本文選題：橋本甲狀腺炎 + 甲狀腺乳頭狀癌��； 參考：《第四軍醫(yī)大學》2015年博士論文

【摘要】：橋本甲狀腺炎(Hashimoto’s thyroiditis,HT),因日本學者橋本策于1912年首先報道而命名,是最常見的器官特異性自身免疫性疾病。該病不僅會引起永久性甲狀腺功能低下,還與甲狀腺癌和淋巴瘤發(fā)生密切相關,尤其是甲狀腺乳頭狀癌(Papillary thyroid carcinoma,PTC)。HT的核心病理學特征是顯著的淋巴細胞及大量漿細胞浸潤和淋巴濾泡形成、甲狀腺濾泡上皮細胞變性和破壞,直至晚期形成纖維化。雖然已經(jīng)歷逾百年的研究,其病因仍不明確。目前研究表明,HT的發(fā)病是環(huán)境因素和遺傳因素共同作用的結果。而在環(huán)境因素中,病毒感染可能起重要作用,但其病因和發(fā)病機制仍未闡明。人類微小病毒B19(Parvovirus B19,PVB19)是單鏈DNA病毒,屬于微小病毒科,僅對人類致病。PVB19感染普遍存在,并與多種自身免疫性疾病的發(fā)生密切相關,但既往研究未涉及HT與PTC。我們課題組一直致力于PVB19在疾病發(fā)生發(fā)展中的作用研究,發(fā)現(xiàn)PVB19在HT的發(fā)病及HT向PTC惡性轉化中發(fā)揮作用。正性調控域鋅指蛋白1(Positive regulatory domain zinc finger protein 1,PRDM1)是一種具有鋅指結構域的抑制性蛋白,其主要功能包括早期胚胎發(fā)育和漿細胞分化。PRDM1也表達于T細胞、巨噬細胞等淋巴濾泡的主要細胞成分,提示其在淋巴濾泡形成和機體免疫調節(jié)中發(fā)揮重要作用。綜上所述,我們自然會問,ht的病變組織中是否存在prdm1表達?其定位如何?另外,鑒于ht-ptc存在惡性轉化,那么,prdm1在此過程中是否也起作用?其分子機理為何?同時,由于pvb19與ht及ptc的發(fā)病關系密切,那么,pvb19感染與prdm1表達是否有關?對這些問題的回答不僅對闡明ht的發(fā)病和轉化機制有重要的意義,而且也可以為ht及ptc的防治提供新的理論依據(jù)。本研究首先用含有16種人類腫瘤及瘤旁組織(包括食道、胃、結腸、直腸、肝、肺、腎、乳腺、宮頸、卵巢、膀胱、淋巴結、皮膚、腦、前列腺和胰腺)組織芯片以及甲狀腺癌及癌旁組織芯片篩查prdm1的表達,以明確其組織特異性及其蛋白表達譜;通過回顧性研究prdm1蛋白在正常甲狀腺(30例)、結節(jié)性甲狀腺腫(20例)、ht(86例)、甲狀腺腺瘤(42例)、ptc(54例)、甲狀腺濾泡癌(6例)和甲狀腺髓樣癌(9例)手術標本的表達,明確其在正常甲狀腺及多種甲狀腺疾病組織的表達模式,并對其陽性率和陽性等級進行評價,探討該分子在甲狀腺疾病發(fā)生中的作用;通過配對比較4例ht和4例ptc新鮮組織中prdm1和pvb19基因及蛋白表達情況,對兩種蛋白的相互關系進行初步分析;通過在原代培養(yǎng)人甲狀腺濾泡上皮細胞中轉染prdm1和pvb19基因,檢測基因變化,探討prdm1在ht發(fā)生中的潛在作用機制;通過沉默人甲狀腺乳頭狀癌細胞系sw579中的prdm1基因,初步探討其在ptc中的生物學功能。本研究的主要結果與發(fā)現(xiàn)如下:1.在人體16種腫瘤及瘤旁組織芯片檢測中,prdm1呈散在表達;而在甲狀腺癌及癌旁組織芯片中(ptc23例、ftc16例和正常組織8例),發(fā)現(xiàn)22例ptc和9例ftc癌細胞胞漿表達陽性,正常組織全部陰性。同時,根據(jù)芯片提供的臨床分期資料將甲狀腺癌的tnm分期與prdm1表達程度進行spearman相關分析。結果顯示,prdm1表達陽性程度與直接浸潤能力t(p=0.464)和淋巴結轉移n(p=0.064)并無相關性。擴大甲狀腺疾病病變類型和病例數(shù)后進行了手術標本的大樣本分析,發(fā)現(xiàn)在ht、甲狀腺腺瘤、ptc、甲狀腺濾泡癌和髓樣癌組織中prdm1陽性率分別為96.5%、35.7%、79.6%、83.3%、77.8%,而在正常甲狀腺和結節(jié)性甲狀腺腫中表達均陰性。綜合統(tǒng)計分析顯示prdm1在ht(p=0.000)和ptc(p=0.002)的表達陽性率與其它類型組織具有顯著性差異;2.對81例ht和54例ptcprdm1表達和pvb19蛋白切片進行數(shù)字化測量和配對分析,發(fā)現(xiàn)兩種疾病中prdm1和pvb19表達顯著相關(htp=0.000,ptcP=0.002);在對4例HT和4例PTC新鮮組織基因和蛋白表達進行檢測,在2例HT和1例PTC中PRDM1和PVB19共存,進一步使用免疫熒光共聚焦技術分析,發(fā)現(xiàn)兩種蛋白具有共定位,免疫沉淀也證實二者具有相互作用;3.