發(fā)布時(shí)間：2021-05-26 09:30

　　目的:構(gòu)建絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松大鼠模型,分析miR-30a-5p在成骨細(xì)胞分化中的功能。方法:將SD大鼠分為雌激素組、假手術(shù)組和模型組;取脛骨組織進(jìn)行miRNA測(cè)序并差異表達(dá)分析;檢測(cè)miR-30a-5p在各組大鼠骨中的表達(dá)含量;通過(guò)qRT-PCR檢測(cè)miR-30a-5p表達(dá)對(duì)成骨分化標(biāo)記相關(guān)蛋白膠原Ⅰ、骨鈣素（OCN）和骨橋蛋白（OPN）表達(dá)的影響,同時(shí)檢測(cè)對(duì)堿性磷酸酶（ALP）活性的影響;雙螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)miR-30a-5p對(duì)RUNT相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2（Runx2）的靶向調(diào)控作用。結(jié)果:miRNA測(cè)序分析結(jié)果顯示,相對(duì)于假手術(shù)組、雌激素組,模型組有33種共同miRNA表達(dá)上調(diào),選取miR-30a-5p作為本研究對(duì)象;qRT-PCR進(jìn)一步驗(yàn)證miR-30a-5p在模型組骨組織中高表達(dá);miR-30a-5p靶向抑制Runx2的表達(dá),且能夠抑制OCN、OPN和膠原Ⅰ的表達(dá),降低ALP活性;而同時(shí)過(guò)表達(dá)Runx2后,OCN、OPN和膠原Ⅰ的表達(dá)升高,ALP活性增加,Runx2過(guò)表達(dá)部分緩解miR-30a-5p對(duì)成骨細(xì)胞分化的抑制作用。結(jié)論:miR-30a-5p在骨質(zhì)疏松大鼠骨組織中表達(dá)上調(diào),并... 

【文章來(lái)源】：生物技術(shù)通訊. 2020,31(02)

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 大鼠模型建立與分組
    1.3 差異miRNA表達(dá)檢測(cè)
    1.4 成骨誘導(dǎo)
    1.5 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
    1.6 熒光定量PCR
    1.7 ALP活性檢測(cè)
    1.8 螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)
    1.9 蛋白質(zhì)表達(dá)分析
    1.1 0 茜素紅染色
    1.1 1 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 miRNA差異表達(dá)分析
    2.2 miR-30a-5p在組織中的表達(dá)
    2.3 miR-30a-5p靶向調(diào)控Runx2的表達(dá)
    2.4 Runx2過(guò)表達(dá)部分緩解miR-30a-5p對(duì)成骨細(xì)胞分化的抑制作用
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本文編號(hào)：3206144