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氟及7-NI共培養(yǎng)的SH-SY5Y細胞nNOS表達、增殖情況觀察

發(fā)布時間:2018-05-02 06:31

  本文選題: + 氟中毒; 參考:《山東醫(yī)藥》2017年11期


【摘要】:目的觀察氟及神經(jīng)型一氧化氮合成酶(nNOS)特異性抑制劑7-硝基吲唑(7-NI)共培養(yǎng)的SH-SY5Y細胞增殖情況和nNOS表達變化。方法將體外培養(yǎng)SH-SY5Y細胞分為對照組、低氟組、高氟組、7-NI組、低氟+7-NI組、高氟+7-NI組,每組6個復(fù)孔。低氟組加入0.2 mmol/L Na F,高氟組加入2.0 mmol/L Na F,7-NI組加入1μmol/L 7-NI,低氟+7-NI組加入0.2 mmol/L Na F和1μmol/L 7-NI,高氟+7-NI組加入2.0 mmol/L Na F和1μmol/L 7-NI,對照組加入等體積培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)24 h。采用CCK-8法檢測各組SH-SY5Y細胞增殖情況(以O(shè)D450表示);采用實時熒光定量PCR法檢測各組SH-SY5Y細胞NOS mRNA;采用Western blotting法檢測各組SH-SY5Y細胞NOS蛋白。結(jié)果低氟組、高氟組細胞OD450均低于對照組(P均0.05),且高氟組細胞OD450低于低氟組(P0.05);7-NI組細胞OD450與對照組相比P0.05;低氟+7-NI組細胞OD450高于低氟組(P0.05);高氟+7-NI組細胞OD450高于高氟組(P0.05)。低氟組、高氟組細胞nNOS mRNA和蛋白相對表達量均高于對照組(P均0.05),且高氟組細胞nNOS mRNA和蛋白相對表達量均高于低氟組(P均0.05);7-NI組細胞nNOS mRNA和蛋白相對表達量均低于對照組(P均0.05);低氟+7-NI組細胞nNOS mRNA和蛋白相對表達量均低于低氟組(P0.05);高氟+7-NI組細胞nNOS mRNA和蛋白相對表達量均低于高氟組(P0.05)。結(jié)論氟可以抑制SHSY5Y細胞增殖,7-NI共培養(yǎng)可以減輕氟對SH-SY5Y細胞的增殖抑制作用。
[Abstract]:Objective to observe the proliferation and nNOS expression of SH-SY5Y cells co-cultured with fluorine and neuronal nitric oxide synthase (NNOS) specific inhibitor 7-nitroindazolium. Methods SH-SY5Y cells cultured in vitro were divided into control group, low fluorine group, high fluorine group, high fluorine group, low fluorine 7-NI group and high fluorine 7-NI group. The low fluorine group added 0.2 mmol/L Na F, the high fluorine group added 2.0 mmol/L Na F 7 NI, the low fluorine 7-NI group added 0.2 mmol/L Na F and 1 渭 mol/L 7-NI, the high fluorine 7-NI group added 2.0 mmol/L Na F and 1 渭 mol/L 7-NI, and the control group added the same volume culture medium for 24 h. The proliferation of SH-SY5Y cells in each group was detected by CCK-8 assay (expressed as OD450), NOS mRNAs of SH-SY5Y cells in each group were detected by real-time fluorescence quantitative PCR assay, NOS protein of SH-SY5Y cells in each group was detected by Western blotting assay. Results the cell OD450 of low fluorine group and high fluoride group were lower than that of control group (P 0.05), and the OD450 of high fluorine group was lower than that of low fluorine group (P 0.05), the cell OD450 of high fluorine group was lower than that of control group (P 0.05), the cell OD450 of low fluorine 7-NI group was higher than that of low fluorine group (P 0.05), and the cell OD450 of high fluorine 7-NI group was higher than that of high fluoride group (P 0.05). Low fluorine group, The relative expression of nNOS mRNA and protein in the high fluorine group was higher than that in the control group (P 0.05), and the relative expression of nNOS mRNA and protein in the high fluoride group was higher than that in the low fluorine group. The relative expression of nNOS mRNA and protein in the high fluorine group was lower than that in the control group. The relative expression of nNOS mRNA and protein in the low fluorine 7-NI group was lower than that in the low fluorine group, and the relative expression of nNOS mRNA and protein in the high fluorine 7-NI group was lower than that in the high fluoride group. Conclusion fluoride can inhibit the proliferation of SHSY5Y cells and can reduce the inhibitory effect of fluoride on the proliferation of SH-SY5Y cells.
【作者單位】: 貴州醫(yī)科大學(xué)病理學(xué)教研室;貴州省腫瘤醫(yī)院;貴州省分子生物學(xué)重點實驗室;
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項目(81460482) 教育部博士學(xué)科點專項科研基金資助項目(20115215120003)
【分類號】:R595

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本文編號:1832750

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