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LKB1調(diào)控Peutz-Jeghers綜合征錯構(gòu)瘤及腸上皮細胞中的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化

發(fā)布時間:2018-05-26 17:08

  本文選題:LKB + 上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化。 參考:《南方醫(yī)科大學學報》2017年08期


【摘要】:目的探討LKB1在Peutz-Jeghers綜合征(PJS)錯構(gòu)瘤及腸上皮細胞中對上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)調(diào)控作用。方法采用免疫組化法檢測20例PJS錯構(gòu)瘤標本及10例正常腸道組織中LKB1、ecadherin、vimentin蛋白的表達。Masson三色染色法分析膠原纖維沉積。選取NCM460人腸上皮細胞株,慢病毒轉(zhuǎn)染后建立LKB1敲低及空載體穩(wěn)定表達株。以CCK8實驗和transwell遷移實驗評價LKB1敲低對細胞增殖、遷移的影響。運用WB、q PCR、免疫熒光檢測LKB1敲低后對細胞中EMT相關(guān)蛋白ecadherin、vimentin、ncadherin、snail、slug表達的影響。結(jié)果與正常腸組織相比,PJS錯構(gòu)瘤中LKB1和ecadherin蛋白表達下降,而vimentin蛋白表達增加。Masson染色提示錯構(gòu)瘤中膠原纖維沉積增多,沉積面積擴大。與空載體組相比,LKB1敲低的NCM460細胞增殖、遷移能力明顯增強(P0.01),細胞中ecadherin表達降低,ncadherin、vimentin、snail、slug表達增高。結(jié)論LKB1可能通過調(diào)控EMT從而影響PJS錯構(gòu)瘤的形態(tài)改變及纖維化進程,提示EMT可能成為PJS治療的新靶點。
[Abstract]:Objective to investigate the regulatory effect of LKB1 on epithelial mesenchymal transformation in hamartoma and intestinal epithelial cells of Peutz-Jeghers syndrome. Methods Immunohistochemical method was used to detect the expression of LKB1 ecadherininvimentin protein in 20 PJS hamartoma specimens and 10 normal intestinal tissues. NCM460 human intestinal epithelial cell line was selected and stable expression strain of LKB1 knockdown and empty vector was established after lentivirus transfection. The effects of low LKB1 knockout on cell proliferation and migration were evaluated by CCK8 assay and transwell migration assay. The effect of LKB1 knockout on the expression of EMT related protein (ecadherin) snailslug in cells was detected by immunofluorescence. Results the expression of LKB1 and ecadherin protein in PJS hamartoma was lower than that in normal intestinal tissue, while the expression of vimentin protein was increased. Masson staining indicated that collagen fiber deposition and deposition area were increased in hamartoma. Compared with the empty vector group, the NCM460 cells with low LKB1 knockout significantly increased their migration ability, and the expression of ecadherin decreased, and the expression of ncadherin vimentinine snailslug increased. Conclusion LKB1 may influence the morphological changes and fibrosis process of PJS hamartoma by regulating EMT, suggesting that EMT may be a new target for PJS therapy.
【作者單位】: 南方醫(yī)科大學南方醫(yī)院消化內(nèi)科//廣東省胃腸疾病重點實驗室;青島大學附屬醫(yī)院感染科;廣東省廣州市番禺區(qū)人民醫(yī)院消化內(nèi)科;
【基金】:國家自然科學基金(81401925) 廣東省自然科學基金(2014A030313285)~~
【分類號】:R596.1

【參考文獻】

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【共引文獻】

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本文編號:1938125

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