目的:研究GIT2基因缺失對佐劑性關(guān)節(jié)炎（RA）大鼠關(guān)節(jié)的影響及軟骨細(xì)胞分化的作用機(jī)制。方法:1.收集符合試驗標(biāo)準(zhǔn)的健康雄性（Sprague Dawley）SD大鼠,對大鼠體征進(jìn)行觀察并且稱量大鼠體重。2.32只大鼠隨機(jī)分為正常組、模型（類風(fēng)濕）組,GIT2基因敲除（GIT2-KO）和基因敲除加類風(fēng)濕（GIT2-KO+）組;RT-PCR及Western-blot各組為30,總只數(shù)120。3.本研究采用弗氏完全佐劑注射于左后足跖皮內(nèi)0.1ml誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎（致炎）。4.在第26d后采集大鼠足趾關(guān)節(jié),對正常組、佐劑組、基因敲除（GIT2-KO）組以及基因敲除加佐劑組,大鼠關(guān)節(jié)組織切片進(jìn)行HE染色,進(jìn)行病理組織學(xué)檢查。5.通過qRT-PCR和Western-blot檢測白細(xì)胞介素-1β（1L-1β）,腫瘤壞死因子-α（TNF-α）,聚集蛋白聚糖（Aggrecan）和性別決定基因盒9（Sox9）的表達(dá)。6.利用免疫組化法檢測各組的Ⅱ型膠原。7.分別對正常組、佐劑組、GIT2-KO組以及GIT2-KO+組大鼠于致炎前（0d）,致炎后第10、13、17、21、24天,分別用皮尺（所用皮尺的寬度是5mm... 

【文章來源】：河北醫(yī)科大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】：84 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

通過HE染色對正常組，佐劑組，GIT2-KO組和GIT2-KO+組中大鼠

A）確定多個組的比較。P<0.05 被認(rèn)為具有統(tǒng)計結(jié) 果組織化學(xué)檢查Ⅱ型膠原鑒定軟骨細(xì)胞分化原蛋白是軟骨細(xì)胞的主要成分。根據(jù)免疫組化分正常組的大鼠的軟骨組織中高度表達(dá)，而在佐劑 II 型膠原蛋白表達(dá)明顯減少，基因敲除（GIT織中 II 型膠原蛋白表達(dá)與正常組相比表達(dá)減少）；佐劑組與基因敲除加佐劑組（GIT2-KO+）織中 II 型膠原蛋白表達(dá)增加，有顯著的差異（I 型膠原蛋白作為軟骨細(xì)胞的主要成分，在佐劑關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞分化減弱，同時 GIT2 基因缺失一步減弱。

佐劑組，GIT2-KO 組和 GIT2-KO+組中大鼠的關(guān)節(jié)織腫脹度隨時間的增加而變化Changes of swelling degree with the increase of time in ratl, model, GIT2-KO, and model + GIT2-KO groups. *P < 0.05 ce normal group; #P < 0.05 compared with the model + GIT2-Kere 8 rats in each group and each experiment was repeated five討 論 近年來，GIT 蛋白的研究主要集中在 GIT 蛋白組織表達(dá)分運動與遷移、受體內(nèi)化、膜轉(zhuǎn)運以及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等方面的作用子包括 GIT1 和 GIT2，它們通過與多種蛋白、細(xì)胞因子，如 Cdc42 GTPases，p21 激活激酶（PAK），PAK 相互作用交），MEK1 激酶等相互作用。GIT 和 PIX 結(jié)合協(xié)同形成大的

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3240852