目的探討胃饑餓素（ghrelin）對(duì)成骨細(xì)胞誘導(dǎo)的影響,同時(shí)探討PI3K/Akt信號(hào)通路在其中發(fā)揮的作用。方法選擇小鼠成骨前體細(xì)胞MC 3T3-E1為研究對(duì)象,培養(yǎng)并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)形態(tài)及其變化。分別將不同濃度的胃饑餓素（0μmol/L、0.05μmol/L、0.10μmol/L）加入細(xì)胞培養(yǎng)基中孵育,采用CCK-8試劑盒檢測(cè)細(xì)胞的增殖活性;堿性磷酸酶測(cè)定試劑盒檢測(cè)細(xì)胞的堿性磷酸酶活性;Western blot方法檢測(cè)PI3K/AKT信號(hào)通路相關(guān)蛋白PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT的表達(dá)變化。根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)方法所得的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)應(yīng)用統(tǒng)計(jì)分析軟件SPSS 22.0進(jìn)行分析,應(yīng)用制圖軟件Graphpad Prism 5進(jìn)行作圖。組間比較采用單因素方差分析（one-way ANOVA）,以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果（1）在顯微鏡下觀察細(xì)胞,可見(jiàn)細(xì)胞貼壁生長(zhǎng),呈現(xiàn)出紡錘形、三角形、多角形等不規(guī)則形態(tài),且細(xì)胞間可通過(guò)長(zhǎng)短不一的樹(shù)突相互連接,符合成骨細(xì)胞系生長(zhǎng)的形態(tài)學(xué)特征,實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比較,加入饑餓素后細(xì)胞生長(zhǎng)更快,且在一定濃度范圍內(nèi),饑餓素濃度越高,細(xì)胞生長(zhǎng)越快。（... 

【文章來(lái)源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】：43 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
第一章 實(shí)驗(yàn)材料
    1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
    1.2 試劑與藥品
    1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器
第二章 實(shí)驗(yàn)方法
    2.1 培養(yǎng)液的配置
    2.2 成骨細(xì)胞 3T3-E1 的復(fù)蘇、培養(yǎng)、傳代、凍存
    2.3 CCK-8法測(cè)定成骨細(xì)胞3T3-E1增殖
    2.4 測(cè)定堿性磷酸酶（ALP）活性
    2.5 Western blot檢測(cè)通路相關(guān)蛋白表達(dá)
    2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 一般結(jié)果
    3.2 CCK-8測(cè)定細(xì)胞增殖情況
    3.3 微量酶標(biāo)法測(cè)定細(xì)胞堿性磷酸酶活性
    3.4 WESTERN BLOT測(cè)定PI3K/AKT通路相關(guān)蛋白表達(dá)情況
第四章 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
縮略詞表
致謝



本文編號(hào)：3053831