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氟中毒對(duì)小鼠精子ATP的影響及生成途徑分析

發(fā)布時(shí)間:2020-12-19 06:38
  [目的]本論文通過(guò)研究氟對(duì)小鼠精子ATP的影響,以及對(duì)其生成途徑進(jìn)行深入的探討,從而為進(jìn)一步闡明氟的生殖毒性奠定理論基礎(chǔ),為實(shí)施科學(xué)診斷提供依據(jù)。[方法]8周齡雄性昆明小鼠120只,隨機(jī)分成4組,每組30只,即對(duì)照組、低氟組、中氟組、高氟組,對(duì)照組供給蒸餾水,染氟組分別供給含25、50、100mg/LNaF的蒸餾水。染氟期間記錄小鼠的飲水及采食量,動(dòng)態(tài)觀察小鼠的生長(zhǎng)狀況及生長(zhǎng)性能。染氟90天后取樣,同時(shí)建立線粒體有氧呼吸與無(wú)氧酵解模型檢測(cè)小鼠精子在不同呼吸途徑中所產(chǎn)生的ATP含量及精子活力,隨后根據(jù)結(jié)果顯示進(jìn)行相應(yīng)的基因分析,最后利用透射電子顯微鏡觀察不同組別小鼠精子的超微結(jié)構(gòu)。[結(jié)果]1.與對(duì)照組相比,90天氟化鈉暴露組小鼠精子活率和活力成下降趨勢(shì),中氟組和高氟組差異極顯著;同時(shí)精子密度有所下降,且中氟組和高氟組差異顯著。各染氟組骨氟含量也顯著增加。體重增加量在第四周和第五周高氟組(100mg/LNaF)顯著上升,然而在第十周,低氟組(25mg/LNaF)顯著下降。2.利用全波長(zhǎng)多功能酶標(biāo)儀檢測(cè)不同模型下精子的ATP產(chǎn)量,結(jié)果發(fā)現(xiàn)精子所產(chǎn)生的總ATP含量成下降趨勢(shì),并且高氟組與中氟組... 

【文章來(lái)源】:山西農(nóng)業(yè)大學(xué)山西省

【文章頁(yè)數(shù)】:53 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
前言
第一章 氟中毒小鼠模型的建立
    1 材料與方法
        1.1 試驗(yàn)材料
        1.2 試驗(yàn)方法
        1.3 統(tǒng)計(jì)方法
    2 試驗(yàn)結(jié)果
        2.1 試驗(yàn)小鼠生長(zhǎng)發(fā)育狀況的觀察及小鼠日均攝氟量的檢測(cè)
        2.2 氟化鈉對(duì)試驗(yàn)小鼠生長(zhǎng)性能的影響
        2.3 小鼠骨骼中氟的含量
        2.4 氟化鈉對(duì)試驗(yàn)小鼠牙齒的影響
    3 討論
        3.1 試驗(yàn)小鼠生長(zhǎng)發(fā)育狀況及日均攝氟量
        3.2 氟化鈉對(duì)試驗(yàn)小鼠生長(zhǎng)性能的影響
        3.3 試驗(yàn)小鼠骨骼中的氟含量
        3.4 氟化鈉對(duì)試驗(yàn)小鼠牙齒的影響
        3.5 動(dòng)物模型的建立
    4. 本章小結(jié)
第二章 氟中毒對(duì)小鼠精子ATP的影響
    1 材料與方法
        1.1 試驗(yàn)材料
        1.2 試驗(yàn)方法
        1.3 統(tǒng)計(jì)方法
    2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.1 小鼠精液品質(zhì)的鑒定
        2.2 小鼠精子在不同呼吸模型下ATP的含量
            2.2.1 小鼠精子總ATP的含量
            2.2.2 小鼠精子在線粒體有氧呼吸模型下ATP的含量
            2.2.3 小鼠精子在無(wú)氧酵解模型下ATP的含量
        2.3 氟對(duì)小鼠精子在不同呼吸模型下的活力的影響
            2.3.1 小鼠精子的活力
            2.3.2 小鼠精子在線粒體有氧呼吸模型下的活力
            2.3.3 小鼠精子在無(wú)氧酵解模型下的活力
    3 討論
        3.1 氟對(duì)小鼠精子品質(zhì)的影響
        3.2 小鼠精子ATP不同生成途徑模型的建立
        3.3 氟對(duì)不同呼吸模型下小鼠精子ATP產(chǎn)量及活力的影響
    4 本章小結(jié)
第三章 氟中毒小鼠精子ATP生成途徑分析
    1 材料與方法
        1.1 試驗(yàn)材料
        1.2 試驗(yàn)方法
        1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
    2 試驗(yàn)結(jié)果
        2.1 氟對(duì)小鼠精子有氧呼吸關(guān)鍵分子mRNA表達(dá)的影響
            2.1.1 精子總RNA純度的檢測(cè)
            2.1.2 建立標(biāo)準(zhǔn)曲線
            2.1.3 試驗(yàn)?zāi)康幕蚺c內(nèi)參基因的RT-PCR擴(kuò)增動(dòng)力學(xué)曲線和熔解曲線
            2.1.4 目的基因擴(kuò)增產(chǎn)物的鑒定
            2.1.5 小鼠精子線粒體有氧呼吸關(guān)鍵基因定量分析結(jié)果
        2.2 試驗(yàn)雄性小鼠精子超微結(jié)構(gòu)結(jié)果
    3 分析與討論
        3.1 精子總RNA的提取
        3.2 氟對(duì)小鼠精子線粒體有氧呼吸關(guān)鍵基因的影響
        3.3 氟化物對(duì)小鼠精子超微結(jié)構(gòu)的影響
    4 本章小結(jié)
全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
Abstract
致謝



本文編號(hào):2925448

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