雌激素通過GPER/PKA信號途徑調(diào)節(jié)Min6細(xì)胞線粒體自噬的分子機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2021-03-10 04:20
目的:雌激素是一種在人體心血管、免疫、神經(jīng)及內(nèi)分泌等系統(tǒng)中均發(fā)揮重要作用的類固醇激素。流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn),與同齡男性相比,絕經(jīng)后女性隨著雌激素水平的降低,糖尿病的發(fā)病率及并發(fā)癥發(fā)生的速度明顯增快,提示雌激素水平變化有可能對糖尿病的發(fā)生及發(fā)展造成影響。雌激素介導(dǎo)生理效應(yīng),調(diào)控病理過程主要依靠與雌激素受體結(jié)合形成配體。G蛋白偶聯(lián)雌激素受體(G protein coupled estrogen receptor,GPER),又稱為GPR30,作為一種新型的雌激素膜受體被發(fā)現(xiàn)至今已有20余年,近年來,大量研究表明GPER參與了包括糖代謝、脂質(zhì)代謝、骨代謝等多種生理過程與生命活動(dòng),并在心臟、血管、腦、肝臟、乳腺、胰腺、神經(jīng)組織及生殖器官等組織中廣泛分布。有研究者發(fā)現(xiàn),GPER的缺失導(dǎo)致糖耐量受損和高血糖癥,對雄性和雌性小鼠產(chǎn)生不同的影響。以上研究提示了雌激素可能通過GPER影響胰島β細(xì)胞的功能與存活。自噬是細(xì)胞內(nèi)異;蚨嘤嗟鞍踪|(zhì)的一種自我降解過程,是除“1型程序性死亡”——細(xì)胞凋亡之外的另一種細(xì)胞死亡形式,也被稱為“2型程序性死亡”。自噬通過細(xì)胞器的更新、代謝保障細(xì)胞內(nèi)的穩(wěn)態(tài),促進(jìn)細(xì)胞適應(yīng)和存活。...
【文章來源】:中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省
【文章頁數(shù)】:68 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
不同濃度E2影響GPER在Min6細(xì)胞中的表達(dá)
9中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文圖3.2GPER在Min6細(xì)胞的表達(dá)及定位圖中行I為對照組,行II為10-7M的E2組,a、A為GPER(綠色),b、B為DAPI染色的細(xì)胞核(藍(lán)色),c、C為融合。細(xì)胞培養(yǎng)24小時(shí)。
21中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文8結(jié)果8.1E2減少M(fèi)in6細(xì)胞中線粒體自噬體的形成。應(yīng)用透射電鏡方法觀察對照組和10-7M濃度的E2處理24小時(shí)后的Min6細(xì)胞中線粒體自噬體的形成情況,從而判定細(xì)胞內(nèi)線粒體自噬的發(fā)生。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,與對照組相比,僅E2處理過的細(xì)胞中線粒體自噬體數(shù)量較少,先后被G15和E2處理過的細(xì)胞中具有雙層膜結(jié)構(gòu)的線粒體自噬體數(shù)量增加(圖8.1)。圖8.1E2影響Min6細(xì)胞中線粒體自噬體的形成圖中A為對照組,B為10-7M濃度E2組,C為G15+E2組。細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間為24小時(shí),C組加入E2處理前,經(jīng)過15μM濃度的G15預(yù)處理30min。箭頭指示線粒體自噬體。放大倍數(shù)20000倍。8.2E2減少M(fèi)in6細(xì)胞中TOM20和LampII共定位的表達(dá)將Min6細(xì)胞分為對照組、10-7M濃度E2組、E2+GPER拮抗劑(G15)組,通過免疫熒光技術(shù)檢測線粒體外膜蛋白TOM20和溶酶體膜蛋白LampII共定位。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,與對照組相比,E2組的TOM20和LampII陽性顆粒共定位減少,而在經(jīng)過G15預(yù)處理的G15+E2組中,這種減少被抵消(圖8.2)。
本文編號:3074041
【文章來源】:中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省
【文章頁數(shù)】:68 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
不同濃度E2影響GPER在Min6細(xì)胞中的表達(dá)
9中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文圖3.2GPER在Min6細(xì)胞的表達(dá)及定位圖中行I為對照組,行II為10-7M的E2組,a、A為GPER(綠色),b、B為DAPI染色的細(xì)胞核(藍(lán)色),c、C為融合。細(xì)胞培養(yǎng)24小時(shí)。
21中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文8結(jié)果8.1E2減少M(fèi)in6細(xì)胞中線粒體自噬體的形成。應(yīng)用透射電鏡方法觀察對照組和10-7M濃度的E2處理24小時(shí)后的Min6細(xì)胞中線粒體自噬體的形成情況,從而判定細(xì)胞內(nèi)線粒體自噬的發(fā)生。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,與對照組相比,僅E2處理過的細(xì)胞中線粒體自噬體數(shù)量較少,先后被G15和E2處理過的細(xì)胞中具有雙層膜結(jié)構(gòu)的線粒體自噬體數(shù)量增加(圖8.1)。圖8.1E2影響Min6細(xì)胞中線粒體自噬體的形成圖中A為對照組,B為10-7M濃度E2組,C為G15+E2組。細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間為24小時(shí),C組加入E2處理前,經(jīng)過15μM濃度的G15預(yù)處理30min。箭頭指示線粒體自噬體。放大倍數(shù)20000倍。8.2E2減少M(fèi)in6細(xì)胞中TOM20和LampII共定位的表達(dá)將Min6細(xì)胞分為對照組、10-7M濃度E2組、E2+GPER拮抗劑(G15)組,通過免疫熒光技術(shù)檢測線粒體外膜蛋白TOM20和溶酶體膜蛋白LampII共定位。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,與對照組相比,E2組的TOM20和LampII陽性顆粒共定位減少,而在經(jīng)過G15預(yù)處理的G15+E2組中,這種減少被抵消(圖8.2)。
本文編號:3074041
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