目的:探討IL-38和TLR4在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎中的潛在關(guān)聯(lián)及其在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎中致病的機(jī)制。方法:選取2013年1月至2016年2月間本院收治的41例類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者（觀察組）及45例本院實(shí)施創(chuàng)傷后滑膜切除術(shù)的患者（對(duì)照組）為研究對(duì)象。收集觀察組和對(duì)照組的外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMCs）、滑膜組織及血清。熒光定量PCR檢測(cè)PBMCs及滑膜組織中IL-38及TLR4的mRNA水平。ELISA檢測(cè)滑膜液及血清中IL-38的表達(dá),Western blot檢測(cè)滑膜組織中IL-38及TLR4的表達(dá)。LPS和/或IL-38刺激RAW264.7細(xì)胞,ELISA檢測(cè)RAW264.7細(xì)胞上清中IL-6、IL-8及TNF-α的含量,熒光定量PCR檢測(cè)RAW264.7細(xì)胞TLR4、IL-6、IL-8及TNF-α的表達(dá)。NF-κB激活-核轉(zhuǎn)運(yùn)試劑盒及Western blot檢測(cè)NF-κB信號(hào)的激活水平。結(jié)果:與對(duì)照組相比,類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者PBMCs、血清及滑膜組織和滑膜液中IL-38水平顯著升高,而TLR4水平也顯著升高,Pearson相關(guān)分析顯示二者呈負(fù)相關(guān)。LPS和/或IL-38刺激RAW264.7細(xì)胞后,I... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)免疫學(xué)雜志. 2017,33(11)北大核心

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ＲA患者血清及關(guān)節(jié)滑膜液中IL-38表達(dá)Fig．1ExpressionofIL-38inserumandsynovialfluidin

吹?次，每次3min，加入抗熒光淬滅封片后激光共聚焦掃描顯微鏡下觀察并拍照。1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析所實(shí)驗(yàn)均單獨(dú)重復(fù)3次，所有數(shù)據(jù)采用SPSS20.0進(jìn)行分析，計(jì)量資料采用單因素方差分析，相關(guān)分析采用Pearson相關(guān)分析法進(jìn)行，P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果2.1ＲA患者血清、關(guān)節(jié)滑膜液中IL-38表達(dá)ＲA患者血清中IL-38表達(dá)見(jiàn)圖1，結(jié)果顯示，ＲA患者血清及關(guān)節(jié)滑膜液中IL-38表達(dá)均較對(duì)照組患者明顯升高。2.2ＲA患者PBMCs及滑膜組織中IL-38和TLＲ4mＲNA及蛋白水平ＲA患者PBMCs及滑膜組織中IL-38和TLＲ4mＲNA表達(dá)水平見(jiàn)圖2A、B，結(jié)果顯示，ＲA患者PBMCs及滑膜組織中IL-38和TLＲ4mＲNA水平顯著高于對(duì)照組患者。Westernblot結(jié)果也顯示，ＲA患者PBMCs及滑膜組織中IL-38和TLＲ4蛋白水平也顯著高于對(duì)照組患者(圖2C)。相關(guān)分析顯示二者呈負(fù)相關(guān)(r=－0.852，P＜0.001)，見(jiàn)圖2D。2.3IL-38對(duì)ＲAW264.7細(xì)胞TLＲ4、IL-6、IL-8和TNF-α表達(dá)及對(duì)LPS誘導(dǎo)炎癥的影響IL-38對(duì)TLＲ4表達(dá)影響見(jiàn)圖3A，結(jié)果顯示，IL-38能顯著下調(diào)TLＲ4的表達(dá)，同時(shí)能抑制LPS對(duì)TLＲ4的誘導(dǎo)表圖1ＲA患者血清及關(guān)節(jié)滑膜液中IL-38表達(dá)Fig．1ExpressionofIL-38inserumandsynovialfluidinpatientswithＲANote:Ｒepresentativeresultsofthreeindependentexperiments.＊＊.P＜0.001.達(dá)。此外，IL-38能顯著下調(diào)ＲAW264.7細(xì)胞中IL-6、IL-8和TNF-α表達(dá)，同時(shí)能抑制LPS的炎癥誘導(dǎo)效應(yīng)(圖3B、C)。2.4IL-38對(duì)LPS誘導(dǎo)的NF-κB信號(hào)激活影響IL-38對(duì)LPS誘導(dǎo)激活的NF-κB信號(hào)途徑影響見(jiàn)圖4A、B，結(jié)果顯示，IL-38能夠顯著抑制ＲAW264.7細(xì)圖2ＲA患者PBMCs及滑膜關(guān)節(jié)組織中IL-38及TLＲ4表達(dá)水平及其相關(guān)性Fig．2ExpressionandcorrelationanalysisofIL-38andTLＲ4inPBMCsandsynovial

epresentativeresultsofthreeindependentexperiments.＊＊.P＜0.001.達(dá)。此外，IL-38能顯著下調(diào)ＲAW264.7細(xì)胞中IL-6、IL-8和TNF-α表達(dá)，同時(shí)能抑制LPS的炎癥誘導(dǎo)效應(yīng)(圖3B、C)。2.4IL-38對(duì)LPS誘導(dǎo)的NF-κB信號(hào)激活影響IL-38對(duì)LPS誘導(dǎo)激活的NF-κB信號(hào)途徑影響見(jiàn)圖4A、B，結(jié)果顯示，IL-38能夠顯著抑制ＲAW264.7細(xì)圖2ＲA患者PBMCs及滑膜關(guān)節(jié)組織中IL-38及TLＲ4表達(dá)水平及其相關(guān)性Fig．2ExpressionandcorrelationanalysisofIL-38andTLＲ4inPBMCsandsynovialtissueofＲApa-tientsNote:*.P＜0.05，＊＊.P＜0.001.圖3IL-38抑制ＲAW264.7細(xì)胞中炎癥因子的表達(dá)Fig．3IL-38inhibitsexpressionofinflammatoryfactorsinＲAW264.7cellsNote:Ｒepresentativeresultsofthreeindependentexperiments.*.P＜0.05，＊＊.P＜0.001.郝喆等IL-38抑制LPS/TLＲ4誘導(dǎo)炎癥減輕類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的機(jī)制研究第11期·1649·

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Th1/Th2失衡對(duì)于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎炎癥損傷的臨床意義[J]. 任舒婷,李玉生.  標(biāo)記免疫分析與臨床. 2015(09)



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