腎損傷分子1對高糖誘導人腎小管上皮細胞自噬作用的影響
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腎損傷分子1對高糖誘導人腎小管上皮細胞自噬作用的影響
作者: 陳軍童 [1] ; 茍蓉 [1] ; 邢玉榮 [2] ; 王劉偉 [1] ; 王瑞強 [1] ; 唐琳 [1]
摘要:
目的:研究腎損傷分子1(KIM-1)與高糖環(huán)境下人近端腎小管上皮細胞(HK-2)自噬的關系,探討KIM-1參與糖尿病腎病進展的可能機制. 方法:體外培養(yǎng)HK-2分五組:(1)對照組(D-葡萄糖5.6 mmol/L);(2)高滲組(D-葡萄糖5.6 mmol/L+D-甘露醇24.4 mmol/L);(3)高糖組(D-葡萄糖30 mmol/L);(4)高糖+KIM-1siRNA組;(5)高糖+siRNA對照組.分別于培養(yǎng)8h、16h、24h進行測定.Western印跡法檢測細胞KIM-1、自噬標志蛋白微管相關蛋白l輕鏈3Ⅱ型(LC3Ⅱ)蛋白的表達;實時定量PCR法(real-time PCR)法檢測細胞KIM-1、LC3ⅡmRNA的表達.透射電鏡下觀察細胞內自噬體的形成. 結果:與對照組相比,高糖組細胞KIM-1、LC3Ⅱ蛋白及mRNA表達呈時間依賴性增加(P<0.05),細胞內自噬體形成數(shù)量呈時間依賴性增多(P<0.05).與高糖組相比,KIM-1 siRNA轉染組細胞KIM-1、LC3Ⅱ蛋白及mRNA表達顯著減少(P<0.05),自噬體形成數(shù)量減少(P<0.05).結論:下調KIM-1的表達能顯著抑制高糖條件下腎小管上皮細胞LC3Ⅱ的表達和自噬體的形成,提示KIM-1可能通過調控高糖環(huán)境下腎小管上皮細胞自噬參與糖尿病腎病的進展.
關鍵字: 糖尿病腎病 腎小管上皮細胞 腎損傷分子1 自噬
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,本文編號:168732
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