氟中毒對小鼠精子ATP的影響及生成途徑分析
發(fā)布時(shí)間:2020-12-19 06:38
[目的]本論文通過研究氟對小鼠精子ATP的影響,以及對其生成途徑進(jìn)行深入的探討,從而為進(jìn)一步闡明氟的生殖毒性奠定理論基礎(chǔ),為實(shí)施科學(xué)診斷提供依據(jù)。[方法]8周齡雄性昆明小鼠120只,隨機(jī)分成4組,每組30只,即對照組、低氟組、中氟組、高氟組,對照組供給蒸餾水,染氟組分別供給含25、50、100mg/LNaF的蒸餾水。染氟期間記錄小鼠的飲水及采食量,動(dòng)態(tài)觀察小鼠的生長狀況及生長性能。染氟90天后取樣,同時(shí)建立線粒體有氧呼吸與無氧酵解模型檢測小鼠精子在不同呼吸途徑中所產(chǎn)生的ATP含量及精子活力,隨后根據(jù)結(jié)果顯示進(jìn)行相應(yīng)的基因分析,最后利用透射電子顯微鏡觀察不同組別小鼠精子的超微結(jié)構(gòu)。[結(jié)果]1.與對照組相比,90天氟化鈉暴露組小鼠精子活率和活力成下降趨勢,中氟組和高氟組差異極顯著;同時(shí)精子密度有所下降,且中氟組和高氟組差異顯著。各染氟組骨氟含量也顯著增加。體重增加量在第四周和第五周高氟組(100mg/LNaF)顯著上升,然而在第十周,低氟組(25mg/LNaF)顯著下降。2.利用全波長多功能酶標(biāo)儀檢測不同模型下精子的ATP產(chǎn)量,結(jié)果發(fā)現(xiàn)精子所產(chǎn)生的總ATP含量成下降趨勢,并且高氟組與中氟組...
【文章來源】:山西農(nóng)業(yè)大學(xué)山西省
【文章頁數(shù)】:53 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
前言
第一章 氟中毒小鼠模型的建立
1 材料與方法
1.1 試驗(yàn)材料
1.2 試驗(yàn)方法
1.3 統(tǒng)計(jì)方法
2 試驗(yàn)結(jié)果
2.1 試驗(yàn)小鼠生長發(fā)育狀況的觀察及小鼠日均攝氟量的檢測
2.2 氟化鈉對試驗(yàn)小鼠生長性能的影響
2.3 小鼠骨骼中氟的含量
2.4 氟化鈉對試驗(yàn)小鼠牙齒的影響
3 討論
3.1 試驗(yàn)小鼠生長發(fā)育狀況及日均攝氟量
3.2 氟化鈉對試驗(yàn)小鼠生長性能的影響
3.3 試驗(yàn)小鼠骨骼中的氟含量
3.4 氟化鈉對試驗(yàn)小鼠牙齒的影響
3.5 動(dòng)物模型的建立
4. 本章小結(jié)
第二章 氟中毒對小鼠精子ATP的影響
1 材料與方法
1.1 試驗(yàn)材料
1.2 試驗(yàn)方法
1.3 統(tǒng)計(jì)方法
2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.1 小鼠精液品質(zhì)的鑒定
2.2 小鼠精子在不同呼吸模型下ATP的含量
2.2.1 小鼠精子總ATP的含量
2.2.2 小鼠精子在線粒體有氧呼吸模型下ATP的含量
2.2.3 小鼠精子在無氧酵解模型下ATP的含量
2.3 氟對小鼠精子在不同呼吸模型下的活力的影響
2.3.1 小鼠精子的活力
2.3.2 小鼠精子在線粒體有氧呼吸模型下的活力
2.3.3 小鼠精子在無氧酵解模型下的活力
3 討論
3.1 氟對小鼠精子品質(zhì)的影響
3.2 小鼠精子ATP不同生成途徑模型的建立
3.3 氟對不同呼吸模型下小鼠精子ATP產(chǎn)量及活力的影響
4 本章小結(jié)
第三章 氟中毒小鼠精子ATP生成途徑分析
1 材料與方法
1.1 試驗(yàn)材料
1.2 試驗(yàn)方法
1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
2 試驗(yàn)結(jié)果
2.1 氟對小鼠精子有氧呼吸關(guān)鍵分子mRNA表達(dá)的影響
2.1.1 精子總RNA純度的檢測
2.1.2 建立標(biāo)準(zhǔn)曲線
2.1.3 試驗(yàn)?zāi)康幕蚺c內(nèi)參基因的RT-PCR擴(kuò)增動(dòng)力學(xué)曲線和熔解曲線
