第一部分酒精下調(diào)NAD+-SIRT1致大鼠肝臟胰島素抵抗及白藜蘆醇干預(yù)機(jī)制研究目的:探討長期酒精攝入誘導(dǎo)大鼠肝組織胰島素抵抗及白藜蘆醇干預(yù)作用的潛在分子機(jī)制。方法:動物實(shí)驗(yàn):雄性成年72只SD大鼠（180-220 g）隨機(jī)分為6組,每組12只:正常對照組（Con）、低劑量酒精組（Leth,0.8 g/kg.bw/d）、中劑量酒精組（Meth,1.6 g/kg.bw/d）、高劑量酒精組（Heth,2.4 g/kg.bw/d）、白藜蘆醇對照組（Res,100 mg/kg.bw/d）和白藜蘆醇干預(yù)組（Heth+Res,Heth:2.4 g/kg.bw/d,Res:100 g/kg.bw/d）。實(shí)驗(yàn)第12周和21周進(jìn)行OGTT和ITT實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)22周結(jié)束后,每組隨機(jī)選取5只大鼠進(jìn)行急性胰島素刺激實(shí)驗(yàn)（0.8 U/kg.bw）,留取血清及肝臟樣本用于檢測胰島素敏感性相關(guān)指標(biāo)、肝臟中胰島素信號通路中關(guān)鍵蛋白磷酸化IRS2、p-PI3K/PI3K、Akt2和SIRT1蛋白表達(dá)情況及NAD+/NADH 比值,以及肝臟中酒精代謝酶的表達(dá)及活力。原代大鼠肝細(xì)胞實(shí)驗(yàn):不同濃度酒精暴露24 h后CCK-8實(shí)驗(yàn)... 

【文章來源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：117 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

不同濃度酒精攝入22周對大鼠胰島素敏感性影響

因此我們檢測了大鼠肝組織中 IRS-2、Akt2 蛋白的表達(dá)情況以及 PI3K 蛋白的磷酸化水平。如圖1.3 所示，與 Con 組相比，Meth 組和 Heth 組的 IRS-2、Akt2 蛋白表達(dá)及 PI3K 蛋白的磷酸化水平均明顯性下降（P < 0.05, P < 0.01），而 Res 干預(yù)后均得到顯著改善。值得注意的是，Res 組的胰島素信號通路關(guān)鍵分子的蛋白表達(dá)量也有所降低，其中IRS-2 和 Akt2 蛋白表達(dá)降低較明顯，具有統(tǒng)計學(xué)差異（P < 0.01, P < 0.05）。以上結(jié)果表明酒精攝入通過抑制肝臟胰島素信號通路關(guān)鍵蛋白的表達(dá)，擾亂胰島素信號正常轉(zhuǎn)導(dǎo)，最終導(dǎo)致大鼠胰島素抵抗，而白藜蘆醇干預(yù)能夠改善酒精誘導(dǎo)的胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)。

35圖 1.4 酒精攝入及白藜蘆醇干預(yù)對大鼠 NAD+/SIRT1 通路影響。（A）為肝臟 SIRT1 蛋白代表性條帶及表達(dá)量統(tǒng)計分析圖（mean SD, n = 4）；（B）為肝臟 SIRT1 的 mRNA 水平統(tǒng)計值，（C-E）分別為肝臟 NAD+、NADH 水平以及 NAD+/NADH 比值（mean ±SD, n = 5）。與 Con 組相比，*P <0.05,**P < 0.01,***P < 0.001；與 Heth 組相比，#P < 0.05,##P < 0.05。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Chronic alcohol consumption potentiates the development of diabetes through pancreatic β-cell dysfunction[J]. Ji Yeon Kim,Dae Yeon Lee,Yoo Jeong Lee,Keon Jae Park,Kyu Hee Kim,Jae Woo Kim,Won-Ho Kim.  World Journal of Biological Chemistry. 2015(01)



本文編號：3145830