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IGFBP2通過ERK1/2信號通路調(diào)控RA-FLS細胞生物學行為機制研究

發(fā)布時間:2020-12-20 00:25
  目的:探討胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(Insulinlike growth factor binding protein2,IGFBP2)對類風濕關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細胞(RA-FLS)生物學行為的作用,以及IGFBP2對細胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶(Extracellular regulated protein kinases1/2,ERK1/2)的作用。方法:首先,我們原代培養(yǎng)類風濕關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細胞(RA-FLS)和正常成纖維樣滑膜細胞(FLS),并采用q RT-PCR、Western blot及免疫熒光技術(shù)檢測IGFBP2 m RNA和蛋白在FLS和RA-FLS中的表達水平。其次,RA-FLS細胞被轉(zhuǎn)染si RNA-IGFBP2和si RNA-NC,q RT-PCR檢測IGFBP2在RA-FLS細胞中的干擾效果;CCK-8實驗檢測IGFBP2敲低后對RA-FLS細胞增殖能力的影響;流式細胞儀檢測IGFBP2敲低后對RA-FLS細胞凋亡的影響;Transwell檢測IGFBP2敲低對RA-FLS細胞侵襲能力的影響;劃痕實驗檢測IGFBP2敲低對RA-FLS細胞遷移能力的影響。此外,RA-... 

【文章來源】:暨南大學廣東省 211工程院校

【文章頁數(shù)】:78 頁

【學位級別】:博士

【部分圖文】:

IGFBP2通過ERK1/2信號通路調(diào)控RA-FLS細胞生物學行為機制研究


qRT-PCR檢測IGFBP2mRNA在成纖維樣滑膜細胞(FLS)和類風濕關(guān)節(jié)炎

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3 Western blot檢測IGFBP2蛋白在成纖維樣滑膜細胞(FLS)和類風濕關(guān)節(jié)炎維樣滑膜細胞(RA-FLS)中的表達水平。相對于FLS細胞,IGFBP2在RA-FLS中高表達。ure 3 Western blot assay was used to detect the expression level of IGFBP2 inoblast-like synoviosytes (FLS) and fibroblast-like synoviosytes from rheumatoidritis patients (RA-FLS). The expression level of IGFBP2 was high-expressed in-FLS cells compared with FLS cells.免疫熒光檢測 IGFBP2 在 RA-FLS 中表達分布為了進一步確認 IGFBP2 在類風濕關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細胞中表達,我們培養(yǎng)成纖維樣滑膜細胞(FLS)和類風濕性關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細胞-FLS),免疫熒光檢測 IGFBP2 蛋白在 RA-FLS 和 FLS 細胞中的表達分布情

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FBP2 在類風濕關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細胞中表達,主要分布在細-FLS 和 FLS 細胞,免疫熒光檢測 IGFBP2 蛋白在 RA-FLS 和情況。左側(cè)為細胞核 DAPI 著色,中間為 IGFBP2,右側(cè)為 M色,×200 倍)4 IGFBP2 was highly expressed in fibroblast-like synoviosoid arthritis patients (RA-FLS). We cultured RA-FLS and FLS cexpression level of IGFBP2 was detected by the immunofluorescesuperimposed images of IGFBP2 in green and nuclei (DAPInofluorescence staining, ×200)-PCR 檢測 IGFBP2 敲低后 mRNA 表達

【參考文獻】:
期刊論文
[1]Expression of insulin-like growth factor binding protein-2 in gastric carcinoma and its relationship with cell proliferation[J]. Liang-Hui Shi, Guo-Hai Zhao, Ya-Bin Xia, Yi-Sheng Zhang, Department of Surgery, Affiliated Yijishan Hospital, Wannan Medical College, Wuhu 241001, Anhui Province, China Xiao-Qun Zhu, Department of Pathology, Wannan Medical College, Wuhu 241001, Anhui Province, China.  World Journal of Gastroenterology. 2006(39)



本文編號:2926848

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