骨質(zhì)疏松癥是主要表現(xiàn)為骨量減少、骨微結(jié)構(gòu)破壞,導(dǎo)致骨骼強(qiáng)度和負(fù)荷承受能力降低,易于發(fā)生脆性骨折的一類全身性骨代謝障礙疾病,也是多種骨破壞性疾病共有的病理?yè)p害。骨質(zhì)疏松發(fā)病率高,嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量,給社會(huì)帶來(lái)沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。正常骨代謝主要依賴于破骨細(xì)胞發(fā)揮的骨吸收作用和成骨細(xì)胞發(fā)揮的成骨作用之間的平衡。任何原因?qū)е逻@種平衡的破壞都會(huì)引起骨代謝性相關(guān)疾病。其中,破骨細(xì)胞活性和功能的增強(qiáng)在這一過(guò)程中發(fā)揮著極其重要的作用。核因子κB受體活化因子配體（RANKL,Receptor Activator of Nuclear Factor-κB Ligand）對(duì)破骨細(xì)胞的分化、成熟及功能都發(fā)揮著關(guān)鍵性作用。RANKL結(jié)合到破骨前體細(xì)胞的核因子κB活化因子受體（RANK）上,啟動(dòng)下游NF-κB,P38,ERK,JNK等信號(hào)通路,刺激破骨細(xì)胞的分化、成熟及功能。阻斷RANKL與RANK的結(jié)合,可抑制破骨細(xì)胞的分化和成熟�？筊ANKL單克隆抗體Denosumab可以特異性地阻斷RANKL與其受體的結(jié)合,有效地的抑制破骨細(xì)胞的分化、成熟和功能,對(duì)骨質(zhì)疏松等骨吸收性疾病療效明顯。最近研究表明,在自體蛋白中... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)陜西省 211工程院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

RANKL的晶體結(jié)構(gòu)

分泌甲狀旁腺素相關(guān)肽（PTHrP），PTHrP 上調(diào)成骨細(xì)胞 R從而刺激破骨細(xì)胞的分化和功能，造成局部骨破壞；另外，骨基質(zhì)TGF-β，骨破壞時(shí)大量釋放，進(jìn)一步刺激乳腺癌細(xì)胞高表達(dá) PTHrP 18, 37]。炎癥性骨病最常見的類型是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，以關(guān)節(jié)軟骨和特點(diǎn)。在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的關(guān)節(jié)滑膜中，積聚了大量的可以分化成胞，并且有很多可以刺激破骨細(xì)胞生成的因子：IL-1，IL-6，IL-18]。這些因子都直接或者間接刺激 RANKL 基因的高表達(dá)，從而刺激功能。關(guān)節(jié)滑膜中的 RANKL，以及 T 細(xì)胞中的 RANKL 可以直接噬細(xì)胞生成破骨細(xì)胞[39]。，OPG/RANKL-RANK 信號(hào)通路是機(jī)體控制破骨細(xì)胞分化、成熟通路（圖 2），阻斷這一關(guān)鍵信號(hào)通路中 RANKL 與 RANK 的結(jié)合破骨細(xì)胞的分化及其功能，有效地控制骨吸收，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)骨質(zhì)疏

在結(jié)構(gòu)上和極性上與酪氨酸極其相似（圖3），如果用來(lái)置換自體蛋白中的酪氨酸，在不影響蛋白構(gòu)象的同時(shí)，給蛋白引入強(qiáng)的抗原性，有可能突破免疫系統(tǒng)對(duì)自體蛋白的免疫耐受。Schultz Peter 教授研究組通過(guò)非天然氨基酸插入技術(shù)將小鼠 TNF-α 第 86 位酪氨酸置換為 p-硝基苯丙氨酸。插入 p-硝基苯丙氨酸的 TNF 即使在無(wú)佐劑的情況下，有效地誘發(fā)了小鼠的特異性體液免疫反應(yīng)，產(chǎn)生了針對(duì)內(nèi)源野生型 TNF 的高滴度中和性抗體[5, 6]。另有研究證實(shí)，將p-硝基苯丙氨酸插入小鼠 C5a 蛋白，有效地誘發(fā)了小鼠的特異性體液免疫反應(yīng)，產(chǎn)生了針對(duì)自體內(nèi)源 C5a 蛋白的高滴度中和性抗體，對(duì)小鼠膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎療效明顯[44]。圖 3 酪氨酸（A）與 p-硝基苯丙氨酸（B）的結(jié)構(gòu)。引自（Grunewald J, et al. Proc NatlAcadSci USA. 2008, 105(32): 11276-11280）基于以上背景，本研究依據(jù)小鼠 RANKL 的三維晶體結(jié)構(gòu)信息，利用非天然氨基酸插入這一全新的技術(shù)對(duì) RANKL 進(jìn)行定點(diǎn)插入修飾。首先通過(guò) RT-PCR 克隆了具有活性的小鼠 RANKL（mRANKL）的胞外段基因

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]中國(guó)原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥流行病學(xué)[J]. 趙燕玲,潘子昂,王石麟,王虔,劉京萍,劉忠厚.  中國(guó)骨質(zhì)疏松雜志. 1998(01)



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