柚皮素防護2型糖尿病的作用及分子機制研究
發(fā)布時間:2021-04-10 02:04
研究目的:糖尿�。―iabetes Mellitus,DM)是影響人類健康的一個重大疾病,DM患者中90%-95%是2型DM(T2DM)患者。T2DM的有效防治已是全球關注的熱點,更是我國亟需解決的重大課題。近年來研究發(fā)現(xiàn),二氫黃酮類化合物柚皮素在體內明顯降低T2DM大鼠空腹血糖及糖化血紅蛋白含量,對T2DM有防治作用,但柚皮素防治T2DM機制及具體分子靶點是什么?尚不清楚。柚皮素對T2DM胰島素抵抗是否有抑制作用?目前還有爭議,需進一步研究證實。研究方法:分別對MIN6細胞、HepG2和3T3-L1細胞進行以下處理:用高糖培養(yǎng)基培養(yǎng)MIN6細胞建立高糖損傷模型,用高糖/高胰島素培養(yǎng)基培養(yǎng)3T3-L1和HepG2細胞建立胰島素抵抗(IR)模型;分別轉染mi R-375和miR-29b mimic和inhibitor到MIN6高糖損傷模型細胞和HepG2/3T3-L1 IR模型細胞。用不同濃度柚皮素對三種細胞進行分組干預。然后用MTT檢測細胞的增殖活力,用GOD檢測細胞對葡萄糖攝取的能力,用ELISA檢測胰島素釋放能力;用qRT-PCR和Western Blotting檢測胰島素信號傳導...
【文章來源】:電子科技大學四川省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:72 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
英文縮略語對照
第一章 緒論
1.1 研究工作的背景與意義
1.2 國內外研究歷史與現(xiàn)狀
1.2.1 T2DM的發(fā)病機理和治療現(xiàn)狀
1.2.2 柚皮素在T2DM的防治領域研究進展
1.2.3 微小RNA在T2DM的防治機制方面的研究進展
1.3 本文的主要創(chuàng)新與貢獻
1.4 本論文的結構安排
第二章 柚皮素對MIN6高糖模型細胞和3T3-L1/HEPG2胰島素抵抗模型細胞的防護作用
2.1 材料
2.2 方法
2.3 結果
2.3.1 柚皮素干預對MIN6高糖模型細胞增殖的影響
2.3.2 3T3-L1細胞和成熟脂肪細胞的形態(tài)及鑒定
2.3.3 柚皮素干預對3T3-L1胰島素抵抗模型細胞增殖的影響
2.3.4 柚皮素干預對3T3-L1胰島素抵抗模型細胞葡萄糖攝取和胰島素敏感性的影響
2.3.5 柚皮素干預對HepG2胰島素抵抗模型細胞增殖的影響
2.3.6 柚皮素干預對HepG2胰島素抵抗模型細胞葡萄糖攝取和胰島素敏感性的影響
2.4 討論
2.5 本章小結
第三章 柚皮素對MIRNA-375上調/下調后MIN6高糖模型細胞胰島素分泌的影響
3.1 材料
3.2 方法
3.3 結果
3.3.1 不同濃度柚皮素對高糖培養(yǎng)MIN6細胞胰島素釋放的影響
3.3.2 轉染MIN6細胞后miR-375表達的測定
3.3.3 miR-375上調/下調表達在柚皮素調節(jié)高糖培養(yǎng)MIN6細胞胰島素釋放的作用
3.4 討論
3.5 本章小結
第四章 柚皮素對胰島素抵抗3T3-L1/HEPG2細胞IRS-1/AKT/GLUT4基因或蛋白表達的影響
4.1 材料
4.2 方法
4.3 結果
4.3.1 柚皮素對胰島素抵抗3T3-L1模型細胞IRS-1/AKT/GLUT4基因表達的影響
4.3.2 柚皮素對胰島素抵抗3T3-L1模型細胞IRS-1/p-AKT蛋白表達的影響..
4.3.3 柚皮素對胰島素抵抗HepG2模型細胞IRS-1/AKT/GLUT4基因表達的影響
4.3.4 柚皮素對HepG2胰島素抵抗模型細胞IRS-1/p-AKT蛋白表達的影響..
