目的:1、觀察人成骨肉瘤MG63細(xì)胞株中MGP基因表達(dá)改變對(duì)其骨形成的影響;2、觀察MGP對(duì)人成骨肉瘤細(xì)胞MG63中Wnt/β-catenin信號(hào)通路相關(guān)因子的影響,探討MGP在絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥防治作用中可能的新機(jī)制。方法:1、MGP基因重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染:將MG63細(xì)胞分成MGP過(guò)表達(dá)組及MGP敲低組,過(guò)表達(dá)組用重組質(zhì)粒pIRES2-EGFP（過(guò)表達(dá)對(duì)照組）及pIRES2-EGFP-MGP（過(guò)表達(dá)組）轉(zhuǎn)染至MG63,敲低組用重組質(zhì)粒p KLO-EGFP（敲低對(duì)照組,）及pKLO-EGFP-shRNA（敲低組）轉(zhuǎn)染至MG63細(xì)胞中;2、MG63細(xì)胞骨形成能力檢測(cè):MG63細(xì)胞轉(zhuǎn)染質(zhì)粒后,用CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞增殖情況,堿性磷酸酶（ALP）染色及活力測(cè)定技術(shù)檢測(cè)MG63細(xì)胞的分化情況,茜素紅S染色及氯化十六烷基吡啶半定量礦化結(jié)節(jié)檢測(cè)細(xì)胞礦化能力;3、Wnt/β-catenin信號(hào)通路相關(guān)因子的檢測(cè):采用Western blot和QRT-PCR技術(shù)檢測(cè)各組MGP及Wnt/β-catenin信號(hào)通路相關(guān)因子如wnt3a、β-catenin和Runx2蛋白及基因的表達(dá)情況。結(jié)果:1、CCK-8試驗(yàn)結(jié)... 

【文章來(lái)源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

Westernblot檢測(cè)轉(zhuǎn)染不同質(zhì)粒對(duì)MG63細(xì)胞MGP蛋白表達(dá)的影響

Westernblot檢測(cè)轉(zhuǎn)染不同質(zhì)粒對(duì)MG63細(xì)胞MGP蛋白表達(dá)的影響

CCK-8檢測(cè)過(guò)表達(dá)及敲低MGP對(duì)MG63細(xì)胞增殖情況的影響

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]四種骨質(zhì)疏松治療藥物對(duì)原代SD大鼠成骨細(xì)胞MGP表達(dá)的影響[J]. 賴曉陽(yáng),方向南,陳雪英,姜醒華,張美英,王平芳,廖二元,楊雅.  中華內(nèi)分泌代謝雜志. 2012 (12)
[2]維生素K2對(duì)老年去卵巢大鼠血管鈣化的影響[J]. 陳雪英,楊雅,游志剛,丁穎,吳韋,姜醒華.  中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志. 2012(03)
[3]維生素K2對(duì)SD去卵巢大鼠基質(zhì)Gla蛋白（MGP）及腰椎基因表達(dá)的影響[J]. 陳雪英,姜醒華,閆玉剛,方向南,賴曉陽(yáng),吳韋,丁穎,楊雅.  中國(guó)骨質(zhì)疏松雜志. 2011(08)
[4]原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥診治指南（2011年）[J].   中華骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病雜志. 2011(01)



本文編號(hào)：3087297