發(fā)布時間：2021-03-10 02:29

　　背景:成骨分化是一個復雜的網(wǎng)絡(luò),包括多種信號通路轉(zhuǎn)錄水平和轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)控,具體機制仍不清楚。研究關(guān)鍵miR NA對骨髓間充質(zhì)干細胞成骨分化的調(diào)控作用對于治療骨質(zhì)疏松和骨缺損具有重要意義。目的:探索mi R-21/Sprouty1功能軸調(diào)控絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松患者骨髓間充質(zhì)干細胞的成骨能力。方法:分離培養(yǎng)正常人和絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松患者的骨髓間充質(zhì)干細胞,比較2組細胞的成骨能力。Real time RT-PCR和Western Blot檢測2組細胞中miR-21和Spry1的表達。利用轉(zhuǎn)染的方法上調(diào)絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松患者骨髓間充質(zhì)干細胞中的miR-21水平,檢測其成骨能力及Spry1的表達變化,Real time RT-PCR和Western Blot檢測成骨標志性基因Runx2和Osterix的表達。結(jié)果與結(jié)論:（1）與正常人骨髓間充質(zhì)干細胞相比,絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松患者骨髓間充質(zhì)干細胞的成骨能力明顯減弱,而且miR-21表達下降,Spry1表達上升,mi R-21-Spry1功能軸受到抑制;（2）通過轉(zhuǎn)染mi R-21,下調(diào)Spry1,增加Runx2和Osterix的表達,能夠部分恢復絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松患者... 

【文章來源】：中國組織工程研究. 2017,21(21)北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
    1.1 設(shè)計
    1.2 時間及地點
    1.3 材料
    1.4 實驗方法
        1.4.1 樣本的收集
        1.4.2 骨髓間充質(zhì)干細胞的分離培養(yǎng)
        1.4.3 mi R-21和Spry1表達的檢測
        1.4.4 熒光素酶報告基因載體的構(gòu)建
        1.4.5 Sprouty1慢病毒載體的構(gòu)建
        1.4.6 mi R-21的轉(zhuǎn)染
        1.4.7 骨髓間充質(zhì)干細胞成骨基因的表達
    1.5 主要觀察指標
    1.6 統(tǒng)計學分析
2 結(jié)果Results
    2.1 干細胞培養(yǎng)和鑒定結(jié)果
    2.2 絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松患者骨髓間充質(zhì)干細胞的成骨分化能力減弱
    2.3 mi R-21在絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松患者骨髓間充質(zhì)干細胞中的表達量下降
    2.4 Spry1在絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松患者骨髓間充質(zhì)干細胞中表達明顯上升
    2.5 高表達mi R-21能夠恢復絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松患者骨髓間充質(zhì)干細胞受損的成骨能力
3 討論Discussion



本文編號：3073898