本文選題：骨質(zhì)疏松性骨折 + Sclerostin�。� 參考：《廣州醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：【背景】骨質(zhì)疏松癥(osteoporosis,OP)是以骨量降低和骨的微細(xì)結(jié)構(gòu)蛻變?yōu)橹饕卣?同時伴隨骨的脆性增加及易于骨折的全身性骨骼疾病。伴隨醫(yī)學(xué)發(fā)展,對于OP有了清楚的認(rèn)識和大量的研究,我國也把OP作為國家重點攻克的三大老年性疾病之一。OP最嚴(yán)重的后果是骨質(zhì)疏松性骨折(osteoporotic fracture,OPF)。和一般骨折即非OPF相比,OPF愈合時間遲緩,骨折內(nèi)固定易松動,內(nèi)固定可靠性降低,再次發(fā)生骨折的概率較高。因此,如何行之有效的解決OP及OPF是臨床工作者面前的艱巨任務(wù)。OPF愈合的過程復(fù)雜而連續(xù),其中包括組織學(xué)、生物力學(xué)、內(nèi)分泌學(xué)的改變,同時包括成骨細(xì)胞(osteoblasts,OB)、破骨細(xì)胞(osteoclasts,OC)、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)、各種炎癥細(xì)胞等多種細(xì)胞的參與、作用和協(xié)調(diào)的行為。因此,OPF骨折不僅要進(jìn)行骨折治療,還要進(jìn)行抗骨質(zhì)疏松治療。大量研究表明,老年OPF患者的BMSCs增殖以及OB的分化均下降,可能提示著BMSCs是影響骨折愈合的的主要原因之一。Wnt信號通路比較復(fù)雜和龐大,涉及系統(tǒng)的因子很多,調(diào)節(jié)的機(jī)制有紛繁復(fù)雜,同時又和其他的信號系統(tǒng)和多種細(xì)胞因子相互作用。Wnt/β-catenin通路在BMSCs的增殖以及OB分化起重要作用。β連環(huán)蛋白(beta-catenin,β-catenin)是Wnt/β-catenin通路的關(guān)鍵因子之一,能夠從轉(zhuǎn)錄方面對OB分化的靶基因產(chǎn)生影響。敲除小鼠的β-catenin基因,其OB分化停滯在早期祖細(xì)胞階段。因此,β-catenin具顯著促進(jìn)OB分化的作用。來源于骨細(xì)胞的骨硬化蛋白(Sclerostin,SO)是骨形成負(fù)性調(diào)節(jié)因子,主要是因為抑制經(jīng)典的Wnt/β-catenin信號通路,進(jìn)而對OB的分化和骨形成產(chǎn)生抑制。敲除小鼠的SO基因促進(jìn)了骨形成并增加了骨強(qiáng)度。研究表明,敲除小鼠的SO基因加速骨折愈合主要是因為激活了β-catenin�；蛞陨险J(rèn)識及前期研究,本課題主要是從sclerostin和β-catenin入手研究sclerostin/β-catenin與OPF的關(guān)聯(lián)性。而目前這方面研究主要是以離體實驗為主,如培養(yǎng)動物模型和離題細(xì)胞培養(yǎng),還有一些人的血清方面的研究,卻很少以人在體組織為研究對象。但是無論那種離體研究方式都不能絕對真實反應(yīng)人體骨組織的基因表達(dá)水平,因此本研究以手術(shù)取出骨組織為研究對象,能都更加真是的反應(yīng)出OPF患者在骨折愈合過程中的Sclerostin和β-catenin的變化水平。從而更加深入的了解和研究OPF的生理病理機(jī)制�！灸康摹勘菊n題的主要目的是通過對OPF不同時間段的患者和非OPF的患者骨折端骨組織進(jìn)行對比,研究OPF患者與非OPF患者Sclerostin和β-catenin在蛋白表達(dá)和免疫組化方面的表達(dá)變化,分析其原因和臨床意義,對Wnt/β-catenin通路與OPF變化關(guān)系進(jìn)行探索,為OPF的研究和治療提供理論依據(jù)�！痉椒ā窟x擇2016年9月-2017年4月在我院就診且符合條件的患者38人。全部受試者行雙能X線吸收測定儀檢測骨密度,并登記患者的相關(guān)信息如性別、年齡、身高等,再根據(jù)WHO診斷OP的標(biāo)準(zhǔn)劃分為兩組:OPF組和非OPF組(即一般骨折組),OPF組根據(jù)骨折到手術(shù)之間的時間段的不同再分小組。手術(shù)中取患者骨折端骨組織標(biāo)本,根據(jù)需要一方面用骨組織標(biāo)本提取骨組織總蛋白進(jìn)行WB實驗,另一方面將骨組織標(biāo)本進(jìn)行固定,石蠟包埋處理后做IHC-P實驗,主要針對經(jīng)典Wnt/β-catenin信號通路的關(guān)鍵蛋白Sclerostin和β-catenin,通過WB和IHC-P實驗,比較OPF與非OPF組之間、OPF中不同時間段患者之間在骨折發(fā)生以后和骨折愈合過程中Sclerostin和β-catenin表達(dá)的不同,WB實驗數(shù)據(jù)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,使用Image J圖片分析,SPSS19.0對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析,Graph pad Prisma 5軟件制作相關(guān)統(tǒng)計圖�！窘Y(jié)果】OPF組患者常見于髖部骨折,骨折以女性居多,因本次試驗OPF組取非椎體骨組織,因此無法統(tǒng)計椎體的OPF患者發(fā)病規(guī)律,非OPF組患者以四肢骨折為主,性別無顯著差異。對股骨頸骨折取骨進(jìn)行WB實驗時,同一患者中取骨分組進(jìn)行實驗,洗骨組的蛋白表達(dá)明顯低于未洗組,而兩組結(jié)果并不影響實驗最終結(jié)果,因此,取骨進(jìn)行WB實驗時骨頭無需另外清洗,可直接用于WB實驗。WB實驗時,對比OPF組股骨頸骨折遠(yuǎn)端和近端骨組織實驗對比發(fā)現(xiàn),兩組蛋白表達(dá)無明顯差別,對于在4周以內(nèi)OPF組股骨頸骨折患者取骨組織行WB實驗時,無需區(qū)分股骨頸遠(yuǎn)端和近端。OPF患者Sclerostin蛋白高表達(dá),并且在一定時間內(nèi)持續(xù)增高不降,因無法對OP患者進(jìn)行取骨實驗,由實驗推斷OP患者的Sclerostin蛋白也是此種情況,然而Sclerostin的持續(xù)高表達(dá)抑制Wnt/β-catenin通路,抑制骨形成,可能加速OP的發(fā)生,同時其高表達(dá)延緩OPF的愈合,OPF愈合緩慢可能與此有關(guān)。β-catenin在OPF組患者骨組織中骨折初期(0-2周)低表達(dá),到一定時間后其蛋白表達(dá)有所上升(P0.05),可能因為骨折刺激Wnt/β-catenin信號通路有關(guān),但是這不足以是骨形成和骨沉積恢復(fù)到一個動態(tài)的平衡,因為Sclerostin對Wnt/β-catenin信號通路的抑制作用更為強(qiáng)大,因此OP及OPF需要干預(yù)治療�！窘Y(jié)論】1.對骨折端取骨對骨組織進(jìn)行WB實驗時,取下的骨頭無需另外清洗,可直接用于WB實驗。2.在老年股骨頸骨折(3-4周以內(nèi)),骨折遠(yuǎn)端和近端骨組織中Sclerostin和β-catenin蛋白表達(dá)無明顯變化。3.OPF骨折患者骨組織中Sclerostin蛋白的表達(dá)顯著,并在一定時期內(nèi)持續(xù)增高,抑制Wnt/β-catenin通路,推測OP的發(fā)生與其高表達(dá)有關(guān)。4.β-catenin在非OPF組患者骨組織中表達(dá)較高,在OPF組骨折初期(0-2周),其表達(dá)較低,一段時間(3-4周)過后會逐步升高。5.在OPF患者中Sclerostin的持續(xù)高表達(dá)抑制Wnt/β-catenin通路,抑制骨形成,有加速OP的發(fā)生和延緩OPF的愈合作用,β-catenin一段時間(3-4周)內(nèi)的高表達(dá)無法恢復(fù)骨吸收和骨沉積的動態(tài)平衡,OP及OPF需要干預(yù)治療。
[Abstract]:Osteoporosis ( OP ) is characterized by the reduction of bone mass and the disintegration of bone , accompanied by increased fragility of bone and easy fracture . Along with the development of medicine , the OP has a clear understanding and a lot of research , and the most serious consequence of OP is osteoporosis fracture ( OPF ) . In this study , it is important to study the role of bone morphogenetic protein ( " 尾 - catenin " ) in bone formation and to inhibit the differentiation of OB . The main aim of this project was to study the expression and the expression of 尾 - catenin in patients with OPF and non - OPF in patients with OPF and non - OPF , and to provide theoretical basis for the study and treatment of OPF . The results showed that there was no significant difference between the two groups . Conclusion : 1 . When the bone tissue is subjected to WB experiment , the bone tissue can be directly used in WB experiment .

