研究背景:橋本甲狀腺炎（Hashimoto’s thyroiditis,HT）的發(fā)生與基因易感性、環(huán)境、免疫紊亂等眾多因素有關。我們課題組先前發(fā)現(xiàn),HT患者甲狀腺組織中甲狀腺細胞自噬活動減弱。小窩蛋白-1（Caveolin-1）是細胞質膜燒瓶樣凹陷微囊結構小窩的主要組成部分,可以通過調控自噬活動影響疾病的發(fā)生、發(fā)展,然而Caveolin-1對人甲狀腺上皮細胞自噬活動的調節(jié)尚不清楚。研究目的:研究HT患者甲狀腺組織中炎性因子（IL-1β、IFN-γ）和Caveolin-1的表達情況,以及IL-1β與IFN-γ共同作用于甲狀腺上皮細胞后對Caveolin-1和自噬標志性蛋白LC3B-II表達的影響,探討甲狀腺上皮細胞中Caveolin-1與自噬的關系。研究方法:1.單純結節(jié)性甲狀腺腫和HT患者甲狀腺病理標本各收集8例。免疫組織化學染色分析甲狀腺組織中IL-1β、IFN-γ和Caveolin-1的表達及分布情況。2.甲狀腺上皮細胞系Nthy-ori 3-1細胞用2 ng/m L IL-1β和10 ng/m L IFN-γ聯(lián)合刺激后,采用熒光實時定量PCR檢測Caveolin-1的m RNA水... 

【文章來源】：江蘇大學江蘇省

【文章頁數】：81 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
中英文縮略詞
第一章 緒論
    1.1 自身免疫性甲狀腺疾病
    1.2 HT病
        1.2.1 概述
        1.2.2 流行病學
        1.2.3 免疫病理特征
        1.2.4 發(fā)病機制
    1.3 細胞因子
        1.3.1 概述
        1.3.2 Th1/Th2細胞因子與AITD
        1.3.3 IFN-γ
        1.3.4 .IL-1β
        1.3.5 IFN-γ、IL-1β與HT
    1.4 細胞程序性死亡
        1.4.1 細胞凋亡
        1.4.2 自噬
        1.4.3 自噬、凋亡和HT
    1.5 Caveolin-1
        1.5.1 Caveolin-1概述
        1.5.2 Caveolin-1與凋亡
        1.5.3 Caveolin-1與自噬
        1.5.4 Caveolin-1與HT
    1.6 小結
第二章 研究目的、內容、方法、意義及實驗方案設計
    2.1 研究目的
    2.2 研究內容
    2.3 研究方法及技術
    2.4 研究意義
    2.5 實驗方案設計
        2.5.1 檢測HT患者甲狀腺組織與正常甲狀腺組織中IL-1β、IFN-γ及Caveolin-1表達情況
        2.5.2 IL-1β、IFN-γ對甲狀腺上皮細胞Caveolin-1和LC3B-II蛋白的影響,以及干擾Caveolin-1后細胞中LC3B-II的表達變化
第三章 實驗材料與方法
    3.1 臨床標本收集
    3.2 主要試劑和材料
        3.2.1 細胞系
        3.2.2 主要試劑
        3.2.3 主要儀器設備和耗材
    3.3 實驗方法
        3.3.1 甲狀腺上皮細胞Nthy-ori3-1的培養(yǎng)
        3.3.2 免疫組織化學染色
        3.3.3 細胞免疫熒光染色
        3.3.4 瞬時轉染
        3.3.5 提取RNA(Trizol法提取)
        3.3.6 逆轉錄PCR
        3.3.7 實時熒光定量PCR
        3.3.8 蛋白質印跡
        3.3.9 統(tǒng)計學分析
第四章 實驗結果
    4.1 HT患者組織中IL-1β和IFN-γ高表達而Caveolin-1低表達
    4.2 IL-1β和IFN-γ抑制甲狀腺上皮細胞Caveolin-1和LC3B-II表達
    4.3 siCaveolin-1降低甲狀腺上皮細胞Caveolin-1表達
    4.4 干擾Caveolin-1后甲狀腺上皮細胞LC3B-II表達下降
第五章 討論
第六章 主要結論及展望
    6.1 主要結論
    6.2 展望
參考文獻
攻讀碩士學位期間發(fā)表的學術論文
致謝



本文編號：3172968