發(fā)布時(shí)間：2020-12-24 02:44

　　目的本研究在建立人體肥胖網(wǎng)膜脂肪組織研究隊(duì)列、構(gòu)建高脂飲食誘導(dǎo)肥胖大鼠模型以及體外培養(yǎng)脂肪細(xì)胞的基礎(chǔ)上,觀察高水平FFA對(duì)脂肪細(xì)胞TLR9/KLF4及NF-κB炎癥信號(hào)通路關(guān)鍵因子表達(dá)的影響,探討TLR9/KLF4在FFA誘發(fā)的脂肪細(xì)胞炎癥反應(yīng)過程中的作用及可能的機(jī)制。方法選取受試個(gè)體正常組（Normal Control,NC）50例、肥胖組（Obese,OB）45例,檢測(cè)一般資料和生化指標(biāo)。Wistar健康雄性大鼠32只,分別正常飲食和高脂飲食喂養(yǎng),誘導(dǎo)肥胖模型。高脂飲食喂養(yǎng)至第4、10周檢測(cè)大鼠血脂、血糖水平。在體外培養(yǎng)3T3-L1前脂肪細(xì)胞,誘導(dǎo)分化為成熟的脂肪細(xì)胞后用油紅O染色鑒定。不同濃度棕櫚酸PA（0μM、0.2μM、2μM、20μM、100μM、200μM）刺激脂肪細(xì)胞,同時(shí)運(yùn)用si-RNA技術(shù)下調(diào)TLR9/KLF4、p IRES2-KLF4-Zs Green1上調(diào)KLF4、慢病毒感染脂肪細(xì)胞上調(diào)TLR9。q RT-PCR和Western Blot技術(shù)檢測(cè)動(dòng)物、人體網(wǎng)膜脂肪組織及脂肪細(xì)胞中TLR9、KLF4及NF-κB炎癥信號(hào)通路關(guān)鍵因子m RNA和蛋白表達(dá)水平,Elis... 

【文章來源】：石河子大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū) 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：72 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

網(wǎng)膜脂肪組織TLR9、KLF4、炎癥關(guān)鍵因子mRNA及蛋白表達(dá)水平(A)mRNA表達(dá)水平(B)蛋白表達(dá)水平(C)灰度掃描結(jié)果

圖 1 網(wǎng)膜脂肪組織 TLR9、KLF4、炎癥關(guān)鍵因子 mRNA 及蛋白表達(dá)水平(A) mRNA 表達(dá)水平 (B) 蛋白表達(dá)水平 (C) 灰度掃描結(jié)果t 檢驗(yàn), *P<0.05, **P<0.01 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義Figure 1 The mRNA and protein expression levels of TLR9, KLF4, key factors of omental adipose tissue(A) mRNAexpression level (B) protein expression level (C) gray scale scanning resultst test. *P<0.05, **P<0.01 the difference was statistically significant1.3 TLR9/KLF4 表達(dá)水平與血脂水平/炎癥信號(hào)通路關(guān)鍵因子相關(guān)性分析肥胖個(gè)體中，TLR9 mRNA 表達(dá)水平與 HDL、MYD88、SRC 和 KLF4 顯著正相關(guān)(P<0.05)；KLF4 mRNA 表達(dá)水平與 BMI、TG 和 TNF-α顯著負(fù)相關(guān)(P<0.05) ，而與 NF-κB顯著正相關(guān)(P<0.05)，見圖 2。

圖 3 網(wǎng)膜脂肪組織 DNMTs mRNA 表達(dá)水平(NC=28, OB=28)(A) DNMT1 (B) DNMT3a (C) DNMT3b 秩和檢驗(yàn),*P<0.05 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義Figure 3 The mRNA expression levels of DNMTs of omental adipose tissue(NC=28, OB=28)(A) DNMT1 (B) DNMT3a (C) DNMT3b rank sum test, *P<0.05 the difference was statistically significant.4.2 BSP 引物序列通過 BSP Primers 軟件分析 KLF4 基因啟動(dòng)子區(qū)及第一外顯子區(qū) CpG 島，見圖 設(shè)計(jì)引物。引物序列如下：1）啟動(dòng)子區(qū)引物，Primer-F1:GGGTTTYGAATTTAGGGAGTPrimer-R1: TCCCTTCCATCRTTACTATAACA2）第一外顯子區(qū)引物，Primer-F2: GTTTTTYGATTAGAGAGAAYGPrimer-R2: CAAATTAACCRAAATCCTTCTT注：Y 和 R 為簡(jiǎn)并堿基。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]代謝性疾病的代謝組學(xué)研究進(jìn)展[J]. 周寧,顏賢忠.  國(guó)際藥學(xué)研究雜志. 2015(05)
[2]脂聯(lián)素在代謝綜合征及心血管疾病中的研究進(jìn)展[J]. 郭瑩瑩,邊云飛,肖傳實(shí).  中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志. 2015(05)
[3]新疆維吾爾族、哈薩克族和漢族糖尿病前期人群血清尿酸及代謝綜合征分布的橫斷面研究[J]. 張宏武,蔣升,徐焱成.  中華流行病學(xué)雜志. 2013 (10)
[4]代謝組學(xué)在代謝性疾病研究中的進(jìn)展[J]. 趙春艷,阿基業(yè),曹蓓,劉林生,王新文,李夢(mèng)婕,石建,王廣基.  中國(guó)臨床藥理學(xué)與治療學(xué). 2011(04)
[5]新疆維漢哈三民族人群肥胖的流行病學(xué)調(diào)查研究[J]. 周玲,李南方,洪靜,李濤.  中國(guó)預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志. 2011(02)
[6]代謝綜合征與心血管疾病的相關(guān)研究進(jìn)展[J]. 溫曉妮,尤勇.  心血管病學(xué)進(jìn)展. 2010(04)
[7]DNA甲基轉(zhuǎn)移酶分類、功能及其研究進(jìn)展[J]. 王志剛,吳建新.  遺傳. 2009(09)
[8]心血管疾病中血管平滑肌細(xì)胞增殖與藥物開發(fā)[J]. 馬秉亮,吳玉林.  中國(guó)臨床藥理學(xué)與治療學(xué). 2004(08)

博士論文
[1]我國(guó)成人超重肥胖流行現(xiàn)狀、變化趨勢(shì)及健康危害研究[D]. 姜勇.中國(guó)疾病預(yù)防控制中心 2013



本文編號(hào)：2934822