背景卵巢早衰（premature ovarian failure,POF）是指女性40歲前以閉經(jīng)、不育、雌激素缺乏及促性腺激素水平升高為特征的一種疾病[1]。化療是目前治療惡性腫瘤的有效手段,但化療藥會(huì)對(duì)患者卵巢造成不同程度的損傷,甚至有部分患者發(fā)展成為POF[2]。環(huán)磷酰胺（Cyclophosphamide,CTX）,是化療常用的烷化劑,研究CTX造成的POF治療方案具有十分重要的意義。目前治療POF的方案均不能從根本上起到修復(fù)卵巢的作用,近些年間充質(zhì)干細(xì)胞治療POF成為研究熱點(diǎn),人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（Human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUMSCs）來(lái)至廢棄的臍帶,資源豐富獲取便捷,屬于免疫缺陷細(xì)胞,具有多向分化潛能成為干細(xì)胞治療POF的重點(diǎn)研究對(duì)象[3]。我們將hUMSCs從臍帶中分離出來(lái),期望探究出一種可修復(fù)卵巢,從根本上解決POF的治療方案。目的（1）采用組織貼壁法分離hUMSCs,對(duì)其進(jìn)行鑒定并觀察其生物學(xué)特性。（2）觀察hUMSCs成脂、成骨、成軟骨分化能力。（3）評(píng)價(jià)CTX造POF動(dòng)物模型方案是否成功。（4）探究hUMS... 

【文章來(lái)源】：廣東藥科大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

P0代細(xì)胞形態(tài)（×100）

圖 1.1：P0 代細(xì)胞形態(tài)（×100） 圖 1.2：P1 代細(xì)胞形態(tài)（×100） 圖 1.3：P5 代細(xì)胞形態(tài)（×100）2.4.2 hUMSCs 表面抗原鑒定流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果如圖 2 所示，CD73、CD90、CD105 表達(dá)陽(yáng)性，CD19、CD34、CD45、CD11b 和 HLA-DR 表達(dá)陰性。其中 CD73 的表達(dá)率為 99.5%，CD90 表達(dá)率為 100%，CD105 表達(dá)率為 99.8%。間充質(zhì)干細(xì)胞表達(dá) CD29、CD44、CD90、CD73、CD105、HLA-ABC，不表達(dá)造血細(xì)胞標(biāo)志物 CD34、CD45、CD117、HLA-DR。根據(jù)我們測(cè)出的細(xì)胞免疫表型結(jié)果表明，我們培養(yǎng)并進(jìn)行傳代擴(kuò)增的細(xì)胞表達(dá)與 MSCs 相類似的抗原表面標(biāo)志物。（鑒定結(jié)果見圖 2）圖 2 流式細(xì)胞儀測(cè)細(xì)胞表面抗原

圖 1.1：P0 代細(xì)胞形態(tài)（×100） 圖 1.2：P1 代細(xì)胞形態(tài)（×100） 圖 1.3：P5 代細(xì)胞形態(tài)（×100）2.4.2 hUMSCs 表面抗原鑒定流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果如圖 2 所示，CD73、CD90、CD105 表達(dá)陽(yáng)性，CD19、CD34、CD45、CD11b 和 HLA-DR 表達(dá)陰性。其中 CD73 的表達(dá)率為 99.5%，CD90 表達(dá)率為 100%，CD105 表達(dá)率為 99.8%。間充質(zhì)干細(xì)胞表達(dá) CD29、CD44、CD90、CD73、CD105、HLA-ABC，不表達(dá)造血細(xì)胞標(biāo)志物 CD34、CD45、CD117、HLA-DR。根據(jù)我們測(cè)出的細(xì)胞免疫表型結(jié)果表明，我們培養(yǎng)并進(jìn)行傳代擴(kuò)增的細(xì)胞表達(dá)與 MSCs 相類似的抗原表面標(biāo)志物。（鑒定結(jié)果見圖 2）圖 2 流式細(xì)胞儀測(cè)細(xì)胞表面抗原

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]臍帶血血漿分離培養(yǎng)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞及體外擴(kuò)增人臍血CD34+細(xì)胞的研究[J]. 吳潔瑩,陸琰,陳勁松,吳韶清,湯雪薇,李焱.  中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志. 2015(04)
[2]卵巢早衰的治療現(xiàn)狀及進(jìn)展[J]. 徐暉.  中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生. 2015(21)
[3]卵巢功能早衰動(dòng)物模型建立方法的研究進(jìn)展[J]. 向?yàn)?姚廣濤,李瑞霞,張杰,黃元澤.  中國(guó)藥學(xué)雜志. 2015(05)
[4]Mesenchymal stem cells: Emerging mechanisms of immunomodulation and therapy[J]. Justin D Glenn,Katharine A Whartenby.  World Journal of Stem Cells. 2014(05)
[5]Migration capacity of human umbilical cord mesenchymal stem cells towards glioma in vivo[J]. Cungang Fan,Dongliang Wang,Qingjun Zhang,Jingru Zhou.  Neural Regeneration Research. 2013(22)
[6]An update on primary ovarian insufficiency[J]. JIN Min,YU YiQi & HUANG HeFeng * Women’s Hospital,School of Medicine,Zhejiang University,Hangzhou 310006,China.  Science China（Life Sciences）. 2012(08)
[7]人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分離擴(kuò)增方法的優(yōu)化[J]. 楊卿,楊揚(yáng),劉劍戎,潘國(guó)政,張英才,陳規(guī)劃,張琪.  中山大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)科學(xué)版). 2011(06)
[8]卵巢早衰臨床治療及促排卵后妊娠率研究[J]. 馮慧嫻.  山西醫(yī)藥雜志(下半月刊). 2010(01)

博士論文
[1]人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞治療卵巢早衰的初步實(shí)驗(yàn)研究[D]. 俞凌.中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院 2012
[2]促性腺激素釋放激素拮抗劑（GnRHant）預(yù)防化療損傷性卵巢功能早衰的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 趙雪靜.第四軍醫(yī)大學(xué) 2011
[3]人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞移植改善化療損傷卵巢功能的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 朱少芳.南方醫(yī)科大學(xué) 2011

碩士論文
[1]臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療卵巢早衰的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 呂曉丹.北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 2016
[2]臍帶基質(zhì)干細(xì)胞在不同誘導(dǎo)條件下向生殖細(xì)胞分化的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 冷少華.第三軍醫(yī)大學(xué) 2009



本文編號(hào)：2986230