目的:探討尿酸干預(yù)大鼠腎細(xì)胞對其線粒體損傷及磷酸甘油酸變位酶家族成員5（Pgam5）和發(fā)動蛋白相關(guān)蛋白1（Drp1）表達(dá)的影響。方法:0. 6 mmol/L尿酸干預(yù)大鼠腎細(xì)胞NRK-52E,采用MTT法檢測細(xì)胞活力,Hochest 33258染色觀察細(xì)胞形態(tài),流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡水平,透射電鏡觀察線粒體形態(tài)結(jié)構(gòu),免疫熒光染色觀察Pgam5和Drp1陽性表達(dá)情況,RT-qPCR檢測線粒體中Pgam5 m RNA的表達(dá)水平,Western blot檢測細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中Pgam5和Drp1蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:與正常細(xì)胞比較,尿酸干預(yù)組細(xì)胞活力顯著降低,凋亡率顯著升高,線粒體腫脹、空泡化,嵴斷裂,線粒體中Pgam5的m RNA表達(dá)顯著降低,而細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中Pgam5和Drp1的蛋白表達(dá)水平顯著升高（P<0. 01）。結(jié)論:尿酸可破壞腎細(xì)胞線粒體結(jié)構(gòu),上調(diào)細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中Pgam5/Drp1表達(dá),誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。 

【文章來源】：中國病理生理雜志. 2020,36(06)北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

尿酸對NRK-52E細(xì)胞活力的影響

采用Hoechst 33258染色觀察細(xì)胞形態(tài)，發(fā)現(xiàn)正常組細(xì)胞大部分細(xì)胞呈圓形或橢圓形，細(xì)胞核呈均勻藍(lán)色熒光，出現(xiàn)極少濃染致密的細(xì)胞碎片，呈亮藍(lán)色，即為凋亡小體；尿酸干預(yù)組細(xì)胞形態(tài)異常，出現(xiàn)大量亮藍(lán)色細(xì)胞碎片，即凋亡小體增多，見圖2A。采用流式細(xì)胞術(shù)檢測了各組細(xì)胞凋亡水平，統(tǒng)計Q2-2和Q2-4細(xì)胞凋亡率，結(jié)果顯示尿酸干預(yù)組細(xì)胞凋亡率顯著高于正常組（P<0.01），見圖2B。3 尿酸對腎細(xì)胞線粒體形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響

透射電鏡下觀察細(xì)胞線粒體形態(tài)變化，正常組細(xì)胞線粒體形態(tài)正常，嵴結(jié)構(gòu)完整；尿酸干預(yù)組線粒體腫脹、空泡化，且嵴結(jié)構(gòu)被破壞，出現(xiàn)斷裂，見圖3。4 尿酸對腎細(xì)胞Pgam5和Drp1表達(dá)的影響

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]細(xì)胞凋亡途徑的研究進(jìn)展[J]. 李帥,張炳東.  山東醫(yī)藥. 2017(37)
[2]線粒體功能障礙在尿酸損傷腎小管上皮細(xì)胞中的作用[J]. 李文,吳紅赤,封寶紅,趙悅,任鳳芹,韓威.  中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志. 2015(03)
[3]四妙散對尿酸誘導(dǎo)的人腎小管上皮細(xì)胞TGF-β1及α-SMA表達(dá)的影響[J]. 高碧珍,陳繼承,康潔,張凌媛,許珈齊.  中華中醫(yī)藥雜志. 2015(02)
[4]高尿酸血癥與腎損害[J]. 趙娟,張卓莉.  中國醫(yī)學(xué)前沿雜志(電子版). 2014(10)
[5]線粒體DNA穩(wěn)定性與疾病的關(guān)系[J]. 黃珊,高文祥,高鈺琪.  中國病理生理雜志. 2014(02)
[6]線粒體形態(tài)與細(xì)胞凋亡的關(guān)系[J]. 門秀麗,張麗萍,吳靜,劉虹麟,張文健,婁晉寧.  生理科學(xué)進(jìn)展. 2012(05)



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