目的:應用高糖高脂膳食聯(lián)合(腹腔)注射鏈脲佐菌素(streptozotocin,STZ)建立2型糖尿病大鼠模型,并在模型建立過程中加入中等強度運動干預,探討其對糖尿病發(fā)生過程中肝損傷情況的影響。方法:30只SPF級六周齡雄性SD健康大鼠在適應性飼養(yǎng)一周后,將30只大鼠隨機分為3組,每組10只:A組(正常對照組);B組(糖尿病對照組);C組(中等強度運動組)。A組作為對照組普通膳食喂養(yǎng),B、C組大鼠在高糖高脂膳食飼養(yǎng)8周后一次性小劑量STZ(30mg/kg)腹腔注射。其中A、B組大鼠在籠中自由活動,不施加額外運動干預。C組在高糖高脂膳食飼養(yǎng)同時施加中等強度跑臺訓練。在注射STZ第7天處死動物,取肝臟組織,HE及Masson染色進行形態(tài)學觀察,并通過免疫組化法觀察α-SMA在各組大鼠肝組織中的表達。同時眼眶采血檢測血清ⅣV型膠原濃度。結(jié)果:1.B組大鼠出現(xiàn)多飲、多食、多尿,精神不振、毛色暗淡等現(xiàn)象,STZ注射后第7天取大鼠尾靜脈血,測隨機血糖,血糖在16.7mmol/L以上,提示糖尿病大鼠模型成功。2.肝細胞形態(tài)學改變:2)200×光鏡下HE染色觀察到:A組肝組織,肝小葉結(jié)構(gòu)清晰,肝板明顯,細胞核呈圓形,大小均勻,核膜完整,核仁清晰,肝索呈放射狀規(guī)則排列,無空泡變性,肝血竇大小正常,匯管區(qū)膽小管無增生情況;B組肝組織,肝小葉結(jié)構(gòu)紊亂,邊界不清晰,可見大量脂肪空泡,肝細胞出現(xiàn)水樣變性,細胞結(jié)構(gòu)消失,細胞核固縮;肝血竇擴張,肝臟淤血,匯管區(qū)膽小管發(fā)生明顯增生;C組肝組織,肝小葉結(jié)構(gòu)尚且清晰,肝細胞索狀結(jié)構(gòu)排列尚清晰,可見肝板,無明顯脂肪空泡,肝血竇狹窄,匯管區(qū)膽小管發(fā)生輕微增生。2)200×光鏡下Masson染色可觀察到:A組肝小葉結(jié)構(gòu)正常,未見明顯藍染纖維;B組肝組織出現(xiàn)脂肪空泡,肝小葉結(jié)構(gòu)嚴重破壞,并可見匯管區(qū)明顯藍染膠原纖維,肝細胞間可見輕度藍染膠原纖維;C組肝小葉結(jié)構(gòu)比較正常,未見明顯脂肪空泡,肝細胞出現(xiàn)水腫增大,肝細胞間隙未見明顯藍染膠原纖維。3.免疫組化法觀察α-SMA在各組大鼠肝組織中的表達,光鏡下觀察A組肝組織α-SMA蛋白免疫組織化學染色陽性多表達于小動脈及小靜脈,在膽管表達較少;B組肝組織α-SMA蛋白免疫組織化學染色陽性主要表達于匯管區(qū)及纖維間隔;C組肝組織α-SMA蛋白免疫組織化學染色陽性在匯管區(qū)表達較少。圖片分析軟件測得累計光密度值(IOD)結(jié)果顯示,B組、C組α-SMA的表達量較A組有明顯增多(p0.05);而C組α-SMA的表達量較B組有明顯減少(p0.05)。4.糖尿病對照組大鼠的肝臟出現(xiàn)了早期纖維化,其Ⅳ型膠原增高。A組大鼠Ⅳ型膠原濃度為3.45±2.26ng/ml,B組的糖尿病大鼠Ⅳ型膠原濃度為7.53±2.02ng/ml,P0.05有統(tǒng)計學意義。但C組大鼠Ⅳ型膠原濃度為4.27±3.46ng/ml,明顯低于B組,P0.05有統(tǒng)計學意義。表明運功干預可以減輕糖尿病形成過程中大鼠肝臟早期纖維化。結(jié)論:1.中等強度運動干預可以保護高糖高脂膳食聯(lián)合注射STZ誘導的糖尿病大鼠肝臟組織形態(tài)結(jié)構(gòu),減少大鼠肝臟組織脂肪空泡的形成,有效改善肝細胞水樣變性及肝血竇擴張。2.中等強度運動干預可以降低高糖高脂膳食聯(lián)合注射STZ誘導的糖尿病大鼠肝臟組織匯管區(qū)α-SMA的表達,降低肝星狀細胞激活,從而減輕肝臟纖維化。3.中等強度運動干預可以降低高糖高脂膳食聯(lián)合注射STZ誘導的糖尿病大鼠肝臟組織匯管區(qū)及肝細胞間膠原纖維的增生,同時可以降低其血清ⅣV型膠原濃度,從而減輕肝臟纖維化。
【學位單位】:武漢體育學院
【學位級別】:碩士
【學位年份】:2018
【中圖分類】:R587.1
【參考文獻】
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本文編號:
2822790
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