能通過調控細胞內ROS水平抑制... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學廣東省

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－２?ＰＥＭＦ抑制ＲＡＮＫＬ誘導的破骨細胞分化Ａ：?ＴＲＡＰ誘導４天之后，各組細胞經(jīng)過??ＴＲＡＰ染色后光鏡下（ｌ〇ｘ）所見圖像，ＲＡＮＫＬ可以促進多核且不規(guī)則紫紅色多核破骨細??

測目標ＲＮＡ表達水平，試驗的結果表明：與??Ｃｏｎｔｒｏｌ組相比的話，ＲＡＷ２６４．７細胞經(jīng)過ＲＡＮＫＬ誘導處理后，ＲＡＮＫＬ組三??個標志基因（ＣＴＳＫ、ＮＦＡＴｃｌ、ＴＲＡＰ）的表達水平明顯升高，在第２天和第４??天時，試驗結果呈現(xiàn)相同趨勢。另一方面，ＲＡＷ２６４．７細胞經(jīng)過ＰＥＭＦ刺激??后，三個標志基因的表達水平明顯下降。Ｓ卩：與ＲＡＮＫＬ組相比較，??ＲＡＮＫＬ＋ＰＥＭＦ組三個基因表達水平明顯下降，第４天的實驗結果與第２天相??同，組間差異具有統(tǒng)計學意義，Ｐ＜〇．〇５?（如圖２－１所示）。??Ａ?Ｂ??｜?５〇０１?ｍ?■?Ｃｏｎｔｒｏｌ?｜?５１?■?■?Ｃｏｎｔｒｏｌ??Ｚ?４００－?Ｔ?＊?？?ＲＡＮＫＬ?？?４－?＾?Ｈ?ＲＡＮＫＬ??？＝?＾?？?ＲＡＮＫＬ＋ＰＥＭＦ?１?■?＊＊?？?ＲＡＮＫＬ＋ＰＥＭＦ??ｆｉ?３０°－?ｍ?＿?■?＿?ＰＥＭＦ?＾?３－?｜?Ｊ．?ｍ?ＰＥＭＦ??ｈｉ?＿＿?ＩＩ?ｉｌｌｉ??＾?Ｚ?＾??ｃ??ｌ?＾?ｍ?Ｃｏｎｔｒｏｌ??ｔ?８００－?Ｗ?＊?＿?ＲＡＮＫＬ??？｜?ｉ?？?ＲＡＮＫＬ＋ＰＥＭＦ??￡?６００＇?ｍ?＾?圍■?＿?ＰＥＭｆ??卜＿?｜｜｜?ＩＩ??？Ｖ?ｂ＞??圖２－１?ＰＥＭＦ抑制ＲＡＮＫＬ誘導的破骨細胞分化相關基因表達ＲＡＮＫＬ處理細胞后三個基??２４??

?領士學位論文???Ｂ?２５０??｜?＃＃??｜?＿?２００－?＊??１?１?１５０－?－?＾??Ｎａｌｌ??ｃ／?，?／??°?＾??圖３－ｌ?ＰＥＭＦ抑制ＲＡＷ２６４．７細胞內ＲＯＳ水平地升高?Ａ：在熒光顯微鏡下細胞內活性氧??呈現(xiàn)綠色斑點狀。Ｂ：在５３０！？條件下檢測各組ＤＣＦ的ＯＤ值，每組實驗重復３次，組間??差異具有統(tǒng)計學意義。??Ｆｉｇ．?３－ｌ?ＰＥＭＦ?ｒｅｄｕｃｅｄ?ｔｈｅ?ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ?ｌｅｖｅｌ?ｏｆ?ｉｎｄｕｃｅｄ?ＲＯＳ．?ＲＡＷ２６４．７?ｃｅｌｌｓ?ｗｅｒｅ?ｔｒｅａｔｅｄ??ｗｉｔｈ?Ｈ２Ｏ２?（ｌ?ｍＭ）?ｆｏｒ?３０?ｍｉｎ?ｉｎ?ｔｈｅ?ａｂｓｅｎｃｅ?ａｎｄ?ｐｒｅｓｅｎｃｅ?ｏｆ?ＰＥＭＦ．?（Ａ）?Ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ?ｏｆ??ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ?ＲＯＳ?ｉｎ?Ｈ２〇２－ｔｒｅａｔｅｄ?ｇｒｏｕｐｓ?ｗａｓ?ａｓｓｅｓｓｅｄ?ｂｙ?ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ?ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ?（ｓｃａｌｅ??ｂａｒ＝ｌ００?｜ｉｍ）?ａｎｄ?（Ｂ）?ＯＤ?ｖａｌｕｅｓ?ｏｆ?ＤＣＦ?ｉｎ?ｔｈｅｓｅ?ｇｒｏｕｐｓ?ｗｅｒｅ?ｍｅａｓｕｒｅｄ?ｕｓｉｎｇ?ａ?ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ??ｒｅａｄｅｒ?ａｔ?Ｘ＝５３０?ｎｍ．?＃＃Ｐ＜０．０ｌ?ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｔｏ?ｔｈｅ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｇｒｏｕｐ；?＊Ｐ＜０．０５?ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｔｏ?Ｈ２０２?ａｌｏｎｅ．??ＰＥＭＦ，?ｐｕｌｓｅｄ?ｅｌｅｃｔｒｏｍａｇｎｅｔｉｃ?ｆｉｅｌｄ；?Ｈ２０２，?ｈｙｄｒｏｇｅｎ?ｐｅｒｏｘｉｄｅ；?ＤＣＦ，?２，，７＇－ｄｉｃｈｌｏｒｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ；??ＯＤ


本文編號：3274735