本文選題：類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎　切入點(diǎn)：白藜蘆醇　出處：《四川醫(yī)科大學(xué)》2015年碩士論文

【摘要】：背景:類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis,RA)作為彌漫性結(jié)締組織疾病之一,已成為世界范圍內(nèi)的健康問題,嚴(yán)重影響病人及其家人的生活質(zhì)量及身心健康。RA是一種慢性系統(tǒng)性自身免疫性疾病,主要以關(guān)節(jié)滑膜為主要靶組織。介導(dǎo)關(guān)節(jié)破壞的主要細(xì)胞為成纖維樣滑膜細(xì)胞,主要病理表現(xiàn)為滑膜組織異常增殖、滑膜下層炎癥侵潤,滑膜炎可引起關(guān)節(jié)中骨與軟骨的持續(xù)損害,RA發(fā)病機(jī)制至今尚未完全明確。RA的發(fā)病與多種細(xì)胞因子相關(guān),腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)是其中重要參與因子之一。目前,對(duì)RA的主要研究集中于滑膜細(xì)胞中異常的信號(hào)途徑,Wnt信號(hào)通路在多種細(xì)胞增殖與分化方面有著關(guān)鍵調(diào)控作用,在RA滑膜炎癥以及調(diào)節(jié)骨代謝過程中起重要作用,其中Wnt/β-catenin信號(hào)通路目前研究最為詳盡,鑒于Wnt信號(hào)通路在RA的FLS中的重要調(diào)控作用,干預(yù)Wnt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中的各個(gè)環(huán)節(jié)成為治療RA的新靶點(diǎn)。白藜蘆醇(resveratrol,Res)廣泛存在于虎杖、花生及葡萄等植物當(dāng)中,是多酚類化合物之一,具有抗氧化、抗衰老、抗炎癥及保護(hù)心血管的作用,祖國醫(yī)學(xué)發(fā)現(xiàn)虎杖根(主要有效成分為白藜蘆醇)能治療關(guān)節(jié)的炎癥。近年研究者發(fā)現(xiàn)Res能誘導(dǎo)多種腫瘤細(xì)胞的凋亡,而RA中成纖維樣滑膜細(xì)胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)的增殖與分化類似于腫瘤細(xì)胞的特性。就此,本課題以滑膜細(xì)胞為研究對(duì)象,研究TNF-α對(duì)成纖維樣滑膜細(xì)胞的影響,從Wnt信號(hào)通路方面進(jìn)一步研究白藜蘆醇對(duì)成纖維樣滑膜細(xì)胞作用可能的分子機(jī)制。目的:1.觀察TNF-α對(duì)人類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細(xì)胞(Human Fibroblast-like synoviocyte of rheumatoid arthritis,HFLS-RA)增殖的影響,以及觀察不同濃度的白藜蘆醇對(duì)TNF-α誘導(dǎo)的HFLS-RA增殖的影響。2.觀察TNF-α對(duì)HFLS-RA中Wnt信號(hào)通路的調(diào)控,以及不同濃度的Res對(duì)TNF-α誘導(dǎo)的HFLS-RA的Wnt信號(hào)通路的影響。方法:1.復(fù)蘇購買的HFLS-RA細(xì)胞株后,培養(yǎng)傳代至第3-5代備用。2.采用TNF-α(10μg/l)處理HFLS-RA24h后,運(yùn)用CCK8法觀察TNF-α對(duì)HFLS-RA增殖的影響。3.不同濃度的Res(50umol/l、100umol/l、200umol/l、400umol/l)干預(yù)HFLS-RA后再用10μg/l的TNF-α刺激24h,用CCK8法測(cè)定Res對(duì)TNF-α誘導(dǎo)的HFLS-RA生長的影響。4.將濃度為10μg/l的TNF-α加入HFLS-RA中共同孵育30min,運(yùn)用Western-blot檢測(cè)其與空白對(duì)照組的s FRP4、β-catenin及C-myc蛋白的表達(dá)水平。5.將不同濃度的Res(50umol/l、100umol/l、200umol/l、400umol/l)與HFLS-RA共同孵育24h后,再用10μg/l的TNF-α刺激30min,用Western-blot檢測(cè)Res對(duì)TNF-α誘導(dǎo)的HFLS-RA中s FRP4、β-catenin及C-myc蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果:1.HFLS-RA由TNF-α誘導(dǎo)后,HFLS-RA增殖明顯增強(qiáng),不同濃度的Res(50umol/l、100umol/l、200umol/l、400umol/l)對(duì)TNF-α誘導(dǎo)后的HFLS-RA增殖有抑制作用,并呈劑量依賴性。2.經(jīng)Western-blot檢測(cè)發(fā)現(xiàn)TNF-α誘導(dǎo)后的HFLS-RA與空白對(duì)照組相比較,s FRP4的表達(dá)水平降低,β-catenin及C-myc的表達(dá)水平增高。(P0.05)3.與TNF-α組相比較,經(jīng)Western-blot方法分析顯示:不同濃度Res(50umol/l、100umol/l、200umol/l、400umol/l)組能降低TNF-α誘導(dǎo)后的HFLS-RA的β-catenin及C-myc的蛋白表達(dá)水平,s FRP4的表達(dá)水平增高。(P0.05)結(jié)論:1.TNF-α有促進(jìn)HFLS-RA增殖的作用。2.Res能抑制TNF-α誘導(dǎo)HFLS-RA增殖的作用,并呈劑量依賴性。3.TNF-α能明顯提高HFLS-RA的Wnt信號(hào)通路的活化水平。4.Res能夠劑量依耐性的抑制TNF-α誘導(dǎo)后HFLS-RA中的Wnt信號(hào)通路的活化水平。
[Abstract]:Background: rheumatoid arthritis (rheumatoid arthritis, RA) as one of the diffuse connective tissue disease, has become a worldwide health problem, seriously affecting the quality of life of patients and their families and health.RA is a chronic systemic autoimmune disease, mainly in the synovial membrane as the main target tissue. The main cell mediated joint destruction for fibroblast like synovial cells, is characterized by abnormal proliferation of synovial tissue, suhsynovial inflammatory infiltration, synovitis can cause sustained damage to bone and cartilage joint, RA pathogenesis has not yet entirely clear and the incidence of.RA related cytokines, tumor necrosis factor alpha (tumor necrosis factor alpha, TNF- alpha) is one of the important factors involved in one. At present, the main research on the RA signal pathway in synovial cells, Wnt signaling pathway in a cell proliferation and A key role of differentiation, play an important role