2.1.4 目的基因擴(kuò)增產(chǎn)物的鑒定
2.1.5 小鼠精子線粒體有氧呼吸關(guān)鍵基因定量分析結(jié)果
2.2 試驗(yàn)雄性小鼠精子超微結(jié)構(gòu)結(jié)果
3 分析與討論
3.1 精子總RNA的提取
3.2 氟對小鼠精子線粒體有氧呼吸關(guān)鍵基因的影響
3.3 氟化物對小鼠精子超微結(jié)構(gòu)的影響
4 本章小結(jié)
全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
Abstract
致謝
本文編號:2925448
【文章來源】:山西農(nóng)業(yè)大學(xué)山西省
【文章頁數(shù)】:53 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
前言
第一章 氟中毒小鼠模型的建立
1 材料與方法
1.1 試驗(yàn)材料
1.2 試驗(yàn)方法
1.3 統(tǒng)計(jì)方法
2 試驗(yàn)結(jié)果
2.1 試驗(yàn)小鼠生長發(fā)育狀況的觀察及小鼠日均攝氟量的檢測
2.2 氟化鈉對試驗(yàn)小鼠生長性能的影響
2.3 小鼠骨骼中氟的含量
2.4 氟化鈉對試驗(yàn)小鼠牙齒的影響
3 討論
3.1 試驗(yàn)小鼠生長發(fā)育狀況及日均攝氟量
3.2 氟化鈉對試驗(yàn)小鼠生長性能的影響
3.3 試驗(yàn)小鼠骨骼中的氟含量
3.4 氟化鈉對試驗(yàn)小鼠牙齒的影響
3.5 動(dòng)物模型的建立
4. 本章小結(jié)
第二章 氟中毒對小鼠精子ATP的影響
1 材料與方法
1.1 試驗(yàn)材料
1.2 試驗(yàn)方法
1.3 統(tǒng)計(jì)方法
2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.1 小鼠精液品質(zhì)的鑒定
2.2 小鼠精子在不同呼吸模型下ATP的含量
2.2.1 小鼠精子總ATP的含量
2.2.2 小鼠精子在線粒體有氧呼吸模型下ATP的含量
2.2.3 小鼠精子在無氧酵解模型下ATP的含量
2.3 氟對小鼠精子在不同呼吸模型下的活力的影響
2.3.1 小鼠精子的活力
2.3.2 小鼠精子在線粒體有氧呼吸模型下的活力
2.3.3 小鼠精子在無氧酵解模型下的活力
3 討論
3.1 氟對小鼠精子品質(zhì)的影響
3.2 小鼠精子ATP不同生成途徑模型的建立
3.3 氟對不同呼吸模型下小鼠精子ATP產(chǎn)量及活力的影響
4 本章小結(jié)
第三章 氟中毒小鼠精子ATP生成途徑分析
1 材料與方法
1.1 試驗(yàn)材料
1.2 試驗(yàn)方法
1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
2 試驗(yàn)結(jié)果
2.1 氟對小鼠精子有氧呼吸關(guān)鍵分子mRNA表達(dá)的影響
2.1.1 精子總RNA純度的檢測
2.1.2 建立標(biāo)準(zhǔn)曲線
2.1.3 試驗(yàn)?zāi)康幕蚺c內(nèi)參基因的RT-PCR擴(kuò)增動(dòng)力學(xué)曲線和熔解曲線
2.1.4 目的基因擴(kuò)增產(chǎn)物的鑒定
2.1.5 小鼠精子線粒體有氧呼吸關(guān)鍵基因定量分析結(jié)果
2.2 試驗(yàn)雄性小鼠精子超微結(jié)構(gòu)結(jié)果
3 分析與討論
3.1 精子總RNA的提取
3.2 氟對小鼠精子線粒體有氧呼吸關(guān)鍵基因的影響
3.3 氟化物對小鼠精子超微結(jié)構(gòu)的影響
4 本章小結(jié)
全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
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致謝
本文編號:2925448
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