目的:橋本甲狀腺炎（Hashimoto thyroiditis,HT）是內(nèi)分泌系統(tǒng)常見疾病之一。本課題通過研究橋本甲狀腺炎患者外周血巨噬細胞極化及代謝方式的改變,探討二甲雙胍（Metformin,Met）、2-脫氧葡萄糖（2-Deoxy-D-glucose,2DG）對外周血巨噬細胞能量代謝及極化狀態(tài)的影響,為尋找新的治療靶點和治療策略提供線索。方法:隨機選取患者及健康對照（Healthy control,HC）各30例,使用淋巴細胞分離液提取受試者外周血中的單個核細胞（Peripheral Blood Mononuclear Cell,PBMCs）。通過使用流式細胞儀檢測PBMCs中M1型和M2型巨噬細胞的比例;應用Stemcell RosetteSep的方法獲得純化的單核細胞,體外給予10ng/ml GM-CSF的血清培養(yǎng)液培養(yǎng),并在培養(yǎng)后第7天,收集細胞培養(yǎng)上清,分離純化巨噬細胞并收集細胞培養(yǎng)上清,免疫酶聯(lián)吸附法（ELISA）檢測IL-10、IL-6與TNF-α的水平;seahorse能量代謝分析儀檢測分選出的巨噬細胞的糖酵解水平并分析其變化;使用Met、2DG對巨噬細胞進行處理后... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學遼寧省

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

HT組和HC組M1/M2型巨噬細胞比例的比較

中國醫(yī)科大學碩士學位論文12圖2巨噬細胞表面標志物CD68的表達水平Fig.2ExpressionofmacrophagesurfacemarkerCD683.4巨噬細胞的細胞因子分泌水平ELISA檢測HT組和HC組血清中細胞因子TNF-α、IL-6、IL-10表達差異。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，HT組IL-6、TNF-α的表達水平均高于HC組，IL-10的表達水平低于HC組，且均具有統(tǒng)計學差異（P<0.05）。圖3HT組和HC組巨噬細胞細胞因子TNF-α、IL-6、IL-10分泌水平*P<0.05，HT組與HC組之間比較；n=20Fig.3ExpressionofmacrophagecytokinesTNF-α、IL-6、IL-10inHTgroupandHCgroup*P<0.05,HTvsHC;n=203.5巨噬細胞糖酵解水平的檢測采用Seahorse能量代謝分析儀檢測HT組與HC組外周血巨噬細胞的糖酵解水平，結(jié)果如圖所示：與HC組相比，HT組的細胞外酸度（extracellularacidificationrate，ECAR）值顯著增加（圖4-A），糖酵解水平（圖4-B）和糖酵解能力（圖4-C）高于HC組，差異均具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。ABC

中國醫(yī)科大學碩士學位論文12圖2巨噬細胞表面標志物CD68的表達水平Fig.2ExpressionofmacrophagesurfacemarkerCD683.4巨噬細胞的細胞因子分泌水平ELISA檢測HT組和HC組血清中細胞因子TNF-α、IL-6、IL-10表達差異。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，HT組IL-6、TNF-α的表達水平均高于HC組，IL-10的表達水平低于HC組，且均具有統(tǒng)計學差異（P<0.05）。圖3HT組和HC組巨噬細胞細胞因子TNF-α、IL-6、IL-10分泌水平*P<0.05，HT組與HC組之間比較；n=20Fig.3ExpressionofmacrophagecytokinesTNF-α、IL-6、IL-10inHTgroupandHCgroup*P<0.05,HTvsHC;n=203.5巨噬細胞糖酵解水平的檢測采用Seahorse能量代謝分析儀檢測HT組與HC組外周血巨噬細胞的糖酵解水平，結(jié)果如圖所示：與HC組相比，HT組的細胞外酸度（extracellularacidificationrate，ECAR）值顯著增加（圖4-A），糖酵解水平（圖4-B）和糖酵解能力（圖4-C）高于HC組，差異均具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。ABC

【參考文獻】：
期刊論文
[1]靈芝抗腫瘤作用的免疫學機制及其臨床應用[J]. 林志彬.  中國藥理學與毒理學雜志. 2015(06)



本文編號：3025861