【摘要】：研究背景肥胖癥是遺傳因素和環(huán)境因素共同作用導致一種復雜性的代謝性疾病。根據(jù)美國ATPⅢ標準,可將肥胖癥分為兩個類型,即代謝異常肥胖(MUHO)和代謝正常肥胖(MUO),由于這兩組在病理生理以及治療上各具獨特性,因此近年來,對其遺傳機制的研究也受到肥胖癥研究學者的高度關(guān)注。近年來,全基因組關(guān)聯(lián)研究(Genome Wide Association study,GWAs)用于探討復雜疾病的遺傳機制,目前為止,包括黑素皮質(zhì)素受體-4(melanocortin-4 receptor, M C4R)在內(nèi)已有數(shù)百個肥胖相關(guān)基因被發(fā)現(xiàn)。除GWAS研究外,脂肪因子對應(yīng)基因與肥胖關(guān)系的研究也越來越重要,脂肪因子是由脂肪組織分泌的特異蛋白,是肥胖的重要指標,各個肥胖類型具有各自的脂肪因子水平。其中,脂肪因子glypican-4,由GPC4基因編碼,能夠通過直接與胰島素受體結(jié)合,發(fā)揮類似胰島素的作用,促進葡萄糖的攝取和前脂肪細胞的分化；脂肪因子irisin,由肌肉和脂肪組織分泌,Ⅲ型纖連蛋白結(jié)構(gòu)域5(FNDC5)基因編碼,可使白色脂肪棕色化,改善機體的糖耐量和增加能量消耗。研究目的本研究依托國家臨床重點�？平ㄔO(shè)項目和國家自然基金中項目,分析脂肪因子編碼基因FNDC5、GPC4和GWAs來源的MC4R、GNPDA2的單核苷酸多態(tài)性(SNP)與中國北方漢族人群肥胖的相關(guān)性,探究SNPs位點等位基因頻率、基因型頻率等與各亞型肥胖及其相關(guān)代謝指標的關(guān)系。實驗方法研究對象為1100例18-83歲的北方地區(qū)漢族人群,采用“病例-對照”的研究方法。肥胖組入選標準根據(jù)WHO對肥胖癥和體重正常人群的BMI標準,代謝異常入選標準根據(jù)美國ATP III標準,對照納入標準為同性別、同年齡匹配原則。建立代謝異常肥胖癥組(MUHO) (BMI≥30 kg/m2且ATP Ⅲ≥2)、代謝正常肥胖癥組(MHO)(BMI≥30 kg/m22且ATP Ⅲ≤1)、代謝異常正常體重組(MUNO)(BMI≤25 kg／m2且ATP Ⅲ≥2)和代謝正常體重正常組(MHNO)(BMI≤25 kg／m2且ATP Ⅲ≤1)四組研究人群,收集其臨床資料和生化指標。本實驗的SNP位點主要選擇標簽SNP,功能區(qū)SNPs位點,文獻驗證過的SNPs位點,再綜合該位點在中國北方漢族人群中等位基因頻率等進行篩選。最終選取FNDC5,MC4R、GPC4、GNPDA2基因的16個SNPs位點,MC4R基因選取rs2331841、rs656710、rs17782313、rs571312、rs12970134、rs11872992六個位點,FNDC5基因選取rsl6835198、rsl746661 rs3480三個位點,GPC4基因選取rs1129880、rs3761628、rs2073288、rs7059265四個位點,GNPDA2基因選取rs10938397、rs2101620、rs186117327三個位點,并利用基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜技術(shù)進行基因分型,均分型成功。實驗結(jié)果MC4R基因“病例-對照”關(guān)聯(lián)分析(1)在肥胖與體重正常組間比較,rs2331841基因型AA/AG/GG在兩間分布有差異(P=0.032), rs2331841以小頻率等位基因A的隱性遺傳模型(AA:GG+AG),攜帶AA型的人易患肥胖(P=0.039),二元logistic模型發(fā)現(xiàn)攜帶AA型的人患肥胖的風險是GG型的1.28倍,該位點解釋了0.9%的肥胖癥病因。rs17782313、rs571312、rs12970134、rs6567160、rs233184位點在三個基因型間舒張壓有差異(p=0.02,p=0.01,p=0.03,p=0.01,p=0.02)。將MC4R基因四個位點連鎖不平衡分析發(fā)現(xiàn),rs2331841、rs6567160、rs571312、rs17782313位點間存在連鎖不平衡,GTCT是最常見的遺傳方式,但此連鎖不平衡在肥胖癥組和體重正常組中頻率無差異(P=0.14)。(2)在肥胖與代謝正常體重正常組間比較,rs2331841小頻率等位基因頻率在肥胖組中較高(P=0.034)。(3)代謝異常肥胖組和代謝正常體重正常比較,rs2331841、rs656710、rs17782313、rs571312小頻率等位基因頻率在代謝異常肥胖組中較高(P=0.005,P=0.001,P=0.015,P=O.013)。rs2331841、rs656710、rs17782313、rs571312、rs12970134基因型頻率在兩間分布有差異(P=0.008,P=0.026,P=0.03,P=0.041,p=O.048)。以小頻率等位基因的顯性遺傳模型,rs2331841、rs656710、rs17782313、rs571312攜帶顯性基因型的人易患代謝異常肥胖(p=0.019,P=0.028,P=0.039,P=0.029)。以小頻率等位基因的隱性遺傳模型,rs2331841、rs656710攜帶隱性基因型的人易患代謝異常肥胖(p=0.017,P=0.049)(4)在代謝異常肥胖組與代謝正常肥胖組間比較,rs2331841小頻率等位基因A頻率代謝異常肥胖組中較高(P=0.039)。rs2331841、rs17782313、rs12970134基因型頻率在兩間分布有差異(P=0.017,p=0.027,p=0.044)。