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高脂環(huán)境下miR-125a-5p和miR-125b-5p靶向作用FZD9抑制BMSCs成骨分化機制研究

發(fā)布時間:2021-03-21 17:05
  研究背景:過高的發(fā)病率是高脂血癥受到全球社會廣泛關注的主要原因之一,而且越來越多的疾病(諸如糖尿病、心腦疾病、骨質疏松癥等等)都已被證明與高脂血癥存在密切關系。在前期實驗中,我們觀察到高脂血癥組大鼠較正常組大鼠種植體周圍骨質疏松,骨結合率較低,成骨細胞減少,破骨細胞增多等現象。高脂血癥的高發(fā)病率和其對骨代謝的不良影響,已成為影響種植修復的潛在危險因素,因此研究高脂血癥對種植體骨整合的影響有重要的現實意義。卷曲受體蛋白9(frizzled-9,FZD9)是Wnt通路上細胞膜FZD受體家族中的一員,對于骨代謝有重要意義。而microRNA(miRNA)能與靶基因的mRNA相互作用從而直接降解靶mRNA或抑制靶基因的翻譯。因此本實驗旨在尋找出在高脂環(huán)境下,miRNA通過作用于FZD9從而來影響骨代謝的具體機制。實驗目的:(1)觀察高脂環(huán)境下大鼠骨髓機制干細胞(BMSCs)成骨分化過程中Runx2、ALP、FZD9、miR-125a-5p、miR-125b-5p 的表達變化(2)過表達/抑制表達miR-125a-5p、miR-125b-5p后,觀察BMSCs成骨分化過程中FZD9表達量的變化。... 

【文章來源】:山東大學山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數】:51 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

高脂環(huán)境下miR-125a-5p和miR-125b-5p靶向作用FZD9抑制BMSCs成骨分化機制研究


圖1-1?BMSCs細胞培養(yǎng)0、3、5、7天在100倍鏡下觀察圖像??

表面抗原,流式細胞儀檢測,細胞培養(yǎng),比率


?下可見纖維形或紡錘樣細胞增殖迅速,細胞間聯系緊密,大量細胞集落逐漸融合??成片。(圖1-1)。??■??■■??細胞培養(yǎng)(X100)??圖1-1?BMSCs細胞培養(yǎng)0、3、5、7天在100倍鏡下觀察圖像??3.2流式細胞儀檢測結果:第三代BMSCsCD29、CD44、CD90陽性細胞比率均??大于95%,CDllb、CD45陽性細胞比率小于5%。????1^-???S.???。?§-?I-??“?|\?A?“入八八八??=>?In??milrwurWar?°?.?""rarr?m?i'wi?i*mr。-?-■iar-rry-r ̄w-uiai?.i_i(??^?^?^?^?^3?Jl?J?w3?^?^'^3?J!?^?^?^?^?^?Ji?J2??PE*?PE-A?Pf?A??CD29?

油紅,茜素紅,高脂,脂肪粒


1-4?A、C)。油紅0染色鏡下觀察,高脂組細胞逐漸由長梭形變?yōu)殚獔A形、圓形,??出現折光性強的小脂滴,并隨時間延長,小脂滴逐漸融合形成大脂滴,明顯可見??紅染的串珠樣脂肪粒,而對照組基本沒有脂肪粒的形成。(圖1-4B、D)。??綱酬??…,????高脂組??茜素紅染色?油紅0^色??圖1-3?BMSCs成骨誘導28天茜素紅、油紅0染色鏡下觀(X40)??3.8?RT-PCR?結果??在7、10、14天時高脂組RunX2mRNA表達量低于對照組,差異有意義(P??<0.05)。由圖可見,隨時間增加,對照組中Runx2mRNA表達量逐漸增加,在??10天達到最高,14天時對照組Runx2?mRNA表達量降低。高脂組Runx2?mRNA??表達量從第3天開始逐漸增多,到第10天至14天時增長速度逐漸降低(圖1?-4?A?)。??在對細胞從第3天到第14天的檢測中高脂組Rimx2?mRNA表達量始終低于對照??組。??在7、10、14天時高脂組ALP?mRNA相對表達量明顯低于普通組,差異有意??義(P<0.?05)。由圖可見,高脂組與對照組ALP?mRNA相對表達量隨檢測時間的??增加呈上升趨勢

【參考文獻】:
期刊論文
[1]牙周炎與高脂血癥的相關性及其機制[J]. 呂春旭,孫欽峰.  國際口腔醫(yī)學雜志. 2013(05)
[2]高血脂患者血脂相關知識需求及自我保健行為調查[J]. 篤銘麗,王秋莉,趙鈞,周意,方芳.  上海交通大學學報(醫(yī)學版). 2013(05)



本文編號:3093232

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