in the regulation of bone metabolism and RA synovitis of the Wnt/ beta -catenin signal pathway on the most detailed, in view of the important role of Wnt signaling pathway in RA FLS, each link of intervention in the Wnt signal transduction pathway has become a new target for treatment of RA. Resveratrol (resveratrol, Res) widely exists in Polygonum cuspidatum, peanut and grape plants, is one of the polyphenolic compounds with antioxidant, anti-aging, anti-inflammatory and cardiovascular protection effect, Chinese Medicine found the root of Polygonum cuspidatum (the main active ingredients of resveratrol can treat inflammation) in recent years, joint. Found that Res can induce apoptosis in various tumor cells, and RA in fibroblast like synoviocytes (fibroblast-like synoviocytes, FLS) the characteristics of proliferation and differentiation of tumor cells. It is similar to this, this topic in synovium Cell as the research object, research TNF- alpha on the proliferation of fibroblast like synovial cells, resveratrol on molecular mechanism of fibroblast like synoviocytes from Wnt signaling pathway may further study. Objective: 1. to observe the effect of TNF- on human rheumatoid arthritis synovial fibroblasts (Human Fibroblast-like synoviocyte of rheumatoid arthritis, HFLS-RA) proliferation and effect observation of different concentrations of resveratrol on TNF- induced proliferation of HFLS-RA.2. to observe the regulation of TNF- alpha on Wnt signaling pathway in HFLS-RA, and the effect of Wnt signaling pathway in different concentrations of Res on TNF- induced by HFLS-RA. Methods: 1. HFLS-RA cells were purchased after recovery. Train passage to the 3-5 generation of alternate.2. by TNF- alpha (10 g/l) after HFLS-RA24h treatment, using CCK8 method to observe the effect on proliferation of HFLS-RA TNF- alpha.3. of different concentrations of Res (50umol/l, 100umol/l, 20 0umol/l, 400umol/l and HFLS-RA) after the intervention of 10 g/l TNF- stimulated 24h, CCK8 method was used to determine the effect of.4. Res on TNF- induced growth of HFLS-RA concentration is 10 g/l TNF- for HFLS-RA with alpha join 30min, using Western-blot to detect the s and control group FRP4, -catenin and beta C-myc protein expression level of.5. in different concentration of Res (50umol/l, 100umol/l, 200umol/l, 400umol/l) HFLS-RA were incubated with 24h, and 10 g/l TNF- stimulated 30min on TNF- induced by Western-blot Res HFLS-RA s FRP4 detection, the expressions of -catenin and C-myc protein beta. Results: 1.HFLS-RA induced by TNF- alpha, HFLS-RA proliferation was significantly enhanced, different concentrations of Res (50umol/l, 100umol/l, 200umol/l, 400umol/l) inhibited TNF- alpha induced HFLS-RA proliferation in a dose-dependent manner.2. was detected on Western-blot induced by TNF- after H FLS-RA compared with the control group, the expression level of s decreased FRP4, increased the expression level of -catenin beta and C-myc. (P0.05) 3. and TNF- alpha group compared with the Western-blot method analysis showed that: different concentrations of Res (50umol/l, 100umol/l, 200umol/l, 400umol/l) expression levels of beta -catenin and C-myc group can reduce TNF- after the induction of HFLS-RA alpha protein, increased the expression level of s FRP4 (P0.05). Conclusion: 1.TNF- can promote the proliferation of HFLS-RA alpha.2.Res can inhibit TNF- induced HFLS-RA proliferation in a dose-dependent manner.3.TNF- can significantly improve the level of.4.Res alpha activation of Wnt signaling pathway to HFLS-RA high dose according to activation the level of Wnt signaling pathway inhibited TNF- induced tolerance in HFLS-RA.