FNDC5基因“病例-對照”關(guān)聯(lián)分析,rsl6835198基因型頻率在代謝異常肥胖組和代謝正常體重正常組分布有差異(0.30/0.54/0.17 vs 0.32/0.46/0.26,OR=1.27,95% CI 1.00-1.61,p=0.050)；以大頻率等位基因的隱性遺傳模型(TT：TG+GG)計算基因型的組間差異發(fā)現(xiàn),隱性遺傳模型在代謝異常肥胖組和代謝正常體重正常組及肥胖癥與代謝正常體重正常組間比較有統(tǒng)計意義(p=0.0083,p=0.016)；在代謝異常肥胖組與代謝正常肥胖組間比較,rsl6835198大頻率等位基因頻率在代謝異常肥胖組中較高(p=0.047)。在代謝異常肥胖組與代謝正常肥胖組間比較,rs1746661小頻率等位基因頻率在代謝異常肥胖中較高(p=0.048)。進一步分析SNPs位點不同基因型間肥胖癥相關(guān)指標的組間差異,rs1746661位點在三個基因型間收縮壓及舒張壓有差異(p=0.02,p=0.05);rsl6835198位點在三個基因型間BMI、體重的有差異(p=0.00,p=0.02)。將FNDC5基因三個位點連鎖不平衡分析分析發(fā)現(xiàn),rsl6835198,rs3480和rs1746661位點間存在連鎖不平衡,TAG是最常見的遺傳方式,此連鎖不平衡在肥胖癥組和體重正常組中頻率存在差異(P=0.05)。GPC4基因“病例-對照”關(guān)聯(lián)分析,rs7059265基因型頻率在肥胖組和代謝正常體重正常組間比較有統(tǒng)計學差異(0.61/0.39/0.0 vs 0.59/0.41/0.0,OR=1.72,95%CI 1.00-2.94,p=0.049)。rs1129880、rs3761628、rs2073288、rs7059265位點(GPC4)三個基因型間SBP、DBP、TG、HDL、UA、BUN、體重具有統(tǒng)計學差異。另外,glypican 4血清學水平在肥胖和體重正常兩組間比較表明,肥胖組glypican 4水平明顯升高(p=0.007)。結(jié)論(1)MC4R基因的rs2331841等位基因A為肥胖癥危險因素,攜帶AA型的人患肥胖的風險增加,攜帶等位基因A更易患代謝異常肥胖。(2)MC4R基因的rs656710、rs17782313、rs571312、rs12970134攜帶小頻率等位基因的人群更易患代謝異常肥胖。(3)rs16835198(FNDC5),rs7059265(GPC4)大頻率等位基因為肥胖癥危險因素。
[Abstract]:Background of the study obesity is a complex metabolic disease that has a common role in both genetic and environmental factors. According to the American ATP III standard, the obesity can be divided into two types, namely, metabolic abnormal obesity (MUHO) and metabolic normal obesity (MUO), because the two groups are unique in the pathophysiology and the treatment, so in recent years, The study of its genetic mechanism is also highly concerned by the study of obesity. In recent years, the Genome Wide Association study (GWAs) has been used to explore the genetic mechanism of complex diseases, so far, hundreds of obesity-related genes, including melanocortin-4 receptor (M-C4R), have been found. In addition to the GWAS study, the study of the relationship between the fat factor and the obesity is becoming more and more important, and the fat factor is the specific protein secreted by the adipose tissue, is an important index of obesity, and each type of obesity has a respective level of fat factor. wherein the fat factor glypan-4 is encoded by the GPC4 gene, can play the role of similar insulin by directly combining with the insulin receptor, promotes the uptake of glucose and the differentiation of the pre-adipocytes, and the fat factor irisin is secreted by the muscle and the adipose tissue, The encoding of the type 鈪，

本文編號：2478119