自噬在電離輻射誘導(dǎo)的小鼠精母細(xì)胞GC-2凋亡過(guò)程中的作用
發(fā)布時(shí)間:2018-04-05 01:34
本文選題:電離輻射 切入點(diǎn):精母細(xì)胞 出處:《第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)》2017年10期
【摘要】:目的探討自噬在電離輻射誘導(dǎo)小鼠精母細(xì)胞GC-2凋亡過(guò)程中的作用。方法將小鼠精母細(xì)胞GC-2分為空白對(duì)照組和不同劑量(2、4和8Gy)60Co輻射處理組。采用原位末端轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記法(TUNEL法)和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況,通過(guò)蛋白質(zhì)印跡實(shí)驗(yàn)觀察自噬相關(guān)蛋白LC3(LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ)和Beclin1表達(dá)水平的改變,使用熒光顯微鏡觀察GC-2細(xì)胞內(nèi)自噬小體的變化。用5mmol/L自噬抑制劑3-甲基腺嘌呤(3-MA)處理GC-2細(xì)胞2h再給予60 Co輻射處理,觀察自噬抑制劑聯(lián)合電離輻射對(duì)細(xì)胞凋亡率的影響以及自噬相關(guān)蛋白表達(dá)水平的改變。結(jié)果與空白對(duì)照組相比,GC-2細(xì)胞經(jīng)60Co輻射處理后細(xì)胞凋亡率升高(P0.05),熒光顯微鏡下可見細(xì)胞自噬體明顯增多,自噬相關(guān)蛋白LC3-Ⅱ以及Beclin1蛋白表達(dá)水平增加(P0.05)。預(yù)先用5mmol/L 3-MA處理GC-2細(xì)胞2h再給予60Co輻射處理,自噬相關(guān)蛋白LC3-Ⅱ以及Beclin1蛋白表達(dá)水平與未經(jīng)3-MA處理組相比降低(P0.05),細(xì)胞凋亡率升高(P0.05)。結(jié)論電離輻射可以誘導(dǎo)精母細(xì)胞發(fā)生自噬,抑制細(xì)胞自噬后可增強(qiáng)電離輻射對(duì)精母細(xì)胞的殺傷作用。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of autophagy on apoptosis of mouse spermatocyte GC-2 induced by ionizing radiation.Methods GC-2 of mouse spermatocytes was divided into blank control group, different dose group and 8Gy)60Co radiation group.Apoptosis was detected by in situ terminal transferase labeling (Tunel) and flow cytometry. The expression of autophagy associated protein LC3LC3- 鈪,
本文編號(hào):1712653
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