【學(xué)位授予單位】：四川醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R593.22

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王春梅,姜濤,周春燕;誘導(dǎo)心臟發(fā)生的早期信號(hào)通路[J];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2004年05期

2 解文博;葉玲;;p38絲裂原活化蛋白激酶信號(hào)通路的部分研究方法[J];牙體牙髓牙周病學(xué)雜志;2009年10期

3 黎增輝;廖愛軍;;JNK信號(hào)通路[J];國際病理科學(xué)與臨床雜志;2010年03期

4 李林;;Wnt信號(hào)通路及其與骨形成的關(guān)系[J];臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2010年20期

5 李鳳賀;辛世杰;楊棟;惠林萍;楊昱;張健;段志泉;;SHH信號(hào)通路在血小板源性生長因子誘導(dǎo)的血管平滑肌細(xì)胞增殖中的作用研究[J];中國血管外科雜志(電子版);2010年04期

6 陳建勇;王聰;王娟;曹禮榮;;MAPK信號(hào)通路研究進(jìn)展[J];中國醫(yī)藥科學(xué);2011年08期

7 李寶新;李玉坤;;Wnt信號(hào)通路對(duì)骨調(diào)節(jié)研究新進(jìn)展[J];國際骨科學(xué)雜志;2008年03期

8 李佳殷;林麗珠;;JNK信號(hào)通路在惡性腫瘤中的研究進(jìn)展[J];實(shí)用中醫(yī)內(nèi)科雜志;2012年18期

9 張玉婷;劉立新;;胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白在相關(guān)信號(hào)通路中的作用研究進(jìn)展[J];中華消化病與影像雜志(電子版);2012年05期

10 席曉慧;王福文;牟艷玲;;Wnt信號(hào)通路與心血管疾病的研究進(jìn)展[J];食品與藥品;2014年01期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 程華;王文;;經(jīng)典Wnt信號(hào)通路抑制劑[A];2011全國老年癡呆與衰老相關(guān)疾病學(xué)術(shù)會(huì)議第三屆山東省神經(jīng)內(nèi)科醫(yī)師（學(xué)術(shù)）論壇論文匯編[C];2011年

2 蔣瑩;程華;張麗;艾厚喜;王文;;經(jīng)典Wnt信號(hào)通路抑制劑[A];第一屆全國麻醉藥理專業(yè)委員會(huì)第二次學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2011年

3 蔣瑩;程華;張麗;艾厚喜;王文;;經(jīng)典Wnt信號(hào)通路抑制劑[A];中國成人醫(yī)藥教育論壇（4）[C];2011年

4 蔣瑩;程華;張麗;艾厚喜;王文;;經(jīng)典Wnt信號(hào)通路抑制劑[A];中國藥理學(xué)會(huì)補(bǔ)益藥藥理專業(yè)委員會(huì)成立大會(huì)暨人參及補(bǔ)益藥學(xué)術(shù)研討會(huì)會(huì)議論文集[C];2011年

5 李艷菲;艾厚喜;孫芳玲;張麗;蔣瑩;王文;;Wnt信號(hào)通路研究新進(jìn)展[A];2013年中國藥學(xué)大會(huì)暨第十三屆中國藥師周論文集[C];2013年

6 李艷菲;艾厚喜;孫芳玲;張麗;蔣瑩;王文;;Wnt信號(hào)通路研究新進(jìn)展[A];2013年全國老年性癡呆與相關(guān)疾病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2013年

7 李艷菲;艾厚喜;孫芳玲;張麗;蔣瑩;王文;;Wnt信號(hào)通路研究新進(jìn)展[A];第三屆中國藥理學(xué)會(huì)補(bǔ)益藥藥理專業(yè)委員會(huì)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2013年

8 季宇彬;胡哲清;鄒翔;;MAPK信號(hào)通路及其研究進(jìn)展[A];轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研討會(huì)論文集[C];2010年

9 程華;孫芳玲;艾厚喜;張麗;蔣瑩;王文;;Wnt信號(hào)通路與血管發(fā)生[A];全國第三次麻醉藥理學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2012年

