【摘要】：背景強直性脊柱炎(Ankylosing spondylitis, AS)是一種血清陰性的脊柱關(guān)節(jié)病,其主要的臨床表現(xiàn)包括炎癥性背部疼痛,早期發(fā)生在骶髂關(guān)節(jié),逐漸進展累及中軸關(guān)節(jié)、四肢大關(guān)節(jié)(下肢為主),出現(xiàn)肌腱附著點炎,最終導(dǎo)致關(guān)節(jié)強直,以及其他器官受累(包括前葡萄膜炎,銀屑病,慢性炎癥性腸病)。流行病學(xué)研究顯示,在中國大陸強直性脊柱炎的患病率在約為0.11-0.37%。在AS人群中,超過20%的患者存在髖關(guān)節(jié)受累,其中47-90%的患者累及雙髖。與其他風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis,RA)不同之處在于,AS的自然病程分為兩個重要階段：炎性破壞、新骨形成。晚期的AS患者常伴有不可逆的關(guān)節(jié)強直、畸形,從而對生活、工作產(chǎn)生巨大的影響。因此,研究AS疾病發(fā)生、發(fā)展過程中的機制,對于AS的早期診斷、治療具有重要的意義。AS的治療包括物理治療、藥物治療、手術(shù)治療等。對于AS的藥物治療主要作用在于抑制炎癥的癥狀,但是相關(guān)研究證實炎癥的控制并不能延緩骨化的進展。而對于AS患者骨化發(fā)展至關(guān)節(jié)強直后,手術(shù)治療是唯一有效的手段。因此,AS成骨功能異常相關(guān)機制的研究,對于AS發(fā)病機制的明確,AS有效的治療都具有極其重要的意義。研究目的本課題通過選取AS患者和對照的髖關(guān)節(jié)韌帶標本,首先通過Affymetrix基因芯片篩選差異基因。對差異基因篩選結(jié)果,結(jié)合相關(guān)文獻進行分析,選取可能參與調(diào)節(jié)骨化的相關(guān)基因作為研究方向,通過韌帶組織mRNA、蛋白水平以及血漿水平進一步驗證基因的表達情況。并通過基因干擾人成骨肉瘤Saos2細胞,檢測Saos2細胞成骨相關(guān)指標的變化驗證目的基因?qū)τ诔晒亲饔玫挠绊�。最后結(jié)合AS資料庫病人相關(guān)的臨床資料,統(tǒng)計分析基因表達水平和疾病活動性、嚴重程度等指標的相關(guān)性。對該基因在AS成骨過程中的作用進行初步的探索。對于髖關(guān)節(jié)受累的AS患者,我們通過門診收集患者的一般資料及進行相關(guān)臨床評價,對患者髖關(guān)節(jié)受累的嚴重程度進行BASRI-hip分級,通過單因素的分析,并進行多因素的有序回歸分析,從而初步探討髖關(guān)節(jié)嚴重受累的AS患者的相關(guān)危險因素。研究方法我們通過選取3例AS患者、3例正常對照的髖關(guān)節(jié)韌帶標本進行基因芯片篩選,獲得了697個差異基因,其中311個基因表達上調(diào),386個基因表達下調(diào)。在上調(diào)基因中我們發(fā)現(xiàn)SLPI上調(diào)2.88倍(p0.05)。隨后通過對標本庫AS病人韌帶組織及血液標本隨機抽取進行RT-PCR、Western-blot、ELISA檢測,結(jié)果顯示SLPI在AS患者關(guān)節(jié)韌帶、血液中表達水平高于正常人群,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。Saos2細胞培養(yǎng)在接受SLPI干預(yù)后成骨相關(guān)指標(ALP、OCN)均顯著高于對照組。通過相關(guān)性分析,血漿SLPI水平和BASFI評分相關(guān)。門診收集256例髖關(guān)節(jié)不同程度受累的AS患者,通過Bath AS髖關(guān)節(jié)X線指數(shù),107名AS患者髖關(guān)節(jié)輕度受累,73名中度受累,76名重度受累。通過單因素的分析,多因素的回歸分析,結(jié)果顯示,發(fā)病年齡、診斷延誤時間、雙髖受累、骶髂關(guān)節(jié)炎評分、脊柱受累嚴重程度與髖關(guān)節(jié)受累的嚴重程度具有較強的相關(guān)性。結(jié)論綜上所述,本研究結(jié)果顯示：通過基因芯片可以看到多種基因在AS患者韌帶組織中異常表達,可能涉及炎癥、骨化相關(guān)多條信號通路的改變。SLPI在韌帶組織、血漿中均高表達。細胞實驗證明SLPI對于Saos2細胞的成骨有明顯的促進作用。SLPI同時與AS患者疾病嚴重程度(BASFI評分)指標相關(guān)。我們關(guān)于SLPI初步的實驗結(jié)果為AS發(fā)病機制的研究,早期的診斷、治療提供了初步的理論依據(jù)。對于AS患者,早期的診斷及干預(yù),對于預(yù)防髖關(guān)節(jié)發(fā)生嚴重病變以及強直具有重要的意義。
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【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R593.23

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 ;Inhibition of histamine release from human mast cells by natural chymase inhibitors[J];Acta Pharmacologica Sinica;2004年06期

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本文編號：2464005