發(fā)布時(shí)間：2021-02-07 04:50

　　糖皮質(zhì)激素引起的骨質(zhì)疏松是最常見的繼發(fā)性骨質(zhì)疏松癥。煙酰胺單核苷酸（NMN）是一種重要的NAD+中間體,是一種有效的治療年齡相關(guān)性疾病的藥物。但是煙酰胺單核苷酸在糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的骨質(zhì)疏松癥中的作用及其機(jī)制尚未完全清楚。本研究探討了煙酰胺單核苷酸對(duì)地塞米松（Dex）誘導(dǎo)的成骨抑制的保護(hù)作用及其機(jī)制。我們用一定濃度的地塞米松處理骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)地塞米松可以降低成骨標(biāo)志物堿性磷酸酶、runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2（Runx2）和OCN水平。煙酰胺單核苷酸治療可以減輕地塞米松誘導(dǎo)的成骨分化抑制、SIRT1和過氧化物酶體增殖激活受體共激活物-1α（PGC-1α）。敲除SIRT1可以逆轉(zhuǎn)煙酰胺單核苷酸對(duì)成骨分化的保護(hù)作用和減少PGC-1α的表達(dá)水平�？傊�,我們的研究結(jié)果表明,煙酰胺單核苷酸通過上調(diào)SIRT1/PGC-1α信號(hào)通路來緩解糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的成骨抑制,煙酰胺單核苷酸可能是糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的骨質(zhì)疏松癥的潛在治療方法。 

【文章來源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：40 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

地塞米松誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨抑制

第3章結(jié)果13圖2：煙酰胺單核苷酸在地塞米松誘導(dǎo)的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨抑制中的作用。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)于成骨分化培養(yǎng)基、含有10-5M地塞米松成骨分化培養(yǎng)基、含有10-5M地塞米松和煙酰胺單核苷酸(1，5和10mM)成骨分化培養(yǎng)基。(A)定量PCR檢測(cè)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中Runx2、ALP和OCNmRNA的表達(dá)。(B)采用蛋白質(zhì)免疫印跡（Westernblotting）檢測(cè)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中Runx2和ALP蛋白質(zhì)表達(dá)水平。(C)茜素紅和堿性磷酸酶染色法評(píng)價(jià)經(jīng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的成骨能力。比例尺=20μm規(guī)模。所有實(shí)驗(yàn)均進(jìn)行3次以上。***P<0.001，**P<0.01，*P<0.05。NMN：煙酰胺單核苷酸；Dex：地塞米松;BMSC：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞；ALP：堿性磷酸酶；Runx2：runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2；OCN：骨鈣素。

第3章結(jié)果15圖3：SIRT1/PGC-1α信號(hào)通路參與煙酰胺單核苷酸對(duì)地塞米松誘導(dǎo)成骨抑制的保護(hù)。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分別在成骨分化培養(yǎng)基、含有地塞米松的成骨分化培養(yǎng)基、含有地塞米松和煙酰胺單核苷酸的成骨分化培養(yǎng)基中培養(yǎng)。(A)熒光定量PCR用于檢測(cè)SIRT1,PGC-1α,Runx2和ALPmRNA在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中的表達(dá)水平。(B)蛋白質(zhì)免疫印跡（Westernblot）用于確定SIRT1,PGC-1α,Runx2和ALP在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的蛋白表達(dá)水平。(C)ALP在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中的相對(duì)活性。(D)免疫熒光實(shí)驗(yàn)確定誘導(dǎo)兩天的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中SIRT1蛋白表達(dá)水平。比例尺=5μm。所有實(shí)驗(yàn)均進(jìn)行3次以上。***P<0.001，**P<0.01，*P<0.05。SIRT1：sirtuin蛋白1;PGC-1α：過氧化物酶體增殖物激活受體-γ共激活因子-1α;NMN:煙酰胺單核苷酸;Dex:地塞米松;BMSC:骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞;ALP:堿性磷酸酶;Runx2:runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2。


本文編號(hào)：3021682