目的:在細(xì)胞水平上探索HIF-1α/BNIP3通路對類中性粒細(xì)胞自噬、凋亡的影響,為中性粒細(xì)胞性哮喘發(fā)病機(jī)制的研究提供理論依據(jù)。方法:1.類中性粒細(xì)胞誘導(dǎo)分化:培養(yǎng)人急性早幼粒白血病細(xì)胞（HL-60）,取對數(shù)生長期的HL-60細(xì)胞加入1.3%DMSO培養(yǎng)4天后,Diff染色檢測細(xì)胞形態(tài),流式細(xì)胞術(shù)檢測CD11b表達(dá)水平,確定類中性粒細(xì)胞是否誘導(dǎo)成功;2.構(gòu)建IL-8培養(yǎng)下的類中性粒細(xì)胞模型:HL-60細(xì)胞誘導(dǎo)分化為類中性粒細(xì)胞后加入0ng/ml、100ng/ml、200ng/ml、400ng/m L、800ng/ml濃度的IL-8培養(yǎng)24h,流式細(xì)胞術(shù)檢測類中性粒細(xì)胞的凋亡率,選擇凋亡率最低組的IL-8濃度與類中性粒細(xì)胞培養(yǎng)0h、6h、12h、24h、48h,檢測各組類中性粒細(xì)胞的凋亡率,選擇凋亡率最低的組進(jìn)行下一步實驗;3.驗證HIF-1α調(diào)控BNIP3對類中性粒細(xì)胞自噬、凋亡的影響:分為6個組:1.空白組2.IL-8組3.IL-8+HIF-1α組4.IL-8+HIF-1α-vector組5.IL-8+HIF-1αsi RNA組6.IL-8+HIF-1αsi RNA-vector組,... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

HL-60和dHL-60細(xì)胞迪夫快速染色（×1000油鏡）

HL-60與dHL-60CD11b陽性率表達(dá)情況

圖 3.3 HIF-1α干擾組和空載組慢病毒轉(zhuǎn)染（×100）：V1、T1、V2、T2 分別代表 HIF-1α過表達(dá)空載組、HIF-1α過表達(dá)組、HIF-1α沉默空載組、HIF-1α默組

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]低氧對滋養(yǎng)細(xì)胞HIF-1α、BNIP3表達(dá)及自噬和侵襲能力的影響[J]. 閆廣偉,丁燕子,邢金芳,代延朋,杜紅梅,袁恩武.  鄭州大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2018(02)
[2]低氧對人支氣管上皮細(xì)胞氣道重塑相關(guān)因子表達(dá)的影響[J]. 鄧楠琳,朱芮,李敏超.  西安交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2018(02)
[3]miR-199a-5p抑制低氧條件下大鼠氣道平滑肌增殖和低氧誘導(dǎo)因子1α表達(dá)[J]. 章輝,朱述陽,張燦堂,劉文靜,朱潔晨.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2015(09)
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碩士論文
[1]HIF-1α與Th17/Treg失衡對煙霧暴露哮喘大鼠氣道炎癥的影響及西羅莫司治療作用的研究[D]. 劉巧維.中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院 2013
[2]α5-nAChR/HIF-1α/VEGF信號軸對人肺癌細(xì)胞增殖和凋亡的影響[D]. 祖珊珊.山東大學(xué) 2013



本文編號：3100331