【摘要】：目的選取阿克蘇碘缺乏病疫區(qū)居民主要攝食材料,配制碘缺乏飼料,復(fù)制碘缺乏大鼠模型,從整體、組織和分子生物學(xué)水平連續(xù)觀察不同碘缺乏水平對大鼠甲狀腺形態(tài)和功能的影響,為新疆碘缺乏病防治工作提供實驗依據(jù)。方法飼料配方參考國標GB14924.3-2010《實驗動物配合飼料營養(yǎng)成分》,其中主要糧谷原料(黃豆、玉米、小麥)來源于新疆阿克蘇碘缺乏地區(qū),同時添加動物必需維生素和礦物質(zhì),NI L Ⅰ、LⅡ平均碘含量分別為300μg/kg、50μg/kg、 20μg/kg。正常碘組飲用自來水、低碘組飲用去離子水。Wistar大鼠,斷乳后2周,隨機分為3組：正常碘組(NI)、低碘1組(LⅠ)、低碘2組(L Ⅱ),雌雄各半,其中NI為正常對照組,L Ⅰ、L Ⅱ為干預(yù)組。持續(xù)監(jiān)測記錄體重和進食量,喂養(yǎng)3、6、9月后收集尿液,處死大鼠,取血、分離血清、摘取甲狀腺、摘取其他臟器,從血清激素水平、尿碘、甲狀腺解剖學(xué)和組織學(xué)改變等方面對不同碘缺乏狀態(tài)下,甲狀腺功能與形態(tài)的變化進行了觀察。同時運用Western Blotting技術(shù)對甲狀腺激素合成相關(guān)基因—鈉碘轉(zhuǎn)運體(NIS)的蛋白表達變化情況進行深入分析。數(shù)據(jù)分析采用單因素方差、重復(fù)測量方差分析。結(jié)果1不同碘缺乏水平對Wistar大鼠基本情況的影響1.1體重干預(yù)結(jié)束時,除3個月干預(yù)雌鼠外,其他組間大鼠體重差值LⅠ、LⅡ體重變化與對照組NI相比差異存在統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01),但LⅠ、L Ⅱ間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。1.2進食量各干預(yù)組在不同干預(yù)時間點均存在進食量差異,除3個月雌鼠以外,其余各組處理和時間存在交互作用(P0.05),即進食量在不同組間的不同時間變化趨勢不同,低碘組進食量低于正常組(P0.01)2不同碘缺乏水平對大鼠血常規(guī)和血生化的影響2.1 血常規(guī)血常規(guī)指標顯示,紅細胞相關(guān)指標,干預(yù)3個月時,低碘組紅細胞(RBC)、血紅蛋白(HGB)、紅細胞壓積(HCT)高于正常組(P0.05),干預(yù)6個月時低碘組上述指標低于正常組(P0.05)；進入干預(yù)9個月時,各指標間差異無統(tǒng)計學(xué)意義。白細胞和血小板相關(guān)指標顯示,干預(yù)3個月時,淋巴細胞數(shù)(LYM)低碘組低于正常組(P0.05),干預(yù)9個月時,低碘組高于正常組(P0.01),其余各組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義。2.2血生化血生化指標檢查顯示低碘干預(yù)對肝臟、腎臟和血糖血脂部分相關(guān)指標存在影響。血清酶和蛋白水平的結(jié)果顯示,干預(yù)3個月,干預(yù)6個月、9個月時,谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ATL)低碘組低于正常組(P0.01)；血糖血脂相關(guān)指標總蛋白(TC)與甘油三酯(TG),在干預(yù)3個月、9個月時,低碘組低于正常組(P0.01,P0.05),葡萄糖(GLU)在干預(yù)6個月時,低碘組低于正常組；尿素(BUG)干預(yù)9個月時,低碘組低于正常組(P0.05),其他組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義。3甲狀腺絕對重量與相對重量經(jīng)過低碘干預(yù)后,甲狀腺絕對重量干預(yù)3個月雌鼠各組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義,雄鼠低碘組大于正常組；6個月、9個月雌鼠和雄鼠各組間甲狀腺絕對重量和相對重量均存在差異統(tǒng)計學(xué)差異(P0.01),均呈現(xiàn)LⅡLⅠNI。4臟器系數(shù)經(jīng)過低碘干預(yù)后,各組雌鼠和雄鼠胸腺、心臟、肝臟和腎臟的臟器系數(shù)與正常組存在差異(P0.01),其中心臟和腎臟的臟器系數(shù)呈現(xiàn)LⅡLⅠNI。肝臟的臟器系數(shù)呈現(xiàn)LⅠLⅡNI。5不同碘缺乏水平對大鼠甲狀腺形態(tài)和功能的影響5.1不同碘缺乏水平對大鼠甲狀腺功能的影響5.1.1尿碘各組大鼠尿碘水平與碘攝入水平基本一致,每個干預(yù)時間段低碘組尿碘水平均低于同時期的對照組(P0.01)。正常組尿碘水平在260.65μg/L-271.40μg/L之間。5.1.2血清激素干預(yù)3個月時,FT4 L Ⅰ、LⅡ低于NI(P=0.000,P=0.000)；干預(yù)9個月時,T3 LⅠ、LⅡ高于NI(P=0.009、P=0.005);T3/T4 LⅠ、LⅡ 高于NI(P=0.002、P=0.000)；干預(yù)3、6、9個月時T4 L Ⅰ、LⅡ低于NI(P0.01)5.1.3甲狀腺NIS表達低碘干預(yù)后,各組間NIS蛋白表達水平低碘組高于正常組,隨著碘含量的降低表達量上升,依次為LⅡL ⅠNI。5.2不同碘缺乏水平對大鼠甲狀腺形態(tài)的影響5.2.1甲狀腺解剖學(xué)變化NI甲狀腺3個月、6個月、9個月均為淡粉色,質(zhì)地柔軟；LⅠ較NI顏色加深,質(zhì)地柔軟,干預(yù)6個月、9個月時出現(xiàn)輕微腫大；LⅡ較NI顏色加深呈現(xiàn)暗紅色,明顯充血、腫大,典型的小濾泡增生性甲狀腺腫,干預(yù)9個月與3個月、6個月相比表現(xiàn)更加明顯。5.2.2甲狀腺組織學(xué)變化在各個干預(yù)時間點NI甲狀腺均呈現(xiàn)中等大小濾泡,上皮細胞多為單層立方,濾泡腔內(nèi)膠質(zhì)豐富。干預(yù)6、9個月LⅡ甲狀腺出現(xiàn)明顯濾泡增多,濾泡腔變小,上皮細胞增生、肥大,呈柱狀；尤其干預(yù)9個月時LⅠ、LⅡ存在間質(zhì)纖維增生和間質(zhì)炎性細胞浸潤現(xiàn)象,LⅡ出現(xiàn)部分細胞膜破裂,侵入濾泡腔內(nèi)。結(jié)論不同程度的碘缺乏對大鼠的影響主要表現(xiàn)在干預(yù)前后體重的變化、臟器系數(shù)、尿碘含量、甲狀腺激素水平、NIS蛋白表達、甲狀腺解剖學(xué)和組織學(xué)變化等方面。本研究通過動物碘缺乏模型的構(gòu)建,了解了不同碘缺乏水平下,短期內(nèi)通過下丘腦-腺垂體-甲狀腺軸調(diào)節(jié)系統(tǒng)維持基本的功能。以及隨著碘的長期缺乏,進入失代償期后,甲狀腺的功能和形態(tài)發(fā)生變化。
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【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R599

【參考文獻】

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本文編號：2382799