發(fā)布時(shí)間：2020-12-13 08:06

　　目的Betatrophin是一種新發(fā)現(xiàn)的主要在肝臟及脂肪組織中表達(dá)的分泌蛋白,近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)其可能與糖脂代謝相關(guān)。本研究首次觀察了Betatrophin對(duì)db/db小鼠血脂、血糖的作用,并分析了其對(duì)糖脂代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響。方法本研究選用2型糖尿病C57BL/Ksjdb/db（db/db）小鼠為動(dòng)物模型。將8周齡健康SPF級(jí)別的db/db小鼠隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,通過(guò)小鼠尾靜脈水動(dòng)力注射方法將空載腺病毒與Betatrophin過(guò)表達(dá)腺病毒注射于小鼠體內(nèi),連續(xù)觀察8天。在第8天,通過(guò)檢測(cè)血清三酰甘油、膽固醇和低密度脂蛋白等指標(biāo)評(píng)估其對(duì)脂代謝的影響;在第4、6天,分別通過(guò)葡萄糖耐量試驗(yàn)和胰島素釋放試驗(yàn)等方法觀察其對(duì)血糖、胰島素敏感性的影響;利用Realtime PCR等實(shí)驗(yàn)方法觀察其對(duì)磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（PEPCK）、葡萄糖-6-磷酸酶（G6Pase）、脂肪甘油三酯脂肪酶（ATGL）和血管生成素樣蛋白3（ANGPTL3）等糖脂代謝相關(guān)因子基因表達(dá)的影響。結(jié)果（1）用構(gòu)建并擴(kuò)增的Betatrophin過(guò)表達(dá)腺病毒與空載腺病毒感染肝臟原代細(xì)胞,結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組Betatrophin的mR... 

【文章來(lái)源】：江蘇大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】：75 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

綠色熒光蛋白PCR鑒定結(jié)果

將產(chǎn)物進(jìn)行基因檢測(cè)，并將結(jié)果于 pubmed 網(wǎng)站進(jìn)行基因比對(duì)。結(jié)果顯示無(wú)是正向比對(duì)還是反向比對(duì)，基因比對(duì)結(jié)果均相互吻合。驗(yàn)證了本課題組分子克庫(kù)的腺病毒的確是 Betatrophin 過(guò)表達(dá)腺病毒且具有有效性。比對(duì)結(jié)果如圖 2.3。

轉(zhuǎn)染結(jié)果如圖 2.4 所示。在白光鏡頭下可見(jiàn)細(xì)胞形態(tài)正常且分布均勻明細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好。在熒光鏡頭下可見(jiàn)綠色熒光蛋白在細(xì)胞中的表達(dá)。將兩重合后，可以判斷感染效率高于 90%，如圖 2.4。


本文編號(hào)：2914217