目的:橋本甲狀腺炎（Hashimoto thyroiditis,HT）是內(nèi)分泌系統(tǒng)常見疾病之一。本課題通過研究橋本甲狀腺炎患者外周血巨噬細(xì)胞極化及代謝方式的改變,探討二甲雙胍（Metformin,Met）、2-脫氧葡萄糖（2-Deoxy-D-glucose,2DG）對(duì)外周血巨噬細(xì)胞能量代謝及極化狀態(tài)的影響,為尋找新的治療靶點(diǎn)和治療策略提供線索。方法:隨機(jī)選取患者及健康對(duì)照（Healthy control,HC）各30例,使用淋巴細(xì)胞分離液提取受試者外周血中的單個(gè)核細(xì)胞（Peripheral Blood Mononuclear Cell,PBMCs）。通過使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)PBMCs中M1型和M2型巨噬細(xì)胞的比例;應(yīng)用Stemcell RosetteSep的方法獲得純化的單核細(xì)胞,體外給予10ng/ml GM-CSF的血清培養(yǎng)液培養(yǎng),并在培養(yǎng)后第7天,收集細(xì)胞培養(yǎng)上清,分離純化巨噬細(xì)胞并收集細(xì)胞培養(yǎng)上清,免疫酶聯(lián)吸附法（ELISA）檢測(cè)IL-10、IL-6與TNF-α的水平;seahorse能量代謝分析儀檢測(cè)分選出的巨噬細(xì)胞的糖酵解水平并分析其變化;使用Met、2DG對(duì)巨噬細(xì)胞進(jìn)行處理后... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁(yè)數(shù)】：49 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

HT組和HC組M1/M2型巨噬細(xì)胞比例的比較

中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文12圖2巨噬細(xì)胞表面標(biāo)志物CD68的表達(dá)水平Fig.2ExpressionofmacrophagesurfacemarkerCD683.4巨噬細(xì)胞的細(xì)胞因子分泌水平ELISA檢測(cè)HT組和HC組血清中細(xì)胞因子TNF-α、IL-6、IL-10表達(dá)差異。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，HT組IL-6、TNF-α的表達(dá)水平均高于HC組，IL-10的表達(dá)水平低于HC組，且均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）。圖3HT組和HC組巨噬細(xì)胞細(xì)胞因子TNF-α、IL-6、IL-10分泌水平*P<0.05，HT組與HC組之間比較；n=20Fig.3ExpressionofmacrophagecytokinesTNF-α、IL-6、IL-10inHTgroupandHCgroup*P<0.05,HTvsHC;n=203.5巨噬細(xì)胞糖酵解水平的檢測(cè)采用Seahorse能量代謝分析儀檢測(cè)HT組與HC組外周血巨噬細(xì)胞的糖酵解水平，結(jié)果如圖所示：與HC組相比，HT組的細(xì)胞外酸度（extracellularacidificationrate，ECAR）值顯著增加（圖4-A），糖酵解水平（圖4-B）和糖酵解能力（圖4-C）高于HC組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。ABC

中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文12圖2巨噬細(xì)胞表面標(biāo)志物CD68的表達(dá)水平Fig.2ExpressionofmacrophagesurfacemarkerCD683.4巨噬細(xì)胞的細(xì)胞因子分泌水平ELISA檢測(cè)HT組和HC組血清中細(xì)胞因子TNF-α、IL-6、IL-10表達(dá)差異。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，HT組IL-6、TNF-α的表達(dá)水平均高于HC組，IL-10的表達(dá)水平低于HC組，且均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）。圖3HT組和HC組巨噬細(xì)胞細(xì)胞因子TNF-α、IL-6、IL-10分泌水平*P<0.05，HT組與HC組之間比較；n=20Fig.3ExpressionofmacrophagecytokinesTNF-α、IL-6、IL-10inHTgroupandHCgroup*P<0.05,HTvsHC;n=203.5巨噬細(xì)胞糖酵解水平的檢測(cè)采用Seahorse能量代謝分析儀檢測(cè)HT組與HC組外周血巨噬細(xì)胞的糖酵解水平，結(jié)果如圖所示：與HC組相比，HT組的細(xì)胞外酸度（extracellularacidificationrate，ECAR）值顯著增加（圖4-A），糖酵解水平（圖4-B）和糖酵解能力（圖4-C）高于HC組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。ABC

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]靈芝抗腫瘤作用的免疫學(xué)機(jī)制及其臨床應(yīng)用[J]. 林志彬.  中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志. 2015(06)



本文編號(hào)：3025861