第一部分酒精下調(diào)NAD+-SIRT1致大鼠肝臟胰島素抵抗及白藜蘆醇干預機制研究目的:探討長期酒精攝入誘導大鼠肝組織胰島素抵抗及白藜蘆醇干預作用的潛在分子機制。方法:動物實驗:雄性成年72只SD大鼠（180-220 g）隨機分為6組,每組12只:正常對照組（Con）、低劑量酒精組（Leth,0.8 g/kg.bw/d）、中劑量酒精組（Meth,1.6 g/kg.bw/d）、高劑量酒精組（Heth,2.4 g/kg.bw/d）、白藜蘆醇對照組（Res,100 mg/kg.bw/d）和白藜蘆醇干預組（Heth+Res,Heth:2.4 g/kg.bw/d,Res:100 g/kg.bw/d）。實驗第12周和21周進行OGTT和ITT實驗,實驗22周結束后,每組隨機選取5只大鼠進行急性胰島素刺激實驗（0.8 U/kg.bw）,留取血清及肝臟樣本用于檢測胰島素敏感性相關指標、肝臟中胰島素信號通路中關鍵蛋白磷酸化IRS2、p-PI3K/PI3K、Akt2和SIRT1蛋白表達情況及NAD+/NADH 比值,以及肝臟中酒精代謝酶的表達及活力。原代大鼠肝細胞實驗:不同濃度酒精暴露24 h后CCK-8實驗... 

【文章來源】：華中科技大學湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：博士

【部分圖文】：

不同濃度酒精攝入22周對大鼠胰島素敏感性影響

因此我們檢測了大鼠肝組織中 IRS-2、Akt2 蛋白的表達情況以及 PI3K 蛋白的磷酸化水平。如圖1.3 所示，與 Con 組相比，Meth 組和 Heth 組的 IRS-2、Akt2 蛋白表達及 PI3K 蛋白的磷酸化水平均明顯性下降（P < 0.05, P < 0.01），而 Res 干預后均得到顯著改善。值得注意的是，Res 組的胰島素信號通路關鍵分子的蛋白表達量也有所降低，其中IRS-2 和 Akt2 蛋白表達降低較明顯，具有統(tǒng)計學差異（P < 0.01, P < 0.05）。以上結果表明酒精攝入通過抑制肝臟胰島素信號通路關鍵蛋白的表達，擾亂胰島素信號正常轉導，最終導致大鼠胰島素抵抗，而白藜蘆醇干預能夠改善酒精誘導的胰島素抵抗狀態(tài)。

35圖 1.4 酒精攝入及白藜蘆醇干預對大鼠 NAD+/SIRT1 通路影響。（A）為肝臟 SIRT1 蛋白代表性條帶及表達量統(tǒng)計分析圖（mean SD, n = 4）；（B）為肝臟 SIRT1 的 mRNA 水平統(tǒng)計值，（C-E）分別為肝臟 NAD+、NADH 水平以及 NAD+/NADH 比值（mean ±SD, n = 5）。與 Con 組相比，*P <0.05,**P < 0.01,***P < 0.001；與 Heth 組相比，#P < 0.05,##P < 0.05。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Chronic alcohol consumption potentiates the development of diabetes through pancreatic β-cell dysfunction[J]. Ji Yeon Kim,Dae Yeon Lee,Yoo Jeong Lee,Keon Jae Park,Kyu Hee Kim,Jae Woo Kim,Won-Ho Kim.  World Journal of Biological Chemistry. 2015(01)



本文編號：3145830