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日本血吸蟲蟲卵抗原Th1表位肽P25與不同佐劑聯(lián)用對(duì)OVA誘導(dǎo)小鼠過敏性哮喘的抑制作用

發(fā)布時(shí)間:2021-04-24 22:41
  目的:探究日本血吸蟲(Schistosoma japonicum,SJ)可溶性蟲卵抗原SjP40蛋白Th1表位肽P25對(duì)SJ尾蚴感染小鼠脾淋巴細(xì)胞刺激產(chǎn)生IFN-γ的作用機(jī)制,并檢測(cè)P25多肽分別與弗氏不完全佐劑(Incomplete Freund?s Adjuvant,IFA)和鋁佐劑(Aluminum,Alum or Al)聯(lián)用對(duì)OVA誘導(dǎo)小鼠過敏性哮喘的抑制作用。方法:體外實(shí)驗(yàn):SJ尾蚴感染BALB/c雌性小鼠(n=3),分離脾淋巴細(xì)胞。研究分為三組:Medium對(duì)照組(單純DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)),P12多肽對(duì)照組(含50μg/ml P12多肽的DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng),P12為日本血吸蟲蟲卵抗原SjP40蛋白中非Th1表位肽),P25多肽組(含50μg/ml P25多肽的DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng),P25為日本血吸蟲蟲卵抗原SjP40蛋白中Th1表位肽)(n=3)。脾淋巴細(xì)胞培養(yǎng)72 h后細(xì)胞計(jì)數(shù)和MTS法檢測(cè)脾淋巴細(xì)胞增殖水平;培養(yǎng)72 h后收集細(xì)胞培養(yǎng)上清液,ELISA法檢測(cè)IFN-γ的分泌水平;培養(yǎng)48 h后收集細(xì)胞,流式細(xì)胞術(shù)分析脾細(xì)胞中CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞分泌IFN-γ的水... 

【文章來源】:天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】:79 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
縮略語
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、P25多肽對(duì)SJ感染小鼠脾臟T細(xì)胞的刺激作用
    1.1 對(duì)象和方法
        1.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑及耗材
        1.1.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)備
        1.1.4 實(shí)驗(yàn)試劑配制
        1.1.5 SJ尾蚴感染小鼠
        1.1.6 小鼠脾臟淋巴細(xì)胞的提取
        1.1.7 MTS法檢測(cè)脾臟淋巴細(xì)胞增殖情況
        1.1.8 ELISA法檢測(cè)脾臟淋巴細(xì)胞中IFN-γ的誘導(dǎo)情況
+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞分泌IFN-γ的情況">        1.1.9 流式細(xì)胞分析法檢測(cè)脾細(xì)胞中CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞分泌IFN-γ的情況
    1.2 結(jié)果
        1.2.1 P25促進(jìn)SJ尾蚴感染鼠脾淋巴細(xì)胞增殖
        1.2.2 P25促進(jìn)SJ尾蚴感染鼠脾淋巴細(xì)胞分泌IFN-γ
+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞中IFN-γ表達(dá)">        1.2.3 P25上調(diào)SJ尾蚴感染鼠CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞中IFN-γ表達(dá)
    1.3 討論
    1.4 小結(jié)
二、P25多肽與不同佐劑聯(lián)用對(duì)小鼠過敏性哮喘的抑制作用
    2.1 對(duì)象和方法
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑及耗材
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)備
        2.1.4 實(shí)驗(yàn)試劑配制
        2.1.5 哮喘模型建立
        2.1.6 肺組織切片的制作
        2.1.7 肺組織HE染色
        2.1.8 肺組織AB-PAS染色
        2.1.9 BALF的收集
        2.1.10 BALF中嗜酸性細(xì)胞計(jì)數(shù)
        2.1.11 BALF中細(xì)胞因子檢測(cè)
        2.1.12 血清中OVA特異性IgE檢測(cè)
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 肺組織炎癥反應(yīng)
        2.2.2 支氣管上皮粘液分泌情況
        2.2.3 BALF中嗜酸性細(xì)胞計(jì)數(shù)
        2.2.4 血清中OVA特異性IgE表達(dá)水平
        2.2.5 BALF中IL-4、IFN-γ水平
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述 疫苗佐劑和日本血吸蟲TH1表位肽對(duì)哮喘作用的研究進(jìn)展
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[2]免疫佐劑在動(dòng)物中的應(yīng)用研究[J]. 劉云峰,程堯,黃文顯.  獸醫(yī)導(dǎo)刊. 2018(15)
[3]哮喘模型大鼠肺組織中IL-4、IFN-γ的變化及防哮方的干預(yù)作用[J]. 楊晨羲,宣桂琪,阮曉琳,周星星,陳健.  中國中醫(yī)急癥. 2018(02)
[4]過繼轉(zhuǎn)移日本血吸蟲可溶性蟲卵抗原致敏鼠CD8α-樹突狀細(xì)胞抑制OVA誘導(dǎo)過敏性哮喘的研究[J]. 郭盼,章婧,孫越,朱曉龍,馮曉月,黃俊凱,姚曄,紀(jì)偉華,任繼玲,朱云娟,劉佩梅,胡立志.  中國病原生物學(xué)雜志. 2017(11)
[5]聯(lián)合T、B細(xì)胞表位設(shè)計(jì)多肽疫苗的研究進(jìn)展[J]. 李少華,唐康,張春梅,金伯泉,馬櫻.  中國免疫學(xué)雜志. 2017(01)
[6]鋁佐劑的作用機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 聞曉波,張玲玲,冉旭華.  現(xiàn)代畜牧獸醫(yī). 2016(11)
[7]支氣管哮喘和衛(wèi)生假說[J]. 鄭仰明,李昌崇.  國外醫(yī)學(xué)(兒科學(xué)分冊(cè)). 2005(02)



本文編號(hào):3158193

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