葉酸（folate）是一類水溶性B族維生素,是一碳單位代謝的核心成分,葉酸最高氧化狀態(tài)folic acid（FA）是藥物和膳食補(bǔ)充劑中常見的葉酸類型。外源葉酸在細(xì)胞中被逐級還原為5,10-亞甲基四氫葉酸,是由dUMP從頭合成dTMP的主要甲基供體,因此葉酸缺乏可導(dǎo)致細(xì)胞DNA內(nèi)dUMP/dTMP比值升高、dUTP大量摻入DNA,引起DNA堿基錯配、DNA鏈和染色體斷裂等基因組不穩(wěn)定（Genomic instability,GIN）事件發(fā)生。錯配修復(fù)（Mismatch repair,MMR）系統(tǒng)能通過糾正細(xì)胞復(fù)制和/或重組期間產(chǎn)生的堿基錯配而維持基因組完整性,本文圍繞葉酸缺乏對人結(jié)腸細(xì)胞基因組穩(wěn)定性和miRNA-21-5p表達(dá)的影響、miR-21-5p對MMR系統(tǒng)核心基因hMSH2的靶向性與表達(dá)調(diào)控開展研究。旨在比較葉酸缺乏對不同生理病理狀態(tài)的細(xì)胞基因組穩(wěn)定性的影響差異,同時揭示miRNA響應(yīng)葉酸缺乏并介導(dǎo)錯配修復(fù)基因表達(dá)改變與機(jī)制。根據(jù)本實驗室人淋巴細(xì)胞基因組穩(wěn)定性維護(hù)的FA濃度,研究以FA缺乏濃度（22.6nM）和RPMI1640培養(yǎng)基標(biāo)準(zhǔn)FA濃度（2260nM）分別干預(yù)培養(yǎng)人結(jié)腸上... 

【文章來源】：云南師范大學(xué)云南省

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

預(yù)測hMSH2基因是miR-21的靶基因之一

圖 2.1 雙熒光素酶報告基因 psiCHECKTM-2 載體圖譜Figure2.1 Doubleluciferase reporter gene psiCHECKTM-2 vector map熒光素酶報告基因檢測全基因組 DNA，步驟如下：

圖 2.2 miRNA 提取試劑（Omega）流程圖Figure2.2 miRNA extraction reagent (Omega) flow chart.2.5.3 miRNA-21-5p 表達(dá)水平檢測

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]循環(huán)microRNA-21在實體腫瘤早期診斷中應(yīng)用價值的研究進(jìn)展[J]. 朱鈺倩,郭錫漢,吳暇玉,徐偉江,汪旭.  癌變·畸變·突變. 2017(02)
[2]葉酸缺乏與腫瘤發(fā)生[J]. 張銀玲,薛賡,孫樹漢,張毅.  第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 2016(01)
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[4]DNA甲基化與microRNA相互作用的研究進(jìn)展[J]. 段維霞,江高峰.  公共衛(wèi)生與預(yù)防醫(yī)學(xué). 2010(02)
[5]葉酸代謝與人類基因組穩(wěn)定性的關(guān)系研究進(jìn)展[J]. 汪旭,薛京倫.  國外醫(yī)學(xué).遺傳學(xué)分冊. 2005(05)

碩士論文
[1]miRNA介導(dǎo)靶基因沉默的分析與識別[D]. 成磊.南京航空航天大學(xué) 2011



本文編號：3208132