10 李林;;利用小分子探針研究經(jīng)典Wnt信號(hào)通路的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制[A];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)第十一次會(huì)員代表大會(huì)暨2014年全國學(xué)術(shù)會(huì)議論文集——專題報(bào)告七[C];2014年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前6條

1 劉海英;美發(fā)現(xiàn)兩種細(xì)胞信號(hào)通路互動(dòng)機(jī)制[N];科技日?qǐng)?bào);2009年

2 記者 劉海英;英發(fā)現(xiàn)細(xì)胞信號(hào)通路新“剎車”蛋白[N];科技日?qǐng)?bào);2012年

3 衣曉峰　陳英云 記者 李麗云;結(jié)腸癌發(fā)生中新的信號(hào)通路找到[N];科技日?qǐng)?bào);2009年

4 記者 許琦敏;減肥信號(hào)受控于腦中“通訊員”[N];文匯報(bào);2008年

5 記者 劉海英;一種蛋白決定人的抗壓能力[N];科技日?qǐng)?bào);2011年

6 通訊員 喬蕤琳 記者 衣曉峰 聶松義;癌癥中小分子和微小核苷酸有關(guān)聯(lián)[N];健康報(bào);2012年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 王森;乙型肝炎病毒表面抗原抑制TLR2和TLR4信號(hào)通路的機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

2 尚果果;NRF2抗氧化應(yīng)激信號(hào)通路的活化在糖尿病腎病中的保護(hù)作用及其機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

3 孫鼎琪;Akt信號(hào)通路在膀胱腫瘤的進(jìn)展及化療敏感性的實(shí)驗(yàn)研究[D];山東大學(xué);2015年

4 白秀峰;新基因Gsdma3對(duì)小鼠毛囊周期及Wnt/β-catenin信號(hào)通路作用的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

5 張俊波;PI3K/Akt信號(hào)通路調(diào)控胞內(nèi)布魯氏菌16M存活的分子機(jī)制研究[D];石河子大學(xué);2014年

6 成旭東;黃芪活性物質(zhì)篩選及基于PKC-ERK信號(hào)通路抑制肺癌的作用機(jī)理研究[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2015年

7 路康;STAT3信號(hào)通路介導(dǎo)CLL和MCL發(fā)生組蛋白去乙�；敢种苿┠退幍臋C(jī)制研究[D];山東大學(xué);2015年

8 王立榮;信號(hào)通路相關(guān)文獻(xiàn)挖掘與分析方法研究[D];中國科學(xué)技術(shù)大學(xué);2007年

9 陸誠;Wnt信號(hào)通路在軟骨發(fā)育中的功能研究[D];上海交通大學(xué);2013年

10 周遠(yuǎn)飛;SIRT1調(diào)控Wnt信號(hào)通路影響間充質(zhì)干細(xì)胞成脂定向的機(jī)制[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 韓紹芳;小鼠主要嗅覺表皮組織內(nèi)AC3缺失對(duì)相關(guān)因子及信號(hào)通路的影響[D];河北大學(xué);2015年

2 李玉娟;Hedgehog信號(hào)通路在大鼠急性胰腺炎中的作用及其對(duì)TNF-α、IL-10的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

3 趙玲玲;FLCN與PAT1相互作用調(diào)控mTORC1信號(hào)通路的機(jī)理研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2015年

4 努爾古麗·蘇里坦;mir-260和mir-240調(diào)控錢蟲壽命的研究[D];華中師范大學(xué);2015年

5 王瑜;晚期糖基化終末產(chǎn)物和骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞VEGF信號(hào)通路的影響及其機(jī)制探討[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

6 楊瑩瑩;microRNA-203通過APC介導(dǎo)活化Wnt/β-catenin信號(hào)通路在佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠成纖維樣滑膜細(xì)胞中的調(diào)控作用及機(jī)制研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

7 徐貞貞;PM2.5對(duì)人支氣管上皮細(xì)胞JAK/STAT信號(hào)通路的影響[D];山西醫(yī)科大學(xué);2015年

8 徐國棟;芪蛭皺肺顆粒調(diào)控肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞NF-κB信號(hào)通路的研究[D];甘肅中醫(yī)藥大學(xué)(原名：甘肅中醫(yī)學(xué)院);2015年

9 陸兆雙;多聚左旋精氨酸促進(jìn)LPS誘導(dǎo)的NCI-H292細(xì)胞釋放炎癥因子IL-6、IL-8的信號(hào)通路研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

10 修麗梅;P38MAPK信號(hào)通路在肢體缺血預(yù)處理腦保護(hù)中的作用[D];山西醫(yī)科大學(xué);2015年

，

本文編號(hào)：1655682