【摘要】：目的:探討鈣、鎂、銅、鋅、維生素D和大豆干預(yù)燃煤型氟中毒對(duì)雌鼠卵巢生殖功能影響及其干預(yù)可能機(jī)制。方法:1.采用自由食用添加鈣、鎂、銅、鋅、維生素D和大豆不同配方的織金病區(qū)原煤加拌泥煤烘烤的玉米飼料構(gòu)建動(dòng)物模型;2.動(dòng)態(tài)觀(guān)察雌鼠染氟期間牙齒的變化情況;3.采用離子選擇電極法、高溫灰化-氟離子選擇電極法測(cè)定雌鼠尿氟、骨氟含量;4.分離卵巢:①稱(chēng)重,計(jì)算卵巢的臟器系數(shù)。②電鏡下觀(guān)察卵泡組織超微結(jié)構(gòu)及顆粒細(xì)胞凋亡情況。③用免疫組化法觀(guān)察卵巢顆粒細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2、Bax的表達(dá)。④HE染色光鏡下觀(guān)察卵巢組織形態(tài)、各級(jí)卵泡及黃體的數(shù)量變化。5.于不同時(shí)間段(60d、120d、180d)的動(dòng)情期處死雌鼠,采用股動(dòng)脈取血法收集雌鼠血液,分離血清,采用放射免疫法檢測(cè)血清中雌二醇(E2)含量;結(jié)果:1.成功復(fù)制染氟組和干預(yù)組動(dòng)物模型;2.隨著染氟時(shí)間的延長(zhǎng),雌鼠氟斑牙癥狀逐漸加重,干預(yù)組出現(xiàn)輕度氟斑牙,且多種元素+大豆干預(yù)組氟斑牙的發(fā)生較多種元素干預(yù)組輕;3.染氟時(shí)間相同的組別(60、120、180d):染氟組雌鼠尿氟、骨氟含量均高于對(duì)照組,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),且染氟組、兩干預(yù)組雌鼠的尿氟逐漸增加,且后者明顯高于前者,均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與染氟組比較,兩干預(yù)組雌鼠的骨氟逐漸降低,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);各組內(nèi)比較:隨著時(shí)間的延長(zhǎng),尿氟含量均逐漸增加,各組尿氟含量間均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。染氟組骨氟含量逐漸增加均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);兩干預(yù)組骨氟含量均逐漸降低,多種元素干預(yù)組僅60d、120d骨氟含量與180d有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),多種元素+大豆干預(yù)組骨氟含量均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);4.染氟組卵泡組織超微結(jié)構(gòu)出現(xiàn)顆粒細(xì)胞、基質(zhì)細(xì)胞凋亡;兩干預(yù)組在早期仍可見(jiàn)較明顯的超微結(jié)構(gòu)損害,隨干預(yù)時(shí)間延長(zhǎng),與染氟組比較,兩干預(yù)組雌鼠卵巢顆粒細(xì)胞和基質(zhì)細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)均基本正常,未見(jiàn)凋亡樣改變。添加蛋白質(zhì)干預(yù)表現(xiàn)為卵巢超微結(jié)構(gòu)脂滴明顯少于多種元素干預(yù)組。5.卵巢顆粒細(xì)胞Bax蛋白表達(dá)量,染氟120d、180d染氟組明顯高于對(duì)照組、兩干預(yù)組,均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);多種元素+大豆干預(yù)組低于多種元素干預(yù)組,且180d兩干預(yù)組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。相同組別隨時(shí)間延長(zhǎng):卵巢顆粒細(xì)胞Bax蛋白表達(dá)量,染氟組、兩干預(yù)組均逐漸增多,染氟組內(nèi)比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。多種元素干預(yù)組60d與180d有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。6.染氟組隨時(shí)間延長(zhǎng),卵巢顆粒細(xì)胞從輕度、中度、到重度呈現(xiàn)漸進(jìn)性水腫的變化,細(xì)胞結(jié)構(gòu)和細(xì)胞輪廓變得模糊,閉鎖的卵泡和黃體退化逐漸增多,成熟卵泡偶見(jiàn)。兩干預(yù)組卵巢顆粒細(xì)胞少見(jiàn)輕度水腫,細(xì)胞結(jié)構(gòu)和細(xì)胞輪廓趨于正常,正常的各級(jí)卵泡多見(jiàn),閉鎖的卵泡和退化的黃體明顯低于染氟組;雌鼠閉鎖卵泡數(shù)量與染氟組相比,60d對(duì)照組、多種元素+大豆干預(yù)組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);120、180d對(duì)照組、兩干預(yù)組均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。7.染氟時(shí)間相同的組別(60、120、180d)雌鼠E2含量與對(duì)照組相比,60d各組逐漸增加有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),多種元素+大豆干預(yù)組高于各組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。120d、180d,染氟組均低于各組,與對(duì)照組、多種元素+大豆干預(yù)組比較,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),且180d兩干預(yù)組間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。相同組別隨時(shí)間延長(zhǎng),對(duì)照組雌鼠E2含量呈波動(dòng)性變化,120d高于60d和180d,且與60d有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。染氟組E2的含量逐漸降低,且各組之間均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。多種元素干預(yù)組E2的含量逐漸降低,60d、120d與180d比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。多種元素+大豆干預(yù)組E2的含量逐漸降低,60d與180d比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1.鈣、鎂、銅、鋅、維生素D可拮抗燃煤型氟中毒對(duì)卵巢生殖毒性;可拮抗高氟對(duì)血清雌激素E2的毒性作用,使卵巢分泌E2趨于正常水平;可拮抗氟中毒對(duì)卵泡生長(zhǎng)發(fā)育的影響,使閉鎖卵泡數(shù)量降低;可拮抗對(duì)雌鼠卵巢組織超微結(jié)構(gòu)的損傷,使卵巢顆粒細(xì)胞、基質(zhì)細(xì)胞核、線(xiàn)粒體等超微結(jié)構(gòu)趨于正常水平;可拮抗燃煤型氟中毒對(duì)卵巢顆粒細(xì)胞Bax促凋亡蛋白表達(dá)的影響,下調(diào)Bax的表達(dá)量,降低卵巢顆粒細(xì)胞凋亡。2.在鈣、鎂、銅、鋅、維生素D的基礎(chǔ)上添加蛋白質(zhì)可部分增強(qiáng)對(duì)氟中毒的干預(yù),僅表現(xiàn)卵巢超微結(jié)構(gòu)脂滴明顯減少、凋亡蛋白Bax表達(dá)和閉鎖卵泡數(shù)量明顯降低,且隨干預(yù)時(shí)間延長(zhǎng),效果更佳。3.多種元素+大豆干預(yù)和多種元素干預(yù)作用對(duì)雌鼠的卵巢臟器系數(shù),原始卵泡、初級(jí)卵泡、次級(jí)卵泡及黃體數(shù)量,卵泡組織形態(tài),凋亡蛋白Bcl-2沒(méi)有明顯影響。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R599.1

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2276943