目的 研究免疫調(diào)節(jié)劑CH1b、CH2b對健康人和活動期RA患者i NKT細胞體外增殖與功能的影響,對比CH1b、CH2b對兩組i NKT細胞作用的差異;并探討i NKT細胞對CH1b、CH2b可能的識別方式和細胞活化信號通路,為今后的臨床應用提供理論依據(jù)。方法 ①觀察免疫調(diào)節(jié)劑CH1b、CH2b體外對健康人和活動期RA患者i NKT細胞體外增殖與功能的影響。首先,收集健康人和活動期RA患者外周靜脈抗凝血并分離單個核細胞（peripheral blood mononuclear,PBMC）;其次,經(jīng)α-半乳糖神經(jīng)鞘胺醇（α-Galcer）和IL-2體外刺激擴增后,利用磁珠分選（MACS）技術分離擴增后PBMC得到純化的恒定型自然殺傷細胞（i NKT細胞）;再次,分別與免疫調(diào)節(jié)劑CH1b、CH2b共孵育后,采用MTT法定量檢測各組i NKT細胞增殖率;MILLIPLEX MAP Human Cytokine/Chemokine kit檢測相應細胞培養(yǎng)上清中IFN-γ/IL-4的水平;RT-PCR檢測各組i NKT細胞中IFN-γm RNA與IL-4 m RNA表達水平;MTT法檢測各組i ... 

【文章來源】：河北大學河北省

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略詞表
第一章 緒論
    1.1 序言
    1.2 RA的免疫學機制
    1.3 免疫細胞的特殊亞群—i NKT細胞
    1.4 i NKT細胞與RA
    1.5 i NKT細胞的激動劑
        1.5.1 α-Galcer及其類似物
        1.5.2 非糖脂類激動劑
        1.5.3 類核苷免疫調(diào)節(jié)劑CH
    1.6 研究目的與意義
    參考文獻
第二章 CH對活動期RA患者i NKT細胞功能影響的實驗研究
    2.1 序言
    2.2 材料和方法
        2.2.1 研究對象
        2.2.2 實驗試劑
        2.2.3 實驗儀器
        2.2.4 實驗方法
    2.3 結果
        2.3.1 CH1b、CH2b影響IL-2刺激的i NKT細胞增殖
        2.3.2 CH1b、CH2b影響i NKT細胞因子分泌
        2.3.3 CH1b、CH2b影響i NKT細胞IFN-γ m RNA、IL-4 m RNA表達
        2.3.4 CH1b、CH2b影響i NKT細胞的殺傷活性
    2.4 討論
    參考文獻
第三章 iNKT細胞對CH的識別方式及細胞活化通路
    3.1 序言
    3.2 材料和方法
        3.2.1 研究對象
        3.2.2 實驗試劑
        3.2.3 實驗儀器
        3.2.4 實驗方法
    3.3 結果
        3.3.1 抗CD1d影響CH1b、CH2b對i NKT細胞增殖的促進作用
        3.3.2 抗CD1d影響CH1b、CH2b對i NKT細胞分泌細胞因子的作用
        3.3.3 抗CD1d影響CH1b、CH2b對i NKT細胞IL-4 m RNA表達促進作用
        3.3.4 抗CD1d影響CH1b、CH2b對i NKT細胞殺傷活性的促進作用
        3.3.5 CH1b、CH2b影響i NKT細胞內(nèi)T-bet、GATA3表達
    3.4 討論
    參考文獻
第四章 結論
致謝
攻讀碩士期間發(fā)表的論文


【參考文獻】：
期刊論文
[1]含噻唑烷-4-酮的免疫刺激劑CH2a增強人iNKT細胞的功能[J]. 孟明,李春曉,王澤瑞,韓華,史建紅,陳華,李小六,陳冬志.  細胞與分子免疫學雜志. 2013(04)
[2]MiR-150特異調(diào)控胸腺iNKT細胞的發(fā)育和成熟[J]. 鄭全輝,張愛紅,鄭愛華,陸斌,張慶波,侯志宏,李娟,陳淑媛.  中國免疫學雜志. 2013(02)
[3]含噻唑烷-4-酮的糖類衍生小分子免疫調(diào)節(jié)劑對人淋巴細胞分化的影響[J]. 孟明,李春曉,洪洋,張金庫,劉紅梅,陳冬志,陳華,李小六.  中華微生物學和免疫學雜志. 2012 (06)
[4]新型合成的免疫調(diào)節(jié)劑CH1a促進人iNKT細胞功能的研究[J]. 孟明,王澤瑞,李春曉,韓華,史建紅,陳華,李小六,陳冬志.  中華微生物學和免疫學雜志. 2013 (06)



本文編號：2956877