目的:通過構(gòu)建L6細(xì)胞胰島素抵抗模型,上調(diào)內(nèi)臟脂肪素（visfatin）表達(dá)并檢測磷脂酰肌醇3-激酶（Phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K）/蛋白激酶B（Protein kinase B,Akt）通路及其下游信號因子叉頭框蛋白1（Forkhead box O1,Fox O1）的蛋白表達(dá)變化,從而探討visfatin對骨骼肌胰島素抵抗的影響。方法:通過建立DMEM培養(yǎng)液和高濃度磷脂酸（Phosphatidic acid,PA）誘導(dǎo)L6細(xì)胞胰島素抵抗模型:將細(xì)胞分為control組、PA組、insulin組、PA+insulin組,PA組板加入250μM PA;insulin組加入100n M insulin,PA+insulin組加入250μM PA+100 n M insulin,待處理0h、6h、12h、24h后收集各組培養(yǎng)基上清。用免疫熒光試驗(yàn)方法驗(yàn)證L6細(xì)胞株分化成功;用葡萄糖過氧化物酶法測定細(xì)胞培養(yǎng)基上清液的葡萄糖含量驗(yàn)證胰島素抵抗模型成立;給予胰島素抵抗骨骼肌細(xì)胞模型visfatin過表達(dá)腺病毒載體,用Western blot法檢測L6細(xì)胞中v... 

【文章來源】：遵義醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁數(shù)】：42 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中英縮略詞對照表
中文摘要
英文摘要
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]原代培養(yǎng)骨骼肌細(xì)胞胰島素抵抗模型的建立[J]. 穆穎,季愛玲,劉寒強(qiáng),許朝暉,王楓.  現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2008(03)



本文編號：2896901