【摘要】：為獲得純度較高的葡萄球菌核酸酶(SNase)以研究其與糖尿病的關(guān)系,構(gòu)建基因工程表達(dá)菌E.coli BL21/p ET28aHis-SNase,誘導(dǎo)其表達(dá)可溶性胞外蛋白,并對純化的SNase進(jìn)行初步性質(zhì)研究。采用分子生物學(xué)方法設(shè)計和構(gòu)建含有SNase基因的表達(dá)載體pET28a-His-SNase,再轉(zhuǎn)入E.coli BL21(DE3)感受態(tài)細(xì)胞。經(jīng)過乳糖誘導(dǎo)表達(dá)、超聲破碎及鎳柱親和色譜等純化步驟后,以SDS-PAGE和Western blot鑒定His-SNase,并對其性質(zhì)進(jìn)行了初步研究。結(jié)果表明,乳糖誘導(dǎo)后HisSNase能高效表達(dá),親和色譜后純度高達(dá)85%以上,且其具備較高的核酸酶活性,作用pH范圍較廣,有很好的耐熱性。本研究為進(jìn)一步探究葡萄球菌核酸酶與糖尿病的關(guān)系奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 中國藥科大學(xué)微基因藥學(xué)實驗室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(No.81673340,No.31270985) 江蘇省基礎(chǔ)研究計劃資助項目(No.BK20161462)~~
【分類號】：R587.1
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本文編號：2542477