葉酸（folate）是一類水溶性B族維生素,是一碳單位代謝的核心成分,葉酸最高氧化狀態(tài)folic acid（FA）是藥物和膳食補充劑中常見的葉酸類型。外源葉酸在細胞中被逐級還原為5,10-亞甲基四氫葉酸,是由dUMP從頭合成dTMP的主要甲基供體,因此葉酸缺乏可導致細胞DNA內dUMP/dTMP比值升高、dUTP大量摻入DNA,引起DNA堿基錯配、DNA鏈和染色體斷裂等基因組不穩(wěn)定（Genomic instability,GIN）事件發(fā)生。錯配修復（Mismatch repair,MMR）系統(tǒng)能通過糾正細胞復制和/或重組期間產(chǎn)生的堿基錯配而維持基因組完整性,本文圍繞葉酸缺乏對人結腸細胞基因組穩(wěn)定性和miRNA-21-5p表達的影響、miR-21-5p對MMR系統(tǒng)核心基因hMSH2的靶向性與表達調控開展研究。旨在比較葉酸缺乏對不同生理病理狀態(tài)的細胞基因組穩(wěn)定性的影響差異,同時揭示miRNA響應葉酸缺乏并介導錯配修復基因表達改變與機制。根據(jù)本實驗室人淋巴細胞基因組穩(wěn)定性維護的FA濃度,研究以FA缺乏濃度（22.6nM）和RPMI1640培養(yǎng)基標準FA濃度（2260nM）分別干預培養(yǎng)人結腸上... 

【文章來源】：云南師范大學云南省

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

預測hMSH2基因是miR-21的靶基因之一

圖 2.1 雙熒光素酶報告基因 psiCHECKTM-2 載體圖譜Figure2.1 Doubleluciferase reporter gene psiCHECKTM-2 vector map熒光素酶報告基因檢測全基因組 DNA，步驟如下：

圖 2.2 miRNA 提取試劑（Omega）流程圖Figure2.2 miRNA extraction reagent (Omega) flow chart.2.5.3 miRNA-21-5p 表達水平檢測

【參考文獻】：
期刊論文
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[2]葉酸缺乏與腫瘤發(fā)生[J]. 張銀玲,薛賡,孫樹漢,張毅.  第二軍醫(yī)大學學報. 2016(01)
[3]抗葉酸制劑與結直腸癌[J]. 顧湘,朱海杭.  中國腫瘤臨床與康復. 2011(06)
[4]DNA甲基化與microRNA相互作用的研究進展[J]. 段維霞,江高峰.  公共衛(wèi)生與預防醫(yī)學. 2010(02)
[5]葉酸代謝與人類基因組穩(wěn)定性的關系研究進展[J]. 汪旭,薛京倫.  國外醫(yī)學.遺傳學分冊. 2005(05)

碩士論文
[1]miRNA介導靶基因沉默的分析與識別[D]. 成磊.南京航空航天大學 2011



本文編號：3208132