發(fā)布時(shí)間：2018-05-03 03:05

  本文選題：微模式 + 粘附形狀��； 參考：《北京理工大學(xué)》2016年碩士論文

【摘要】：老齡化、婦女絕經(jīng)、病人長(zhǎng)期臥床以及宇航員長(zhǎng)期在太空中失重等都會(huì)造成骨量的大量流失,從而嚴(yán)重影響人們的健康。骨吸收和骨形成是骨重建的兩個(gè)重要過(guò)程,其中骨吸收由破骨細(xì)胞完成。破骨前體細(xì)胞來(lái)源于骨髓造血干細(xì)胞,其為單核巨噬細(xì)胞,已經(jīng)發(fā)現(xiàn)可在化學(xué)因子的誘導(dǎo)下分化為多核的成熟破骨細(xì)胞,而細(xì)胞所處的力學(xué)微環(huán)境是否參與調(diào)控破骨細(xì)胞的融合則不清楚。我們此前已經(jīng)發(fā)現(xiàn),單層鋪展的細(xì)胞在圓環(huán)和圓形模式的邊界處其細(xì)胞單層內(nèi)的剪應(yīng)力最大,因此擬研究這種局部力學(xué)微環(huán)境是否影響破骨前體細(xì)胞的融合以及其機(jī)制是什么。本文利用微接觸印刷技術(shù)構(gòu)建了多細(xì)胞單層鋪展的圓環(huán)形和圓形微模式,然后觀測(cè)了內(nèi)外不同區(qū)域的細(xì)胞融合率分布,進(jìn)而利用免疫熒光染色技術(shù)觀察了F-actin、Vinculin、β-catenin、E-cadherin四種蛋白在圓環(huán)形和圓形微模式上不同位置的表達(dá)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,用MC3T3-E1上清液誘導(dǎo)破骨前體細(xì)胞在圓環(huán)和圓形微模式上融合4天和6后,在圓環(huán)和圓形的最外側(cè)融合率最低;而F-actin、Vinculin、β-catenin、E-cadherin四種蛋白在圓環(huán)形和圓形微模式最外側(cè)表達(dá)也最高。因此我們推測(cè),細(xì)胞單層的外邊界處細(xì)胞會(huì)受到較高水平的剪應(yīng)力,從而細(xì)胞骨架張力、細(xì)胞與基底間的作用力以及細(xì)胞間的相互作用力都較大,最終導(dǎo)致破骨細(xì)胞融合率較小。以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明細(xì)胞單層內(nèi)的力學(xué)微環(huán)境對(duì)破骨前體細(xì)胞的融合具有重要作用,并初步闡明了調(diào)控此融合過(guò)程的分子機(jī)制。
[Abstract]:Aging, menopause, prolonged bed rest and weightlessness of astronauts in space can cause massive bone loss, which can seriously affect people's health. Bone resorption and bone formation are two important processes of bone reconstruction, in which bone resorption is accomplished by osteoclasts. Osteoclast derived from bone marrow hematopoietic stem cells, which are mononuclear macrophages, have been found to differentiate into multinucleated mature osteoclasts induced by chemical factors. Whether the mechanical microenvironment in which the cells are located is involved in the regulation of osteoclast fusion is unclear. We have previously found that monolayer cells exhibit the greatest shear stress in the monolayer at the boundaries of the circular and circular patterns, so we are going to study whether this local mechanical microenvironment affects the fusion of osteoclast precursor cells and what the mechanism is. In this paper, the circular and circular micromodels of multi-cell monolayer were constructed by microcontact printing, and the distribution of cell fusion rate in different regions of the cell was observed. The expression of four proteins of F-actinine Vinculin, 尾 -cateninine E-cadherin in circular and circular micropatterns was observed by immunofluorescence staining. The results showed that the fusion rate of osteoclast precursor cells induced by MC3T3-E1 supernatant was the lowest in circle and circle after 4 days and 6 days. The expression of F-actinin Vinculin, 尾 -cateninine E-cadherin was also the highest in the outermost of circular and circular micropatterns. So we speculate that the outer boundary of monolayer cells will be subjected to a higher level of shear stress, thus the cytoskeleton tension, the force between the cell and the substrate, and the interaction between the cells are larger. Finally, the rate of osteoclast fusion is small. The above results indicate that the mechanical microenvironment in the monolayer plays an important role in the fusion of osteoclast precursor cells, and the molecular mechanism that regulates the fusion process is elucidated.
【學(xué)位授予單位】：北京理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R580

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本文編號(hào)：1836685