【摘要】：[目的]研究色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)在高濃度地塞米松刺激下,體外培養(yǎng)的成骨細胞遷移及分化的影響,探討PEDF對成骨細胞功能的保護作用。[方法]將體外培養(yǎng)的MC3T3-E1細胞分為六組,分別為對照組、高濃度地塞米松(dexamethasone,DEX 10-6mol/L)組,PEDF干預(yù)地塞米松組,PEDF干預(yù)地塞米松組又按照PEDF的濃度分為3組(2、10、50 nmol/L)及成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)組。采用Transwell小室及劃痕實驗于48 h后觀察細胞的遷移情況。于14 d時采用倒置相差顯微鏡觀察細胞形態(tài)的變化,并進行細胞化學(xué)染色(茜素紅染色、油紅O染色),運用Western Blot檢測細胞內(nèi)PPARγ-2、Runx2蛋白的表達。[結(jié)果]在高濃度地塞米松作用下,細胞遷移能力受到抑制,細胞分化能力減弱,胞漿中出現(xiàn)脂滴,Western Blot結(jié)果顯示脂肪細胞標志蛋白PPARγ-2表達增高,成骨細胞標志蛋白Runx2表達減少。而PEDF干預(yù)后可明顯逆轉(zhuǎn)高濃度地塞米松抑制細胞遷移及分化的作用。[結(jié)論]大劑量應(yīng)用糖皮質(zhì)激素可能抑制成骨細胞的遷移及成骨分化能力,促進成骨細胞轉(zhuǎn)分化為脂肪細胞,而PEDF可以有效地逆轉(zhuǎn)這一過程,起到保護細胞功能的作用。
[Abstract]:[objective] to study the effects of pigment epithelium-derived factor (pigment epithelium-derived factor,PEDF) on the migration and differentiation of osteoblasts cultured with high concentration of dexamethasone (Dexamethasone), and to explore the protective effect of PEDF on the function of osteoblasts. [methods] the MC3T3-E1 cells cultured in vitro were divided into six groups: control group, high concentration dexamethasone (dexamethasone,DEX 10-6mol/L) group and PEDF intervention dexamethasone group. The dexamethasone group treated with PEDF was divided into 3 groups according to the concentration of PEDF (2C1050 nmol/L) and osteogenic culture group. Cell migration was observed by Transwell chamber and scratch test 48 h later. The morphologic changes of the cells were observed by inverted phase contrast microscope at day 14. The expression of PPAR 緯 -2rRunx2 protein was detected by Western Blot. The cells were stained with alizarin red and oil red O. [results] under the action of high concentration of dexamethasone, cell migration ability was inhibited, cell differentiation ability was weakened, lipid drop, Western Blot appeared in the cytoplasm, the results showed that the expression of adipocyte marker PPAR 緯 -2 was increased. The expression of osteoblast marker protein Runx2 was decreased. PEDF treatment could reverse the inhibitory effect of high concentration dexamethasone on cell migration and differentiation. [conclusion] High dose of glucocorticoid may inhibit the migration and osteogenic differentiation of osteoblasts and promote the transformation of osteoblasts into adipocytes. PEDF can effectively reverse this process and protect the function of osteoblasts.
【作者單位】： 徐州醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院骨科;徐州醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)院;徐州醫(yī)科大學(xué)神經(jīng)生物學(xué)實驗室;
【基金】：江蘇省衛(wèi)生計生委面上科研課題(編號:H201528) 江蘇省級重點研發(fā)專項資金項目(編號:BE2015627) 江蘇省衛(wèi)生廳科技項目(編號:Q201201)
【分類號】：R580

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本文編號：2295515