4.4 討論
4.5 本章小結
第五章 柚皮素對3T3-L1/HEPG2細胞MIR-29B上調/下調后IRS-1/AKT/GLUT表達的影響
5.1 材料
5.2 方法
5.3 結果
5.3.1 對3T3-L1/HepG2細胞轉染miR-29b的鑒定
5.3.2 柚皮素對3T3-L1細胞miR-29b上調/下調后IRS-1/AKT/GLUT4基因表達的影響
5.3.3 柚皮素對3T3-L1細胞miR-29b上調/下調后IRS-1/p-AKT蛋白表達的影響
5.3.4 柚皮素對HepG2細胞miR-29b上調/下調后IRS-1/AKT/GLUT4基因表達的影響
5.3.5 柚皮素對HepG2細胞miR-29b上調/下調后IRS-1、p-AKT蛋白表達的影響
5.4 討論
5.5 本章小結
第六章 全文總結與展望
6.1 全文總結
6.2 后續(xù)工作展望
致謝
參考文獻
攻讀碩士學位期間取得的成果
【參考文獻】:
期刊論文
[1]Fructose as a key player in the development of fatty liver disease[J]. Metin Basaranoglu,Gokcen Basaranoglu,Tevfik Sabuncu,Hakan Sentürk. World Journal of Gastroenterology. 2013(08)
本文編號:3128736
【文章來源】:電子科技大學四川省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:72 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
英文縮略語對照
第一章 緒論
1.1 研究工作的背景與意義
1.2 國內外研究歷史與現(xiàn)狀
1.2.1 T2DM的發(fā)病機理和治療現(xiàn)狀
1.2.2 柚皮素在T2DM的防治領域研究進展
1.2.3 微小RNA在T2DM的防治機制方面的研究進展
1.3 本文的主要創(chuàng)新與貢獻
1.4 本論文的結構安排
第二章 柚皮素對MIN6高糖模型細胞和3T3-L1/HEPG2胰島素抵抗模型細胞的防護作用
2.1 材料
2.2 方法
2.3 結果
2.3.1 柚皮素干預對MIN6高糖模型細胞增殖的影響
2.3.2 3T3-L1細胞和成熟脂肪細胞的形態(tài)及鑒定
2.3.3 柚皮素干預對3T3-L1胰島素抵抗模型細胞增殖的影響
2.3.4 柚皮素干預對3T3-L1胰島素抵抗模型細胞葡萄糖攝取和胰島素敏感性的影響
2.3.5 柚皮素干預對HepG2胰島素抵抗模型細胞增殖的影響
2.3.6 柚皮素干預對HepG2胰島素抵抗模型細胞葡萄糖攝取和胰島素敏感性的影響
2.4 討論
2.5 本章小結
第三章 柚皮素對MIRNA-375上調/下調后MIN6高糖模型細胞胰島素分泌的影響
3.1 材料
3.2 方法
3.3 結果
3.3.1 不同濃度柚皮素對高糖培養(yǎng)MIN6細胞胰島素釋放的影響
3.3.2 轉染MIN6細胞后miR-375表達的測定
3.3.3 miR-375上調/下調表達在柚皮素調節(jié)高糖培養(yǎng)MIN6細胞胰島素釋放的作用
3.4 討論
3.5 本章小結
第四章 柚皮素對胰島素抵抗3T3-L1/HEPG2細胞IRS-1/AKT/GLUT4基因或蛋白表達的影響
4.1 材料
4.2 方法
4.3 結果
4.3.1 柚皮素對胰島素抵抗3T3-L1模型細胞IRS-1/AKT/GLUT4基因表達的影響
4.3.2 柚皮素對胰島素抵抗3T3-L1模型細胞IRS-1/p-AKT蛋白表達的影響..
4.3.3 柚皮素對胰島素抵抗HepG2模型細胞IRS-1/AKT/GLUT4基因表達的影響
4.3.4 柚皮素對HepG2胰島素抵抗模型細胞IRS-1/p-AKT蛋白表達的影響..
4.4 討論
4.5 本章小結
第五章 柚皮素對3T3-L1/HEPG2細胞MIR-29B上調/下調后IRS-1/AKT/GLUT表達的影響
5.1 材料
5.2 方法
5.3 結果
5.3.1 對3T3-L1/HepG2細胞轉染miR-29b的鑒定
5.3.2 柚皮素對3T3-L1細胞miR-29b上調/下調后IRS-1/AKT/GLUT4基因表達的影響
5.3.3 柚皮素對3T3-L1細胞miR-29b上調/下調后IRS-1/p-AKT蛋白表達的影響
5.3.4 柚皮素對HepG2細胞miR-29b上調/下調后IRS-1/AKT/GLUT4基因表達的影響
5.3.5 柚皮素對HepG2細胞miR-29b上調/下調后IRS-1、p-AKT蛋白表達的影響
5.4 討論
5.5 本章小結
第六章 全文總結與展望
6.1 全文總結
6.2 后續(xù)工作展望
致謝
參考文獻
攻讀碩士學位期間取得的成果
【參考文獻】:
期刊論文
[1]Fructose as a key player in the development of fatty liver disease[J]. Metin Basaranoglu,Gokcen Basaranoglu,Tevfik Sabuncu,Hakan Sentürk. World Journal of Gastroenterology. 2013(08)
本文編號:3128736
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