【摘要】：硫氧還蛋白相互作用蛋白(thioredoxin interacting protein,TXNIP)是內(nèi)源性硫氧還蛋白結(jié)合抑制蛋白,在糖尿病患者血清和組織中均高表達(dá)。本研究觀察TXNIP過表達(dá)對正常糖脂濃度下培養(yǎng)的INS-1細(xì)胞自噬水平的影響,并分析自噬在TXNIP誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡中的作用。常規(guī)培養(yǎng)的INS-1胰島細(xì)胞分為正常培養(yǎng)組、空病毒(Ad-eGFP)組和TXNIP過表達(dá)(Ad-TXNIP-eGFP)組,后兩組轉(zhuǎn)染相應(yīng)腺病毒,48 h后測定TXNIP mRNA和蛋白的表達(dá)情況;用Western blot檢測各組自噬相關(guān)的Beclin-1、LC3和P62的蛋白表達(dá)情況,以cleaved caspase 3/caspase 3比值和流式細(xì)胞術(shù)檢測各組細(xì)胞凋亡情況;用IF/ICC法檢測各組細(xì)胞內(nèi)自噬體數(shù)量的變化。結(jié)果顯示,與Ad-eGFP組相比,Ad-TXNIP-eGFP組TXNIP mRNA和蛋白表達(dá)量均明顯升高;與Ad-eGFP組相比,Ad-TXNIP-eGFP組LC3-II/LC3-I比值和Beclin-1蛋白表達(dá)水平升高,P62蛋白表達(dá)降低,自噬體熒光強(qiáng)度增強(qiáng),細(xì)胞凋亡率升高,cleaved caspase 3/caspase 3比值上升。使用自噬抑制劑3-MA干預(yù)后,與TXNIP過表達(dá)組相比,TXNIP過表達(dá)+3-MA組自噬明顯受到抑制,同時凋亡明顯減輕。以上結(jié)果提示,在正常糖脂濃度培養(yǎng)下的INS-1細(xì)胞過表達(dá)TXNIP可以通過誘導(dǎo)自噬促進(jìn)細(xì)胞凋亡。
【作者單位】： 山西醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)系;
【基金】：supported by the National Natural Science Foundation of China(No.30800399) Key Laboratory Construction Project of Shanxi Province,China(No.2014011049-12) Science and Technology Foundation of Shanxi Medical University,Shanxi Province,China(No.01201406)
【分類號】：R587.1

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本文編號：2542269