目的:晚期糖基化終末產(chǎn)物（advanced glycation end products,AGEs）、糖原合成酶激酶3β（glycogen synthase kinase3β,GSK3β）、瞬時(shí)受體電位M2型（transient receptor potential melastain2,TRPM2）被報(bào)道在糖尿病及成骨細(xì)胞增殖受限機(jī)制中有重要作用,但對(duì)三者之間的上下游關(guān)系的研究還比較匱乏。本文通過體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)來研究AGEs、GSK3β、TRPM2對(duì)高糖環(huán)境下成骨細(xì)胞增殖活性的影響以及三者影響成骨細(xì)胞增殖的機(jī)制。方法:通過在高糖培養(yǎng)基中培養(yǎng)成骨細(xì)胞來模擬糖尿病內(nèi)環(huán)境,用westernblot檢測(cè)高糖環(huán)境下成骨細(xì)胞中AGEs、GSK3β、TRPM2的差異表達(dá),在高糖培養(yǎng)基中分別加入AGEs抑制劑Aminoguanidine（氨基胍）、GSK3β抑制劑AR-A014418、TRPM2抑制劑Clotrimazole（克霉唑）,用MTT法檢測(cè)成骨細(xì)胞活性,再用western blot檢測(cè)每種抑制劑對(duì)其它兩種物質(zhì)的表達(dá)影響,光鏡下觀察成骨細(xì)胞在不同抑制劑組的細(xì)胞形態(tài)及數(shù)量。結(jié)果:光鏡下觀察成骨細(xì)... 

【文章來源】：蘭州大學(xué)甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
第一章 前言
第二章 實(shí)驗(yàn)材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.4 實(shí)驗(yàn)主要試劑配制
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)分組
        2.2.2 MC3T3-E1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.3 蛋白質(zhì)免疫印跡（westernblot）
        2.2.4 MTT 實(shí)驗(yàn)
        2.2.5 統(tǒng)計(jì)方法
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 AGEs、GSK3β 、TRPM2 在高糖環(huán)境下的差異表達(dá)及三者分別在抑制劑條件下的細(xì)胞形態(tài)
    3.2 AGEs抑制劑、GSK3β抑制劑與TRPM2 抑制劑對(duì)成骨細(xì)胞增殖活性的影響（MTT法）
    3.3 抑制劑對(duì)AGEs、GSK3β 、TRPM2 表達(dá)的相互作用
第四章 討論
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
在學(xué)期間的研究成果
英文縮略詞表
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
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