原代培養(yǎng)人甲狀腺濾泡上皮細胞中分別瞬時轉染PRDM1和PVB19基因后進行NFκB mRNA檢測,發(fā)現(xiàn)與轉入PVB19 VP1相比,轉入PVB19 NS1基因后PRDM1和NFκB表達均顯著上調(PRDM1 P=0.017;NFκB P=0.040)。PRDM1和NFκB表達峰值分別出現(xiàn)于轉染后36 h和24 h,提示NFκB在PVB19 NS1介導PRDM1表達中起重要作用。4.檢測PRDM1 RNA干涉前后甲狀腺乳頭狀癌細胞系SW579的狀態(tài)和周期,發(fā)現(xiàn)處理后細胞凋亡現(xiàn)象明顯增加;處理前細胞周期G1、G2和S期比例分別為53.9%、36.4%和9.71%,處理后分別變?yōu)?9.5%、6.92%和23.6%,G1期(P=0.030)、G2期(P=0.000)和S期(P=0.006)細胞比例變化有顯著性差異。綜合以上結果,可以得出以下結論:PRDM1在人體多數(shù)組織中都有表達,但表達方式有所不同;PRDM1在甲狀腺疾病特別是HT和PTC發(fā)病中有重要作用,并與PVB19感染密切相關,其表達很可能是PVB19感染誘導所致,并且NFκB參與該過程;PRDM1在甲狀腺癌總體表達程度與浸潤和轉移能力無關,但其表達強度與增殖能力有關,并在PTC細胞周期調控和抗凋亡方面有重要作用。
[Abstract]:Hashimoto ' s thyroid carcinoma ( HT ) , named after first reported in 1912 , is the most common type of organ - specific autoimmune disease . The disease not only causes permanent hypothyroidism but also closely related to thyroid cancer and lymphoma , especially papillary thyroid carcinoma ( PTC ) . In this study , it is suggested that the pathogenesis and pathogenesis of HT may play an important role in the development of lymphoid follicles . The expression of prdm1 and pvb19 genes in thyroid carcinoma and adjacent tissues were analyzed . The results showed that the positive rates of prdm1 and pvb19 in thyroid adenoma , thyroid adenoma , thyroid follicular carcinoma ( 6 cases ) and medullary thyroid carcinoma ( n = 0.064 ) were analyzed . The results showed that the positive rates of prdm1 and pvb19 in thyroid carcinoma and adjacent tissues were 96.5 % , 33.7 % , 79.6 % , 83.3 % and 77.8 % respectively . The results showed that the expression of PRDM1 and NF - 魏B in human thyroid follicular epithelial cells increased significantly ( PRDM1 P = 0 . 017 ; NF - 魏B P = 0 . 040 ) . Conclusion : PRDM1 plays an important role in the pathogenesis of thyroid diseases , especially in HT and PTC .
【學位授予單位】：第四軍醫(yī)大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R736.1;R581.4

【參考文獻】

相關期刊論文 前1條

1 王洪江;李培華;劉穩(wěn);許學谷;;PRDM1基因在喉癌組織中表達的研究及臨床意義[J];徐州醫(yī)學院學報;2009年02期

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本文編號：1967912