本文選題：PIF解旋酶 + 輻射　； 參考：《軍事醫(yī)學(xué)》2017年03期

【摘要】：目的觀察人PIF1解旋酶敲低對電離輻射致細(xì)胞生長及細(xì)胞周期阻滯的影響,以探討人PIF1在電離輻射致DNA損傷應(yīng)答中的作用。方法采用慢病毒系統(tǒng)建立PIF1敲低穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系,實時熒光定量PCR及Western印跡檢測PIF1敲低效果。細(xì)胞計數(shù)法觀察PIF1敲低對4 Gyγ射線照射下細(xì)胞增殖的影響,流式細(xì)胞術(shù)觀察PIF1敲低對8 Gyγ射線照射下細(xì)胞周期阻滯的影響。結(jié)果建立了PIF1敲低的穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系,4 Gyγ射線照射后,PIF1敲低細(xì)胞系的生長受到明顯抑制,在照后第2~4天幾乎無任何增殖,直到第5天才開始緩慢增殖。8 Gyγ射線照射后,PIF1敲低細(xì)胞系的S期阻滯與G_2/M期阻滯相對于對照細(xì)胞發(fā)生明顯延遲。結(jié)論 PIF1敲低后顯著增加了細(xì)胞的輻射敏感性以及電離輻射所致的S期阻滯與G_2/M期阻滯延遲。
[Abstract]:Aim to investigate the effects of low levels of human PIF1 helicase on cell growth and cell cycle arrest induced by ionizing radiation, and to explore the role of human PIF1 in DNA damage response induced by ionizing radiation. Methods Lentivirus system was used to establish PIF1 knockdown stable cell line, and real-time fluorescent quantitative PCR and Western blotting were used to detect the effect of PIF1 knockdown. Cell count method was used to observe the effect of PIF1 knockout on cell proliferation induced by 4 Gy 緯 -ray irradiation and flow cytometry to observe the effect of PIF1 knockout on cell cycle arrest induced by 8 Gy 緯 -ray irradiation. Results the growth of PIF1 knockdown cell line was significantly inhibited after 4 Gy 緯 -ray irradiation, and almost no proliferation was observed on the 2nd day after irradiation. It was not until the 5th day that the slow proliferation of PIF1 knockout cell lines in S phase arrest and G _ 2 / M phase arrest was significantly delayed compared with that of the control cells. Conclusion PIF1 knockout can significantly increase the radiosensitivity of the cells and delay the S phase arrest induced by ionizing radiation and the GSP 2 / M phase block.
【作者單位】： 石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院;石河子大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射與輻射醫(yī)學(xué)研究所;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(31470827,81472910,81560473,31270894)
【分類號】：R594.8

【參考文獻(xiàn)】

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3 顧永清;;不含氨基末端的PIF1解螺旋酶的純化和初步功能研究[J];西安交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2009年03期

4 顧永清;;人類重組PIF1蛋白的表達(dá)純化和解螺旋酶活性的分析[J];生物工程學(xué)報;2009年02期

【共引文獻(xiàn)】

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2 王彬;張瑩;趙德根;李忠秋;楊洋;李超;朱茂祥;顧永清;;~(60)Coγ射線照射人肝癌細(xì)胞誘導(dǎo)PIF1基因mRNA變化[J];輻射防護(hù);2016年03期

3 王攀;王建校;李珊珊;劉曉丹;王豫;周平坤;顧永清;;酵母雙雜交技術(shù)篩選人PIF1解螺旋酶相互作用蛋白[J];西安交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2013年05期

【二級參考文獻(xiàn)】

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1 李珊珊;劉旭;張瑩;王建校;劉曉丹;王豫;周平坤;顧永清;;人PIF1及其截短體重組蛋白的真核表達(dá)及其細(xì)胞內(nèi)定位[J];西安交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2014年05期

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3 顧永清;;人類重組PIF1蛋白的表達(dá)純化和解螺旋酶活性的分析[J];生物工程學(xué)報;2009年02期

4 顧永清;Kenji Kamiya;;人類重組PIF1解螺旋酶C-末端多肽的純化及其抗體制備[J];農(nóng)墾醫(yī)學(xué);2008年06期

【相似文獻(xiàn)】

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2 王小玲;;術(shù)中使用C型臂X線機(jī)電離輻射的防護(hù)[J];河南外科學(xué)雜志;2008年06期

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4 于雯淼;李t煴，

本文編號：2103420