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Wnt/β-catenin信號通路對vaspin介導(dǎo)的大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的影響

發(fā)布時間:2021-02-14 06:38
  目的:觀察不同濃度vaspin對大鼠BMSCs成骨分化的影響,并研究Wnt通路是否參與vaspin對BMSC成骨分化的影響。方法:1.全骨髓貼壁法分離培養(yǎng)4周齡雄性SD大鼠BMSCs,傳代培養(yǎng)至P3代作為體外試驗?zāi)P?觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)及流式細(xì)胞儀檢測表面標(biāo)記物。2.實驗分組:對照組加入成骨誘導(dǎo)液、實驗組:分別加入含10ng/ml、50ng/ml、100ng/ml vaspin成骨誘導(dǎo)液及含100ng/ml vaspin成骨誘導(dǎo)液+DKK1(Wnt/β-catenin信號通路特異性阻斷劑),于成骨誘導(dǎo)第7天酶標(biāo)儀檢測堿性磷酸酶(ALP)活性,RT-PCR檢測ALP、核心蛋白結(jié)合因子2(Runx2)、及β-catenin m RNA表達(dá)水平。3.100ng/mlvaspin聯(lián)合成骨誘導(dǎo)液干預(yù)BMSCs,于3周后茜素紅染色。結(jié)果:1.P3代BMSCs,呈長梭形,細(xì)胞分布成簇或旋渦狀;細(xì)胞表面抗原CD44、CD90(+),CD34(-),符合BMSCs表面標(biāo)志物特點(diǎn)。2.Vaspin對BMSCs成骨分化的影響:(1)ALP活性:和對照組比較,低濃度組無明顯增加(P>0.05),在中高濃度組... 

【文章來源】:山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】:38 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
英文摘要
縮寫詞中英文對照表
前言
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
2 結(jié)果
    2.1 大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的形態(tài)特征
    2.2 流式細(xì)胞儀鑒定BMSCs表面標(biāo)志物
    2.3 堿性磷酸酶活性測定
    2.4 ALP、Runx2、β-catenin mRNA表達(dá)
    2.5 茜素紅染色礦化結(jié)節(jié)
3 討論
4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
在學(xué)期間承擔(dān)/參與的科研課題與研究成果
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本文編號:3033284

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