艾塞那肽通過調(diào)節(jié)脂聯(lián)素及其受體、氧化應(yīng)激和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激對高糖培養(yǎng)心肌細胞產(chǎn)生保護作用
本文選題:胰高血糖素樣肽1 + 脂聯(lián)素。 參考:《山西醫(yī)科大學》2017年碩士論文
【摘要】:目的:觀察艾塞那肽對高糖培養(yǎng)心肌細胞脂聯(lián)素及其受體1(AdipoR1)、氧化應(yīng)激及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的影響,探討艾塞那肽對心肌細胞保護作用及機制。方法:將H9C2心肌細胞隨機分為4組(每組n=3):對照組(A組,5.6 mmol/L糖培養(yǎng)基)、高糖組(B組,25.5 mmol/L糖培養(yǎng)基);高糖+10 nmol/L艾塞那肽組(C組);高糖+100 nmol/L艾塞那肽組(D組)。按分組處理24 h后檢測細胞凋亡率。用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定心肌細胞上清液脂聯(lián)素(Adiponectin)水平。用實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)法(RT-PCR)測定煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADPH)氧化酶亞單位p22phox(nicotinamide adenine dinucleotide(NADPH)oxidase subunit,p22phox)、核因子E2相關(guān)因子2(nuclear factor E2-related factor2,Nrf2)、血紅素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-l)、葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(glucose-regulated protein78,GRP-78)、和CCAAT/增強子結(jié)合蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)mRNA表達。用免疫印跡法(Western Blot)測定心肌細胞AdipoR1、磷酸化AMP激活蛋白激酶-α(Phosphorylated AMP activated protein kinase,P-AMPK)和葡萄糖轉(zhuǎn)運因子4(Glucose transporter 4,GLUT4)蛋白表達。結(jié)果:1.與A組比較,B組心肌細胞凋亡率升高(25.90±0.55比5.60±0.25;χ2=10.958,P0.05),心肌細胞脂聯(lián)素、AdipoR1和P-AMPK、GLUT4蛋白表達、Nrf2和HO-1mRNA表達水平均顯著降低(760±145比1 490±168;0.59±0.08比0.91±0.07;0.59±0.26比0.85±0.03;0.63±0.08比0.86±0.08;0.56±0.02比1.00±0.00;0.48±0.08比1.00±0.00;t=7.942、6.922、13.255、4.536、10.689、13.627,均P0.05),p22phox蛋白表達、GRP-78和CHOP mRNA表達水平升高(0.87±0.02比0.56±0.09;1.33±0.08比1.00±0.00;1.58±0.16比1.00±0.00;t=7.591、5.138、5.994,均P0.05)。2.C組心肌細胞凋亡率為12.2±2.2,低于B組(χ2=6.814,P0.05);脂聯(lián)素、AdipoR1和P-AMPK、GLUT4蛋白表達、Nrf2和HO-1 mRNA水平分別為1 070±142、0.69±0.02、0.72±0.03、0.78±0.08、0.71±0.09、0.64±0.07,高于B組(t=3.372、2.263、6.477、2.897、3.633、4.225,均P0.05);而p22phox蛋白(0.66±0.04)、GRP-78mRNA(0.99±0.16)和CHOP mRNA表達(1.26±0.28)低于B(t=4.716、4.892、3.272,均P0.05)。3.D組心肌細胞凋亡率(8.7±0.8)低于C組(χ2=2.265,P0.05);脂聯(lián)素(1306±178)、AdipoR1蛋白(0.82±0.09)和P-AMPK蛋白(0.88±0.20)、Nrf2 m RNA水平(0.91±0.11)和HO-1mRNA水平(0.88±0.08)高于C組(t=2.575、2.349、7.822、4.792、6.518,均P0.05),CHOP mRNA表達(0.96±0.09)低于C組(t=3.185,P0.05)。而p22phox蛋白(0.60±0.14)和GLUT4蛋白(0.89±0.05)、GRP-78mRNA(1.10±0.12)較C組無明顯變化(t=1.323、1.702、1.348,均P0.05)結(jié)論:1.高糖培養(yǎng)的心肌細胞脂聯(lián)素水平降低,心肌細胞凋亡率升高。2.高糖培養(yǎng)的心肌細胞p-AMPK、GLUT4表達降低,p22phox表達升高,Nrf2及其下游抗氧化因子表達降低,GRP78及其相關(guān)因子表達升高,提示高糖誘導了能量代謝紊亂、氧化應(yīng)激和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激。3.艾塞那肽可能通過上調(diào)脂聯(lián)素及其受體水平、調(diào)節(jié)能量代謝,抑制氧化應(yīng)激、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激,減輕高糖對心肌細胞的損傷,保護受損心肌細胞。
[Abstract]:AIM : To investigate the effects of exenanapeptide on AdipoR1 , oxidative stress and endoplasmic reticulum stress in cultured myocardial cells . Methods : The expression of AdipoR1 ( NADPH ) oxidase subunit p22phox , nuclear factor E2 - related factor2 ( Nrf2 ) , heme oxygenase - 1 ( HO - l ) , glucose - regulated protein 78 ( P - AMPK ) and glucose transporter 4 ( GLUT4 ) protein were determined by ELISA . The expression of p22phox protein ( 0.66 鹵 0.04 ) , GRP - 78mRNA ( 0.99 鹵 0.16 ) and CHOP mRNA ( 1.26 鹵 0.28 ) were significantly lower than that in group B ( 蠂 ~ 2 = 6.814 , P0.05 ) . The expression of p22phox protein ( 0.60 鹵 0.14 ) and GLUT4 protein ( 0.89 鹵 0.05 ) , GRP - 78mRNA ( 1.10 鹵 0.12 ) were lower than that in group C ( t = 1.323 , 1.702 , 1.348 , all P0.05 ) .
【學位授予單位】:山西醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2017
【分類號】:R587.2;R54
【參考文獻】
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,本文編號:1925681
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