目的:篩選和驗(yàn)證氟作用下大鼠骨肉瘤細(xì)胞差異表達(dá)的miR-23a,利用miR-23a表達(dá)載體和miR-23a反義寡核苷酸探討miR-23a對(duì)染氟UMR-106細(xì)胞成骨活性的影響。方法:1、染氟UMR-106細(xì)胞差異性miRNA的篩選及驗(yàn)證:通過(guò)miRNA芯片篩選染氟UMR-106細(xì)胞差異表達(dá)的mi R-23a作為研究對(duì)象,通過(guò)Real-time PCR法驗(yàn)證mi R-23a表達(dá)水平,并通過(guò)生物信息學(xué)分析,預(yù)測(cè)miR-23a的靶基因及其參與的生物學(xué)功能及信號(hào)通路。2、mi R-23a對(duì)染氟UMR-106細(xì)胞成骨活性的影響:（1）NaF對(duì)UMR-106細(xì)胞成骨活性影響:以0、5×10²、10³和2×10³μmol/L NaF作用UMR-106細(xì)胞24h、48h和72h,Real-time PCR檢測(cè)ALP、BGP、BMP-2、CoL I、Runx2、Osx mRNA的表達(dá),Western Blot測(cè)定CoL I、Runx2及Osx蛋白表達(dá),磷酸苯二鈉法檢測(cè)ALP活性。（2）mi R-23a在染氟UMR-106細(xì)胞成骨活性變化中... 

【文章來(lái)源】：貴州醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁(yè)數(shù)】：76 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖0-1技術(shù)路線(xiàn)

ent）以及參與的生物過(guò)程（Biological process）。way 分析集靶基因?qū)?DAVID 分析系統(tǒng)，分析其顯著性富均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ X±S）表示，采用 SPSS19.0 軟件本 t 檢驗(yàn)，以 P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。中 miRNA 表達(dá)水平鑒定，RNA 樣本的 OD260/OD280比值在 1.8~2.1 之間，脂糖凝膠電泳可見(jiàn) 28S、18S 和 5S 三條條帶（圖性較好，可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

個(gè)差異表達(dá)的 miRNA。在 NaF 組中有 5 個(gè) miRNA 上調(diào)，5 個(gè) miRNA 下調(diào)，中 miR-23a 上調(diào)（圖 1-2）。表 1-3 部分差異表達(dá) miRNA 芯片鑒定結(jié)果Tab1-3 Expression of miRNA array identification results (part)Accession ID miRNA Name Ratio P-valueMIMAT0000792 rno-miR-23a-3p 1.715 0.0452MIMAT001716 rno-miR-222-5p -2.526 0.0415

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]miR-705對(duì)絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松小鼠的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化功能異常的調(diào)控作用[D]. 楊曉紅.第四軍醫(yī)大學(xué) 2013
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碩士論文
[1]MicroRNA-214在骨關(guān)節(jié)炎發(fā)生發(fā)展中作用的研究[D]. 余曉明.中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院 2016
[2]吡格列酮對(duì)高糖環(huán)境下MC3T3-E1早期成骨細(xì)胞增殖、凋亡和功能蛋白OCN、ALP、BMP2表達(dá)的影響[D]. 李美蓉.福建醫(yī)科大學(xué) 2010



本文編號(hào)：3253124