目的:骨質(zhì)疏松作為最常見(jiàn)的骨疾病,在全球范圍內(nèi)有已有成千上百萬(wàn)的患者,消耗了大量的醫(yī)療資源及嚴(yán)重影響了患者生活質(zhì)量。骨質(zhì)疏松的進(jìn)展受多種因素影響,最重要的因素是隨年齡雌激素下降引起的骨流失,既往研究表明雌激素可以與其組織特定受體（ER）-α和（ER）–β結(jié)合阻止骨的重吸收,增加破骨細(xì)胞凋亡。然而,骨質(zhì)疏松及成骨細(xì)胞壽命縮短與雌激素缺乏間的機(jī)制仍不明確。這篇文章主要研究線粒體自噬,線粒體通過(guò)多種作用調(diào)節(jié)線粒體穩(wěn)態(tài)。在此項(xiàng)研究中,我們旨在研究雌激素通過(guò)GPER/PI3K/AKT通路引起小鼠成骨細(xì)胞M3T3細(xì)胞線粒體自噬繼而闡明其分子機(jī)制。方法:體外培養(yǎng)小鼠成骨細(xì)胞M3T3,應(yīng)用實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)小鼠成骨細(xì)胞GPER mRNA的表達(dá)情況。Western-blot技術(shù)檢測(cè)小鼠成骨細(xì)胞GPER蛋白磷酸化水平。分別加入濃度梯度17β-E2和/或GPER特異性抑制劑G15和/或PI3K特異性拮抗劑（LY294002）進(jìn)行干預(yù),Western-blot技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞GPER蛋白表達(dá)及AKT總蛋白及磷酸化蛋白水平和線粒體自噬相關(guān)蛋白（Hsp60、TOM20、LC3-II）活性變化,同時(shí)通過(guò)免疫熒光印證了線... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁(yè)數(shù)】：42 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

A17β-E2對(duì)M3T3細(xì)胞GPER的mRNA表達(dá)水平的影響

B17β-E2對(duì)M3T3細(xì)胞的GPER的活性表達(dá)的影響

圖 3.1C GPER 在 M3T3 細(xì)胞中的表達(dá)及定位 誘發(fā) M3T3 細(xì)胞線粒體自噬度 17β-E2(0, 10-7, 10-8和 10-9M）刺激成骨細(xì)胞 24h噬相關(guān)蛋白 LC3、Hsp60 和 Tom20 的活性，并進(jìn)行.2A、3.2B、3.2C)：與其他對(duì)照組相比，10-7M 組20、LC3 自噬蛋白的活性，當(dāng)給予 PI3K 抑制劑 LY時(shí)給予以上兩種抑制劑后，均會(huì)降低成骨細(xì)胞中線60、TOM20）的活性，結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.0


本文編號(hào)：2984057