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二甲雙胍對高糖培養(yǎng)大鼠腎小球系膜細(xì)胞氧化應(yīng)激的影響

發(fā)布時間:2018-04-06 20:07

  本文選題:二甲雙胍 切入點:氧化應(yīng)激 出處:《安徽醫(yī)科大學(xué)》2015年碩士論文


【摘要】:目的 觀察高糖條件下培養(yǎng)的大鼠腎小球系膜細(xì)胞(Mesangial Cells, MCs)氧化應(yīng)激水平以及二甲雙胍(Metformin,Met)對其氧化應(yīng)激的影響,探討二甲雙胍保護(hù)腎臟機制。方法將大鼠腎小球MCs置于體外培養(yǎng),分組如下:①「正常對照(NC)組:DMEM液(Glu 5.6mmol/L)②「高糖(HG)組:DMEM液(Glu 25mmol/L)③「二甲雙胍1組(Met 1組):DMEM液(Glu 25mmol/L)+Met (0.5mmol/L)④「二甲雙胍2組(Met 2組):)MEM液(Glu 25mmol/L)+met(1.0mmol/L)⑤「二甲雙胍3組(Met 3組):DMEM液(Glu 25mmol/L)+met(2.0mmol/L)每組細(xì)胞培養(yǎng)48h后收集上清液和細(xì)胞。采用比色法測定上清液中脂質(zhì)過氧化物丙二醛(Malondialdehydel,MDA)含量及超氧化物歧化酶(Superoxide dismutaseSOD)活性;采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(Reverse transcription polymerase chain reaction, RT-RCR)方法測定MCs內(nèi)煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸(Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate, NADPH)氧化酶的亞基p22phox及p47phox mRNA的表達(dá)。各個檢測指標(biāo)均設(shè)立6個重復(fù)組。結(jié)果(1)各組大鼠腎小球MCs上清液中SOD活性比較與NC組比較,HG組SOD活性明顯下降(P0.05),各二甲雙胍組經(jīng)不同濃度二甲雙胍干預(yù),SOD活性較HG組不同程度升高(P0.05)。其中,Met1組與Met2組SOD活性無明顯差異,但Met1與Met3組,Met2組與Met3組SOD活性均存在差異,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(2)各組大鼠腎小球MCs上清液中MDA含量比較與NC組比較,HG組MDA含量顯著增高(P0.05)。各二甲雙胍組MDA含量均較HG組含量顯著降低,但均高于NC組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。Met1組含量高于Met2組以及Met3組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。但Met2組與Met3組MDA含量無明顯差異。(3)各組大鼠腎小球MCs p22phox和p47phox mRNA表達(dá)水平的比較經(jīng)高糖刺激后,HG組p22phox、p47phox mRNA表達(dá)較NC組明顯增加(P0.05)。不同濃度二甲雙胍預(yù)先干預(yù)后,各二甲雙胍組p22phox、p47phox mRNA表達(dá)量較HG組顯著降低(P0.05),但仍高于NC組。Metl與Met2組,Metl與Met3組,Met2與Met3組之間p22phox和p47phox mRNA表達(dá)均有差異,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(4)腎小球MCs p22phox表達(dá)水平與上清液SOD活性及MDA含量的相關(guān)性分析MCs內(nèi)p22phox表達(dá)水平與上清液SOD活性呈顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.844,P0.05),與MDA含量呈顯著正相關(guān)。(r=0.911,P0.05)(5)腎小球MCs p47phox表達(dá)水平與上清液SOD活性及MDA含量的相關(guān)性分析MCs內(nèi)p47phox表達(dá)水平與上清液SOD活性呈顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.782,P0.05),與MDA含量呈顯著正相關(guān)(r=0.913,P0.05)。結(jié)論1 高糖可增強體外培養(yǎng)的MCs P47phx、P22phoxmRNA表達(dá),誘導(dǎo)其氧化應(yīng)激2二甲雙胍可抑制高糖誘導(dǎo)的體外培養(yǎng)的MCs P47phox、P22phoxmRNA表達(dá),減輕其氧化應(yīng)激,并具有一定的濃度依賴性。
[Abstract]:Objective to observe the oxidative stress level of Mesangial cells (MCs) in rat glomerular Mesangial cells (MCS) cultured in high glucose and the effect of metformin (Metformin) on oxidative stress, and to explore the protective mechanism of metformin.Methods Rat glomerular MCs was cultured in vitro.鍒嗙粍濡備笅:鈶犮,

本文編號:1718692

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