內(nèi)臟性肥胖與皮下脂肪引起的肥胖相比,在引發(fā)糖尿病和心血管相關(guān)疾病上具有更高的風(fēng)險(xiǎn)。雖然到目前為止的研究并未能夠?qū)σl(fā)這些疾病的病理做出解析,但研究已經(jīng)證明這些疾病的發(fā)生是與細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）的重塑有關(guān)。解整合素金屬蛋白酶家族（ADAMTSs）是一類鋅依賴性的金屬蛋白酶,由于此家族成員具有細(xì)胞外基質(zhì)重塑活性,因此在個(gè)體發(fā)育和多種疾病的發(fā)生過(guò)程中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。在眾多的ADAMTSs家族成員中,ADAMTS18是一種功能和底物都尚未被研究清楚的“孤兒”金屬蛋白酶。在本課題的研究中,我們發(fā)現(xiàn)在小鼠出生后的早期發(fā)育過(guò)程中,Adamts18 mRNA在普通野生（WT）小鼠的內(nèi)臟白色脂肪組織（vWAT）中大量表達(dá)。然而,與WT小鼠相比,Adamts18基因敲除（KO）小鼠的體脂百分比明顯上升,并且單個(gè)脂肪細(xì)胞體積也明顯增大。我們發(fā)現(xiàn),這些差異可能部分是由于細(xì)胞外基質(zhì)的重塑,尤其是層粘連蛋白1（LN1）和血小板反應(yīng)蛋白1（THBS1）的表達(dá)增加所導(dǎo)致的。不僅如此,在Adamts18 KO小鼠的內(nèi)臟白色脂肪組織中,我們還發(fā)現(xiàn)ERK1/2活性降低,并且檢測(cè)到脂肪細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子PPARγ,C/... 

【文章來(lái)源】：華東師范大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：69 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一部分 研究背景
    1.1 脂肪細(xì)胞發(fā)育基本過(guò)程
    1.2 ECM在脂肪細(xì)胞發(fā)育中的作用
    1.3 ADAMTS18研究現(xiàn)狀
第二部分 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)耗材
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.4 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.5 實(shí)驗(yàn)試劑配制
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 Adamts18 KO小鼠的鑒定
        2.2.2 小鼠解剖取脂肪組織
        2.2.3 蘇木精-伊紅染色(H&E staining)
        2.2.4 蛋白免疫印跡(Westren Bloting)
        2.2.5 RNA提取、RT-PCR及Q-PCR
        2.2.6 小鼠原代前脂肪細(xì)胞分離及培養(yǎng)
        2.2.7 油紅O染色
        2.2.8 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELASA)
        2.2.9 血糖調(diào)節(jié)耐受實(shí)驗(yàn)
        2.2.10 小鼠血壓測(cè)量
第三部分 實(shí)驗(yàn)結(jié)果及討論
    3.1 Adamts18在小鼠脂肪組織中的表達(dá)
        3.1.1 Adamts18主要影響vWAT的早期發(fā)育
        3.1.2 Adamts18缺失導(dǎo)致成年小鼠的脂肪異常增多
    3.2 Adamts18缺失對(duì)細(xì)胞外基質(zhì)的影響
        3.2.1 Adamts18缺失影響ECM蛋白LN1和THBS1表達(dá)上升
        3.2.2 LN會(huì)促進(jìn)SVF細(xì)胞分化為前脂肪細(xì)胞
    3.3 Adamts18 缺失對(duì) ERK1/2 通路的影響
        3.3.1 Adamts18缺失抑制ERK1/2的磷酸化
        3.3.2 Adamts18缺失激活脂肪細(xì)胞發(fā)育特異通路的活性
    3.4 Adamts18缺失對(duì)小鼠血脂水平的影響
    3.5 Adamts18對(duì)Apoe~(-/-)小鼠動(dòng)脈粥樣硬化的影響
        3.5.1 Adamts18缺失使Apoe~(-/-)小鼠血脂升高
        3.5.2 Adamts18缺失促進(jìn)Apoe~(-/-)小鼠患動(dòng)脈粥樣硬化
    3.6 Adamts18缺失對(duì)小鼠血糖水平的影響
    3.7 Adamts18缺失對(duì)小鼠血壓水平的影響
        3.7.1 Adamts18缺失使KO小鼠血壓升高
        3.7.2 Adamts18缺失使KO小鼠頸總動(dòng)脈血管壁增厚
第四部分 總結(jié)與展望
    4.1 總結(jié)
    4.2 展望
參考文獻(xiàn)
附錄
附件
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]白色脂肪細(xì)胞分化起源的研究進(jìn)展[J]. 付建飛,王欣,陳士勇,王安世,張慧琴,張曉宏.  公共衛(wèi)生與預(yù)防醫(yī)學(xué). 2014(04)
[2]脂肪細(xì)胞因子對(duì)脂肪細(xì)胞增殖分化的反饋調(diào)節(jié)作用[J]. 周艷蘭,遲毓婧,管又飛,楊吉春.  中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào). 2011(03)



本文編號(hào)：3172595