【學(xué)位授予單位】：廣州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R580;R683

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前7條

1 邱貴興;裴福興;胡偵明;唐佩福;薛慶云;楊惠林;陶天遵;趙宇;;中國骨質(zhì)疏松性骨折診療指南(骨質(zhì)疏松性骨折診斷及治療原則)[J];中華骨與關(guān)節(jié)外科雜志;2015年05期

2 段凌;馬如彪;曾爾亢;方禹舜;趙要武;王紅;;1406例老年人身高、體重與體重指數(shù)調(diào)查分析[J];中國民康醫(yī)學(xué);2014年05期

3 曹燕明;朱曉峰;胡健輝;;血清中Sclerostin、RANKL及OPG在老年股骨轉(zhuǎn)子間骨折早期的含量改變及其臨床意義[J];中國骨質(zhì)疏松雜志;2013年03期

4 ;原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥診治指南(2011年)[J];中華骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病雜志;2011年01期

5 王|;裴國獻(xiàn);;兔骨組織總蛋白的提取和在免疫印跡法中的應(yīng)用[J];生命科學(xué)研究;2009年02期

6 王明越;龔玲;夏蓓;曹俊卿;周佩卿;胡杰;段樹民;;Clinical Observation on 96 Cases of Primary Osteoporosis Treated with Kidney-Tonifying and Bone-Strengthening Mixture[J];Journal of Traditional Chinese Medicine;2005年02期

7 劉建仁,樊粵光,王海彬,史風(fēng)雷,何偉,袁浩,王三英;大鼠骨組織蛋白質(zhì)組樣品提取方法的建立[J];廈門大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2005年03期

，

本文編號：1747213